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中国H9N2亚型禽流感病毒进化分析与H5N1亚型禽流感病毒标记疫苗的研究

第一章 引言第1-34页
 1 流感病毒致病力、宿主范围和种间传播的决定因素第15-23页
   ·流感病毒的复制第15-16页
   ·流感病毒表面蛋白HA和NA对致病力的影响第16-19页
   ·流感病毒在宿主细胞内的复制能力第19-20页
   ·流感病毒与细胞凋亡第20-21页
   ·流感病毒与宿主的免疫反应第21-22页
   ·流感病毒在宿主体内的适应,进化,持续感染和种间传播第22-23页
 2 禽流感流行现状第23-26页
   ·H5和H7亚型禽流感第23-25页
   ·H9N2亚型禽流感第25-26页
 3 禽流感疫苗第26-28页
   ·灭活全病毒疫苗第26-27页
   ·亚单位疫苗第27页
   ·重组活载体疫苗第27页
   ·DNA疫苗第27-28页
   ·标记疫苗第28页
 4 A型流感病毒的反向遗传技术第28-32页
   ·流感病毒反向遗传技术的发展过程第28-30页
   ·流感病毒反向遗传技术的应用第30-32页
 5 本研究的目的和意义第32-34页
第二章 H9N2亚型禽流感病毒的抗原性分析及部分毒株的免疫原性分析第34-43页
 1 材料与方法第34-36页
   ·病毒分离株第34-35页
   ·SPF鸡和SPF鸡胚第35页
   ·分型、鉴定用血清第35页
   ·病毒分离及有限稀释克隆纯化第35页
   ·鸡胚半数感染量(EID_(50))测定第35页
   ·病毒的抗原性分析第35-36页
   ·三株H9N2亚型禽流感病毒的鼻腔感染试验和灭活疫苗免疫原性分析第36页
 2 结果第36-41页
   ·鸡胚半数感染量(EID_(50))测定结果第36页
   ·抗原性分析第36-39页
   ·三株H9N2亚型病毒的感染试验和交叉免疫分析第39-41页
 3 讨论第41-43页
第三章 H9N2亚型禽流感病毒对小鼠的致病性研究第43-48页
 1 材料与方法第43页
   ·实验用毒株第43页
   ·实验动物第43页
   ·27株病毒对小鼠的致病性试验第43页
   ·小鼠脏器的病毒滴定第43页
   ·8株首次感染试验对小鼠无感染性病毒验证试验第43页
 2 结果第43-46页
   ·小鼠体重变化结果第43-44页
   ·27株H9N2禽流感病毒鼻腔感染BALB/c小鼠脏器病毒分离结果第44页
   ·8株病毒对小鼠感染性验证试验第44-46页
   ·27株病毒对小鼠感染性划分第46页
 3 讨论第46-48页
第四章 H9N2亚型禽流感病毒进化分析第48-84页
 1 材料与方法第48-49页
   ·材料第48页
   ·遗化演化分析第48-49页
 2 结果第49-78页
   ·序列测定结果第49-50页
   ·HA基因第50-55页
   ·NA基因第55-62页
   ·PB2基因第62页
   ·PB1基因第62-63页
   ·PA基因第63-69页
   ·NP基因第69-70页
   ·M基因第70-73页
   ·NS基因第73-78页
   ·27株H9N2亚型禽流感病毒基因型划分结果第78页
 3 讨论第78-84页
   ·关于遗传演化分析第78-81页
   ·关于HA基因氨基酸序列分析第81-82页
   ·关于NA基因的氨基酸序列第82-84页
第五章 部分H9N2亚型禽流感病毒对金刚烷胺抗药性研究第84-88页
 1 材料与方法第84-85页
   ·材料第84页
   ·七株H9N2亚型禽流感病毒细胞半数感染量(TCID_(50))的测定第84页
   ·七株H9N2亚型禽流感病毒对金刚烷胺类药物1-adamantylamine的敏感性试验第84-85页
 2 结果第85-86页
   ·组织半数感染量(TCID_(50))测定结果第85页
   ·对1-adamantylamine抗药性分析结果第85-86页
 3 讨论第86-88页
第六章 H5N1亚型禽流感病毒标记疫苗的初步研究第88-109页
 1 材料与方法第88-95页
   ·病毒株第88页
   ·SPF鸡和SPF鸡胚第88页
   ·质粒载体及转染质粒第88页
   ·主要试剂和仪器第88-89页
   ·病毒RNA提取、反转录和PCR第89页
   ·序列测定第89-90页
   ·引物第90页
   ·HA和NA转染质粒pBD-MutHA和pBD-NA-5B19的构建第90-91页
   ·分子致弱的H5N1亚型禽流感病毒标记疫苗株H5N1/PR8-5B19的救获第91-92页
   ·H5N1/PR8-5B19疫苗株的生物学特性第92-93页
   ·一种能够区分H5N1/PR8-5B19标记疫苗免疫血清和非标记疫苗免疫血清或自然感染鸡血清的ELISA检测方法的初步建立第93-94页
   ·H5N1/PR8-5B19疫苗免疫试验第94-95页
 2 结果第95-104页
   ·pBD-MutHA质粒构建第95-97页
   ·pBD-NA-5B19质粒构建第97-98页
   ·H5N1/PR8-5B19的救获和病毒鉴定第98-99页
   ·H5N1/PR8-5B19疫苗株的生物学特性第99-101页
   ·多肽ELISA方法的初步建立第101-102页
   ·标记疫苗免疫后HI抗体和5B19表位ELISA抗体的检测第102-104页
   ·标记疫苗免疫保护试验第104页
 3 讨论第104-109页
结论第109-110页
参考文献第110-127页
附录第127-175页
 附录1 27株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列第127-173页
 附录2 H5N1/PR8-5B19病毒分子修饰的HA和NA基因第173-175页
致谢第175-176页
简历第176-177页

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