| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-21页 |
| 前言 | 第21-24页 |
| 第一部分 ICA及活性代谢产物诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞的药效学研究 | 第24-39页 |
| 一、仪器与试药 | 第25-26页 |
| 二、实验方法 | 第26-29页 |
| (一) ES细胞支持培养 | 第26-27页 |
| (二) ES细胞体外定向分化为心肌细胞培养 | 第27-28页 |
| (三) MTT法测定ICA，ICT和DICT体外抑制ES细胞增殖实验 | 第28页 |
| (四) ICA、ICT和DICT诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞的培养 | 第28-29页 |
| 三、实验结果 | 第29-35页 |
| (一) MEF细胞、ES细胞及不同分化阶段的细胞形态观察 | 第29-31页 |
| (二) ICA、ICT和DICT对ES细胞体外增殖影响 | 第31-32页 |
| (三) ICA、ICT和DICT诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞的量效关系和时效关系研究 | 第32-35页 |
| 四、讨论 | 第35-38页 |
| 五、小结 | 第38-39页 |
| 第二部分 ICA诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞的生物信息研究 | 第39-59页 |
| 一、仪器与试药 | 第40-41页 |
| 二、实验方法 | 第41-45页 |
| (一) RT-PCR法检测心肌发育依赖性基因表达 | 第41-43页 |
| (二) 免疫荧光实验检测心肌特异性蛋白表达 | 第43-44页 |
| (三) 心肌细胞的变时性效应检测 | 第44-45页 |
| 三、实验结果 | 第45-54页 |
| (一) ICA诱导ES细胞分化为心肌细胞过程中心肌发育依赖性基因表达 | 第45-50页 |
| (二) ICA诱导ES细胞分化为心肌细胞过程中心肌特异性蛋白表达 | 第50-52页 |
| (三) ICA诱导ES细胞分化成的心肌细胞变时性效应检测 | 第52-54页 |
| 四、讨论 | 第54-58页 |
| 五、小结 | 第58-59页 |
| 第三部分 ICA诱导ES细胞定向分化早期调节机制研究 | 第59-85页 |
| 一、仪器与试药 | 第60-62页 |
| 二、实验方法 | 第62-66页 |
| (一) 丫啶橙／溴化乙啶双染色法检测ICA诱导ES细胞凋亡形态学变化 | 第62页 |
| (二) 流式细胞术检测ICA对ES细胞细胞周期及凋亡的影响 | 第62-63页 |
| (三) RT-PCR方法检测p53基因表达 | 第63-64页 |
| (四) Western blot法检测p53蛋白和mdm2蛋白表达 | 第64-65页 |
| (五) Griess法测定ICA对ES细胞内源性释放NO含量影响 | 第65页 |
| (六) 放射性免疫法测定ICA对ES细胞内cAMP和cGMP含量变化 | 第65页 |
| (七) ICA作用ES细胞后培养液中GSNO浓度变化 | 第65-66页 |
| (八) 一氧化氮合酶抑制剂对ICA诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞影响 | 第66页 |
| 三、实验结果 | 第66-80页 |
| (一) ICA诱导ES细胞凋亡形态学变化 | 第66-67页 |
| (二) ICA对ES细胞细胞周期及凋亡影响 | 第67-68页 |
| (三) ICA促ES细胞分化时p53基因表达变化 | 第68-71页 |
| (四) ICA促ES细胞分化时p53和mdm2蛋白表达变化 | 第71-74页 |
| (五) ICA诱导ES细胞分化早期内源性NO含量变化 | 第74-75页 |
| (六) ICA诱导ES细胞分化早期对细胞内cAMP和cGMP含量影响 | 第75-77页 |
| (七) ICA诱导ES细胞分化早期培养液中GSNO浓度变化 | 第77-78页 |
| (八) ICA对ES细胞分化为心肌细胞过程中内源性NO含量影响及一氧化氮合酶抑制剂对ICA诱导ES细胞体外定向分化为心肌细胞影响 | 第78-80页 |
| 四、讨论 | 第80-85页 |
| 五、小结 | 第85页 |
| 本研究创新点 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 综述 胚胎干细胞体外定向分化成心肌细胞的研究进展 | 第94-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 作者简介 | 第109-110页 |
| 与本研究内容相关的文章发表和专利情况参考文献 | 第110-111页 |
| 附录 | 第111-134页 |
