| 缩略语表 | 第1-14页 |
| 中文摘要 | 第14-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-39页 |
| 1 韧皮部特异启动子及其在植物基因工程中的应用 | 第17-24页 |
| ·启动子概述 | 第17-18页 |
| ·韧皮部特异性启动子的特点 | 第18-19页 |
| ·表达特点 | 第18页 |
| ·结构特点 | 第18-19页 |
| ·韧皮部特异性启动子的分类和介绍 | 第19-22页 |
| ·植物本身来源的韧皮部特异性启动子 | 第19-20页 |
| ·植物病毒来源的韧皮部特异性启动子 | 第20-21页 |
| ·植物病原细菌来源的韧皮部特异性启动子 | 第21-22页 |
| ·韧皮部特异性启动子在植物基因工程中的应用 | 第22-24页 |
| 2 抗菌肽及其在植物抗病基因工程中的应用 | 第24-26页 |
| ·抗菌肽的产生、分类及结构特点 | 第24页 |
| ·抗菌肽的作用原理 | 第24页 |
| ·抗菌肽在植物抗病基因工程中的应用及存在的问题 | 第24-26页 |
| ·抗菌肽在植物抗病基因工程中的应用 | 第25页 |
| ·存在的问题 | 第25-26页 |
| 3 果树遗传转化的技术 | 第26-36页 |
| ·果树遗传转化的技术 | 第27-30页 |
| ·遗传转化的方法 | 第27-28页 |
| ·用于转化的目的基因 | 第28页 |
| ·转化时所用的受体系统 | 第28-29页 |
| ·影响农杆菌介导的转化效率的因素 | 第29-30页 |
| ·果树遗传转化的优势及问题 | 第30-31页 |
| ·遗传转化技术在果树品种改良上的优势 | 第30页 |
| ·存在的问题 | 第30-31页 |
| ·提高转基因植物中外源基因表达水平的技术 | 第31-36页 |
| ·启动子及终止子的修饰与改造 | 第31-32页 |
| ·使用植物偏爱密码子 | 第32页 |
| ·利用信号肽进行蛋白质的定向运输 | 第32页 |
| ·构建含MAR的表达载体 | 第32-33页 |
| ·降低外源基因的拷贝数 | 第33-34页 |
| ·建立位点特异的重组体系 | 第34-35页 |
| ·叶绿体和线粒体转化的应用 | 第35-36页 |
| ·果树遗传转化的展望 | 第36页 |
| ·建立高效稳定的转化体系 | 第36页 |
| ·加快果树自身目的基因的分离与克隆 | 第36页 |
| ·开展目的基因在果树体内表达调控规律研究 | 第36页 |
| ·开展果树中组织特异启动子研究 | 第36页 |
| 4 选题依据及研究内容 | 第36-39页 |
| ·选题依据与研究意义 | 第36-38页 |
| ·研究内容 | 第38-39页 |
| 第二章 笋瓜韧皮部特异启动子PP2-P的克隆及序列分析 | 第39-48页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·菌种和质粒 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·实验中使用的主要溶液的配制 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·植物总 DNA提取和浓度测定 | 第41页 |
| ·PSP特异引物的 PCR扩增 | 第41页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第41页 |
| ·回收纯化的产物与载体的连接 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌 TG1感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 TG1感受态细胞 | 第42页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第42-43页 |
| ·DNA序列测定 | 第43页 |
| ·序列分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·PSP的克隆 | 第43-45页 |
| ·PSP的序列及分析 | 第45-48页 |
| 第三章 柑桔密码子用法分析及抗菌肽D基因密码子优化合成 | 第48-66页 |
| 1 材料和方法 | 第49-50页 |
| ·密码子用法分析 | 第49-50页 |
| ·抗菌肽 D基因的密码子优化和合成 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-52页 |
| ·不同种类柑桔及柑桔整体高频密码子(HF)的确定 | 第50-51页 |
| ·密码子偏爱性比较位 | 第51页 |
| ·含柑桔偏爱密码子的新抗菌肽 D基因的设计及人工合成 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-66页 |
| 第四章 几个新植物表达载体的构建及转化农杆菌 | 第66-83页 |
| 1 材料与方法 | 第66-70页 |
| ·实验材料 | 第67-68页 |
| ·菌种和质粒 | 第67页 |
| ·引物、酶及生化药剂 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-81页 |
| ·由 PSP驱动 GUS报告基因的重组植物表达载体pHZ01构建 | 第70-71页 |
