| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 猪主要病毒性疾病的流行概况 | 第10-16页 |
| 1.猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) | 第11-13页 |
| 2.猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2) | 第13-14页 |
| 3.猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV) | 第14页 |
| 4.细小病毒(Porcine parvovious,PPV) | 第14-16页 |
| 第二章 PRRSV、PCV-2、PRV、PPV的病原学特征 | 第16-23页 |
| 1.PRRSV的病原学特征 | 第16-18页 |
| ·形态和理化特性 | 第16页 |
| ·病毒的基因组结构及编码蛋白 | 第16-18页 |
| 2.PCV-2的病原学特征 | 第18-19页 |
| ·形态与理化特性 | 第18页 |
| ·病毒的基因组结构及编码蛋白 | 第18-19页 |
| 3.PRV的病原学特征 | 第19-21页 |
| ·形态与理化特性 | 第20页 |
| ·病毒的基因组结构及所编码的蛋白 | 第20-21页 |
| 4.PPV的病原学特征 | 第21-23页 |
| ·形态与理化特性 | 第21-22页 |
| ·病毒的基因组结构及所编码的蛋白 | 第22-23页 |
| 第三章 基于核酸的病原检测技术 | 第23-32页 |
| 1.核酸探针技术(Nucleic Acid Probe) | 第23-25页 |
| 2.聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第25-28页 |
| ·PCR方法检测PCV | 第25-26页 |
| ·PCR方法检测PRV | 第26页 |
| ·PCR方法检测PPV | 第26-27页 |
| ·RT-PCR方法检测PRRSV | 第27-28页 |
| 3.多重PCR(Multiplex PCR,mPCR) | 第28-29页 |
| 4.多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism,RCR-RFLP) | 第29-30页 |
| 5.荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第30-32页 |
| 第四章 PRRSV荧光定量PCR检测方法的建立 | 第32-43页 |
| 1.材料与方法 | 第33-36页 |
| ·病毒样品 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·引物与TaqMan探针的设计 | 第33-34页 |
| ·RNA提取 | 第34-35页 |
| ·cDNA合成 | 第35页 |
| ·常规PCR | 第35-36页 |
| ·巢式PCR | 第36页 |
| ·阳性质粒对照的构建 | 第36页 |
| ·荧光定量PCR及标准曲线的建立 | 第36页 |
| 2.结果 | 第36-41页 |
| ·RT-PCR方法检测PRRSV阳性 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR敏感性 | 第37页 |
| ·阳性质粒对照的构建 | 第37-38页 |
| ·荧光定量PCR的特异性 | 第38页 |
| ·荧光定量PCR的敏感性 | 第38-39页 |
| ·对于临床疑似猪组织样品的检测 | 第39-41页 |
| 3.讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 PCV-2、PRV和PPV三重PCR检测方法的建立 | 第43-53页 |
| 1.材料 | 第44页 |
| ·病毒与病料 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| 2.方法 | 第44-46页 |
| ·引物设计 | 第44-45页 |
| ·病毒核酸抽提 | 第45页 |
| ·单模板PCR检测 | 第45-46页 |
| ·三重PCR条件优化 | 第46页 |
| ·自然感染病料的检测 | 第46页 |
| 3.结果 | 第46-51页 |
| ·三重PCR的特异性试验 | 第46页 |
| ·三重PCR的敏感性试验 | 第46-47页 |
| ·三重PCR最优条件筛选 | 第47-48页 |
| ·三重PCR的重复性 | 第48-51页 |
| 4.讨论 | 第51-53页 |
| 第六章 PCR体系在临床病料检测中的应用 | 第53-57页 |
| 1.材料和方法 | 第53-54页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-54页 |
| 2.结果与讨论 | 第54-57页 |
| 附录一 对190份送检痫料的主要临床症状及主要PCR检测结果记录表 | 第57-67页 |
| 附录二 参考文献 | 第67-78页 |
| 附录三 硕士期间发表和投稿的论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
