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弓形虫P30单基因疫苗与P30-ROP2复合基因疫苗免疫小鼠的实验研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-9页
符号说明第9-11页
前言第11-13页
技术路线第13-14页
第一部分 弓形虫主要表面抗原P30单价基因疫苗的构建第14-27页
 材料与方法第14-21页
  材料第14-15页
  方法第15-21页
   目的基因的获取第15-19页
   目的基因与表达载体pcDNA3.1(-)的连接第19-21页
 结果第21-24页
  P30基因PCR结果第21页
  P30 TA-cloning的酶切鉴定第21页
  表达重组子pcDNA3.1-P30的构建及酶切鉴定第21页
  测序结果第21-24页
 讨论第24-27页
第二部分 弓形虫主要表面抗原P30与融合蛋白P30-ROP2在Hela细胞中的表达第27-38页
 材料与方法第27-33页
  材料第27-28页
  方法第28-33页
   重组质粒pcDNA3.1-P30、pcDNA3.1-P30-ROP2转染Hela细胞第28-30页
   抽提细胞总RNA第30-31页
   RT-PCR第31-33页
 结果第33-36页
  β-actin基因PCR结果第33页
  P30基因PCR结果第33页
  P30-ROP2基凼PCR结果第33-36页
 讨论第36-38页
第三部分 P30单基因及P30-ROP2复合基因疫苗对小鼠的免疫效果第38-57页
 材料与方法第38-49页
  材料第38-41页
  方法第41-49页
   质粒pcDNA3.1及pcDNA3.1-P30、pcDNA3.1-P30-ROP2的大量制备第41-42页
   核酸疫苗的免疫接种第42-43页
   体液免疫指标测定第43-44页
   细胞免疫指标测定第44-47页
   弓形虫速殖子攻击感染第47-48页
   实验数据分析第48-49页
 结果第49-53页
  抗体应答ELISA结果第49页
  血清IFN-γ测定结果第49-50页
  血清IL-4测定结果第50页
  淋巴细胞转化实验测定结果第50-51页
  NK细胞杀伤实验测定结果第51页
  淋巴细胞亚群分型结果第51-52页
  弓形虫RH株速殖子攻击感染后免疫小鼠生存时间第52-53页
 讨论第53-57页
小结第57-58页
附图第58-62页
参考文献第62-65页
致谢第65-70页
攻读学位期间发表的论文目录第70-65页

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