| ·由 PSP驱动 GUSA报告基因的重组植物表达载体 pHZ02构建 | 第71-72页 |
| ·由 PSP驱动 GFP报告基因的重组植物表达载体pHZ03构建 | 第72-73页 |
| ·由 PSP驱动 GFP和GUSA融合报告基因的重组植物表达载体pHZ04构建 | 第73-75页 |
| ·由 CaMV35S驱动 CAPD目的基因的重组植物表达载体pHZ05构建 | 第75页 |
| ·由 PSP驱动 CAPD目的基因的重组植物表达载体pHZ06构建 | 第75-77页 |
| ·重组植物表达载体转化农杆菌 | 第77-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 第五章 新植物表达载体转化柑桔的研究 | 第83-96页 |
| 1 材料和方法 | 第84-87页 |
| ·组培再生体系建立 | 第84-85页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-85页 |
| ·农杆菌介导的上胚轴遗传转化 | 第85-87页 |
| ·实验材料 | 第85页 |
| ·实验方法 | 第85-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-93页 |
| ·组培再生体系建立 | 第87-89页 |
| ·总体情况 | 第87-88页 |
| ·外植体再生不定芽或芽点的形态学观察 | 第88页 |
| ·6-BA浓度对再生的影响 | 第88页 |
| ·添加其它生长调节剂对再生的影响 | 第88-89页 |
| ·不同外植体的再生效率 | 第89页 |
| ·高效再生体系的验证及完整植株的获得 | 第89页 |
| ·农杆菌介导的上胚轴遗传转化 | 第89-93页 |
| ·抗性芽的筛选 | 第89-90页 |
| ·抗性芽的鉴定和转基因植株的获得 | 第90-93页 |
| 3 讨论 | 第93-96页 |
| ·关于组培再生体系建立 | 第93-94页 |
| ·关于柑橘转化时筛选和检测技术 | 第94-96页 |
| ·基因型的影响 | 第94页 |
| ·筛选的策略 | 第94页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第94-96页 |
| 第六章 新植物表达载体转化猕猴桃的研究 | 第96-108页 |
| 1 材料和方法 | 第97-99页 |
| ·材料 | 第97-98页 |
| ·外植体 | 第97页 |
| ·菌株和质粒 | 第97页 |
| ·化学药品和试剂 | 第97页 |
| ·培养基 | 第97-98页 |
| ·PCR检测引物 | 第98页 |
| ·方法 | 第98-99页 |
| ·高效组培再生体系的建立 | 第98页 |
| ·农杆菌介导的叶盘转化 | 第98-99页 |
| 2 结果 | 第99-106页 |
| ·猕猴桃离体叶片高效组培再生体系的建立 | 第99-100页 |
| ·叶盘放置方式对再生的影响 | 第99-100页 |
| ·暗培养时间对再生的影响 | 第100页 |
| ·高效再生体系的验证 | 第100页 |
| ·猕猴桃转基因植株的获得 | 第100-106页 |
| ·抗性芽的筛选 | 第100-101页 |
| ·抗性芽的鉴定和转基因植株的获得 | 第101-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| ·关于猕猴桃组培再生体系 | 第106页 |
| ·关于猕猴桃转基因时的筛选策略 | 第106页 |
| ·获得转pHZ05和pHZ06转基因植株的意义 | 第106-108页 |
| 第七章 根癌农杆菌介导的新植物表达载体转化草莓研究 | 第108-115页 |
| 1 材料和方法 | 第108-110页 |
| ·材料 | 第108-109页 |
| ·外植体 | 第109页 |
| ·菌株和质粒 | 第109页 |
| ·化学试剂和药品 | 第109页 |
| ·培养基 | 第109页 |
| ·PCR检测 | 第109页 |
| ·方法 | 第109-110页 |
| ·农杆菌的培养 | 第109页 |
| ·受体材料的预培养、农杆菌的浸染及共培养 | 第109页 |
| ·抗性芽的筛选和再生 | 第109页 |
| ·抗性芽的生根及转基因植株获得 | 第109页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第109-110页 |
| 2 结果 | 第110-114页 |
| ·抗性芽的筛选 | 第110页 |
| ·抗性植株的鉴定和转基因植株的获得 | 第110-114页 |
| ·多种引物的 PCR鉴定 | 第110-114页 |
| ·测序鉴定和转基因植株的获得 | 第114页 |
| 3 讨论 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-126页 |
| 英文摘要 | 第126-129页 |
| 图版I | 第129-130页 |
| 图版II | 第130-131页 |
| 图版III | 第131-132页 |
| 图版IV | 第132-133页 |
| 图版V | 第133-135页 |
| 附录1 各检测引物扩增出的片段序列 | 第135-138页 |
| 附录2 转基因植株 CAPD目的基因引物 PCR产物测序结果 | 第138-139页 |
| 附录3 攻博期间承担的科研课题 | 第139-140页 |
| 附录4 攻博期间发表的论文和论著 | 第140-142页 |
