| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 第一部分:文献综述 | 第13-39页 |
| 文献综述I:叶卷曲发生的分子机制 | 第14-27页 |
| 一、叶卷曲突变体 | 第14-17页 |
| 二、叶卷曲发生的可能机制 | 第17-21页 |
| (一) 基因控制 | 第17-20页 |
| (1) 细胞的分裂和生长的基因调控 | 第17-18页 |
| (2) 细胞分化导致极性产生的基因调控 | 第18-19页 |
| (3) AGAMOUS 基因的异位表达 | 第19-20页 |
| (二) 激素控制 | 第20页 |
| (三) 环境控制 | 第20-21页 |
| 三、结束语 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 文献综述II:microRNA 在植物侧生器官极性建立过程中的调控作用 | 第27-39页 |
| 一、植物侧生器官的极性建立 | 第27-29页 |
| 二、植物中miRNAs 的产生和成熟 | 第29-31页 |
| 三、miRNA 与植物器官的极性建立 | 第31-34页 |
| 四、结束语 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 第二部分:研究论文 | 第39-121页 |
| 第一章 HYL1 基因与拟南芥叶卷曲的发生 | 第40-77页 |
| 引言 | 第40-43页 |
| 一、 材料和方法 | 第43-62页 |
| (一) 质粒和菌株 | 第43页 |
| (二) 植物材料 | 第43页 |
| (三) 试剂和引物 | 第43-45页 |
| (四) 方法 | 第45-62页 |
| (1) 植物材料的种植 | 第45页 |
| (2) 叶相关系数的统计 | 第45-46页 |
| (3) 扫描电镜 | 第46页 |
| (4) 石蜡切片植物组织观察 | 第46-47页 |
| (5) 暗视野显微镜样品制备及观察 | 第47-48页 |
| (6) CTAB 法植物组织总DNA 的提取植物材料的种植 | 第48-49页 |
| (7) 质粒的提取 | 第49页 |
| (8) HYL1 基因启动子的分离及pHYL1::GUS 融合基因载体的构建 | 第49-50页 |
| (9) 热激法大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第50页 |
| (10) 冻融法农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第50-51页 |
| (11) 浸花法转化拟南芥及筛选 | 第51-52页 |
| (12) TPS 法小量提取植物组织DNA | 第52页 |
| (13) 组织化学染色法(GUS 活性检测) | 第52-53页 |
| (14) 植物组织总RNA 提取 | 第53页 |
| (15) 半定量RT-PCR | 第53-54页 |
| (16) microRNA northern 杂交 | 第54-56页 |
| (17) 原位杂交探针的构建 | 第56页 |
| (18) 原位杂交 | 第56-62页 |
| 二、 结果分析 | 第62-71页 |
| (一) hy11 突变体叶片相关表型的进一步观察和分析 | 第62-64页 |
| (二) hy11 突变体的叶脉简化 | 第64-65页 |
| (三) hy11 突变体叶片极性的部分改变 | 第65-67页 |
| (四) HYL1 基因与miRNA 和叶极性决定基因的相互关系 | 第67-70页 |
| (五) HYL1 基因启动子的表达特征 | 第70-71页 |
| 三、 讨论 | 第71-74页 |
| (一) hy11 的叶片在横向和纵向表现出不同的卷曲程度 | 第71页 |
| (二) HYL1 调控叶脉和叶极性的正常发育 | 第71-74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 第二章 HYL1 蛋白不同结构域的生物学功能 | 第77-100页 |
| 引言 | 第77-81页 |
| 一、 材料和方法 | 第81-85页 |
| (一) 质粒和菌株 | 第81页 |
| (二) 植物材料 | 第81页 |
| (三) 试剂和引物 | 第81-83页 |
| (四) 方法 | 第83-85页 |
| (1) 植物材料的种植 | 第83页 |
| (2) HYL1 基因缺失片断的扩增及双元载体的构建 | 第83页 |
| (3) 浸花法转化拟南芥及筛选 | 第83页 |
| (4) 半定量RT-PCR 鉴定外源基因的表达 | 第83-84页 |
| (5) 不同转基因拟南芥中miR165 和miR160 的Northern 杂交 | 第84页 |
| (6) 转基因植株叶卷表型的观察及对不同外源激素的反应分析 | 第84-85页 |
| 二、 结果分析 | 第85-93页 |
| (一) HYL1 基因缺失片断的构建及转基因植株的表型观察 | 第85-89页 |
| (二) HYL1 基因缺失片断转基因植株对不同激素的生理反应 | 第89-92页 |
| (三) HYL1 基因缺失片断转基因植株的miRNA 累积 | 第92-93页 |
| 三、 讨论 | 第93-95页 |
| (一) HYL1 蛋白在体内的生物学功能主要由其两个DSRM 结构域完成 | 第93页 |
| (二) HYL1 对叶平展的调控和对激素的反应是由miRNA 介导的 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-100页 |
| 第三章 大白菜中BcpLH 基因的生物学功能 | 第100-121页 |
| 引言 | 第100-102页 |
| 一、材料和方法 | 第102-107页 |
| (一) 质粒和菌株 | 第102页 |
| (二) 植物材料 | 第102页 |
| (三) 试剂和引物 | 第102-104页 |
| (四) 方法 | 第104-107页 |
| (1) 植物材料的种植 | 第104页 |
| (2) BcpLH 基因缺失片断的扩增及双元载体的构建 | 第104页 |
| (3) BcpLH-GFP 融合载体构建及亚细胞定位 | 第104页 |
| (4) 浸花法转化拟南芥及筛选 | 第104-105页 |
| (5) 真空抽滤法转化大白菜及筛选 | 第105页 |
| (6) 转基因植株叶卷曲表型的观察及对不同外源激素的反应分析 | 第105页 |
| (7) miR165 和miR160 的Northern 杂交 | 第105页 |
| (8) 半定量RT-PCR | 第105-106页 |
| (9) 实时定量PCR | 第106页 |
| (10) 组织切片 | 第106-107页 |
| 二、结果分析 | 第107-118页 |
| (一) 大白菜BcpLH 基因与拟南芥HYL1 基因的功能一致 | 第107-110页 |
| (二) BcpLH 基因定位在核中 | 第110页 |
| (三) 结球型大白菜不同时期叶片组织的切片观察 | 第110-112页 |
| (四) 结球型大白菜和散叶型大白菜结球期顶端组织的切片观察 | 第112-113页 |
| (五) BcpLH 基因不同时期的表达分析 | 第113-114页 |
| (六) 转基因大白菜的获得及分子鉴定 | 第114-116页 |
| (七) 正义和反义BcpLH 转基因大白菜的表型观察 | 第116-118页 |
| 三、讨论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-121页 |
| 论文发表情况 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
