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花粉特异表达的微管结合蛋白SB401的特性分析

目录第1-7页
中文摘要第7-8页
英文摘要第8-9页
缩略词第9-10页
第一章 文献综述第10-26页
   ·微管第10-18页
     ·微管及微管蛋白第10-11页
     ·微管体外聚合的动态特性第11-12页
     ·微管结合蛋白第12-14页
     ·植物细胞中的微管结合蛋白(microtubule associated proteins-MAPs)第14-18页
   ·微丝第18-19页
     ·单体肌动蛋白(G-actin)和丝状肌动蛋白(F-actin)第18页
     ·肌动蛋白结合蛋白(actin-binding protein,ABPs)第18-19页
   ·植物细胞中既可与微管结合又可与微丝结合的蛋白第19-20页
     ·EF-1α第19-20页
     ·MAP-190第20页
   ·花粉及花粉管中的骨架系统第20-24页
     ·花粉管中的微丝骨架系统第21-22页
     ·花粉管中的微管骨架系统第22页
     ·微管、微丝在细胞极性生长过程中的作用第22-24页
   ·本课题研究的目的和意义第24-26页
第二章 材料与方法第26-40页
   ·微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(G-actin)的提取与纯化第26-28页
     ·微管蛋白(tubulin)的纯化与标记第26-27页
     ·肌动蛋白(G-actin)的纯化第27-28页
   ·SB401蛋白原核表达载体的构建及蛋白的表达与纯化第28-33页
     ·SB401蛋白原核表达载体的构建第28-32页
     ·SB401蛋白的原核表达与纯化第32-33页
   ·SB401蛋白与微管、微丝相互作用研究的实验方法第33-40页
     ·taxol稳定的微管的制备第33-34页
     ·phalloidin稳定的微丝的制备第34页
     ·SB401蛋白与微管、微丝结合的共沉淀分析第34页
     ·SB401蛋白诱导微管、微丝成束的激光共聚焦显微镜观察分析第34页
     ·盐对SB401诱导成束的微管、微丝的作用分析第34页
     ·电镜样品制备及观察第34-35页
     ·SB401寡聚体分析的EDC交联和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第35页
     ·SB40蛋白与微管蛋白作用研究的点印迹和GST-SB401融合蛋白沉降技术第35-36页
     ·SB401蛋白对微管聚合解聚动态作用研究的浊度分析第36页
     ·SB401蛋白对微丝聚合动态作用研究的荧光光度分析第36页
     ·SB401蛋白对微丝聚合动态作用研究的共沉淀法分析第36页
     ·GTP对SB401蛋白诱导微管成束活性的调节第36页
     ·马铃薯花粉细胞免疫荧光实验第36-37页
     ·实验所用常规试剂的配制第37-38页
     ·主要仪器设备第38页
     ·实验中所用的主要化学试剂生产厂家第38-40页
第三章 结果与分析第40-62页
   ·微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(G-actin)的提取与纯化第40页
   ·原核表达载体的构建及原核表达SB401蛋白的提取与纯化第40-43页
     ·原核表达载体的构建第40-41页
     ·原核表达SB401蛋白的提取与纯化第41-42页
     ·SB401蛋白在不同凝胶浓度的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率第42-43页
   ·SB401蛋白与微管结合第43-44页
   ·SB401蛋白诱导taxol稳定的微管形成微管束第44-47页
   ·SB401蛋白在体外条件下可以形成寡聚体结构第47-49页
     ·SB401蛋白在体外条件下形成寡聚体结构第47-48页
     ·二硫键是SB401蛋白形成二聚体的主要化学键第48-49页
   ·SB401蛋白与微丝结合第49-50页
   ·SB401蛋白诱导微丝形成微丝束第50-51页
   ·SB401蛋白同时结合微管与微丝,诱导形成微管-微丝束第51-54页
   ·SB401蛋白与微管蛋白结合第54-55页
   ·SB401蛋白调节体外微管聚合解聚动态第55-58页
   ·SB401蛋白对微丝聚合动态的影响第58-59页
   ·GTP对SB401蛋白诱导微管成束活性的调节第59-60页
   ·SB401蛋白在花粉管中的分布第60-62页
第四章 讨论第62-67页
   ·SB401蛋白是一个花粉特异表达的植物微管结合蛋白第62页
   ·SB401蛋白可能在花粉管生长中具有重要生理功能第62-64页
   ·SB401蛋白与微管、微丝结合特性第64页
   ·SB401蛋白对微管体外聚合动态的调节第64-65页
   ·SB401蛋白在不同浓度SDS-PAGE中表观分子量比实际分子量偏大的原因分析第65-67页
第五章 结论第67-68页
参考文献第68-83页
致谢第83页

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