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拟南芥质体和细胞核之间协调机制的初步分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一部分 文献综述第11-23页
 第一章 质体向细胞核的信号转导通路及其研究进展第12-19页
 第二章 研究质体和细胞核之间信息交流的好材料——植物叶片花斑及其产生机理第19-23页
第二部分 实验研究第23-64页
 第一章 报告株系法制作拟南芥核质失调突变体及其初步分析第23-51页
  前言第23-24页
  第一节 用Gfp报告基因制作gun突变体第24-33页
   1 引言第24页
   2 材料与方法第24-29页
    2.1 农杆菌介导法将Rbcs::Gfp转入拟南芥获得报告株系3R12第24-25页
     2.1.1 pCAMBIA1302—Rbcs::Gfp表达载体的构建第24页
     2.1.2 农杆菌介导的拟南芥转化第24-25页
     2.1.3 转化植株的筛选及鉴定第25页
    2.2 EMS突变体库中R3.7、R20.3和R20.1突变体的筛选第25-26页
     2.2.1 M0代突变体的制备第26页
     2.2.2 M2代突变体库的获得第26页
    2.3 gun突变体的Northern分析第26-28页
     2.3.1 Rbcs片段的探针制备第26-27页
     2.3.2 植株的RNA提取第27页
     2.3.3 Rbcs基因的Northern检测第27-28页
    2.4 等位性测验及测序分析第28-29页
   3 结果与讨论第29-32页
    3.1 报告株系3R12的获得第29页
    3.2 R3.7、R20.3和R20.1突变体的获得第29-31页
    3.3 gun突变体的Northern分析结果第31页
    3.4 等位性测验及测序分析结果第31-32页
   4 结论第32-33页
  第二节 gun双突变体的制作及分析第33-37页
   1 材料与方法第33-34页
    1.1 拟南芥植株的培养第33-34页
     1.1.1 培养方法第33页
     1.1.2 培养条件第33-34页
    1.2 gun突变体之间的杂交第34页
    1.3 gun双突变体的筛选与分析第34页
   2 结果第34-35页
   3 讨论第35-37页
  第三节 质体氧化还原状态对质体和细胞核间协调性的影响分析第37-45页
   1 引言第37-39页
   2 材料与方法第39-41页
    2.1 材料药品第39页
    2.2 方法第39-41页
     2.2.1 培养基及培养条件第39-40页
     2.2.2 药品处理第40页
     2.2.3 结果观察及数据统计第40-41页
   3 结果第41-43页
    3.1 细胞脱分化阶段处理对愈伤诱导及植株再生的影响第41页
    3.2 细胞分化阶段处理对植株再生的影响第41-43页
   4 讨论第43-45页
  第四节 质体因子MP的下游信号是什么?第45-50页
   1 引言第45页
   2 材料与方法第45-47页
    2.1 材料药品第45-46页
    2.2 方法第46-47页
     2.2.1 通过杂交方法制备Col—0(Cab::GUS)材料第46页
     2.2.2 候选药品对gun突变体的处理第46页
     2.2.3 GUS染色观察第46-47页
   3 结果第47-48页
   4 讨论第48-50页
  第五节 小结与展望第50-51页
 第二章 形态学方法筛选质体发育突变体及其初步分析第51-64页
  前言第51-52页
  第一节 叶色偏淡突变体的筛选与分析第52-57页
   1 材料与方法第52-53页
    1.1 EMS突变体库中筛选叶色偏淡(pale green,pag)突变体第52页
    1.2 pag突变体的等位性测验第52页
    1.3 检测pag是否为gun突变体第52页
    1.4 pag和gun突变体的叶绿素含量测定第52-53页
     1.4.1 叶绿体色素的提取第52-53页
     1.4.2 吸光度的测定及各色素含量的计算第53页
   2 结果与讨论第53-55页
    2.1 pag突变体的获得第53页
    2.2 等位性测验结果第53-54页
    2.3 pag突变体的“gun”检测第54页
    2.4 pag与gun突变体叶绿体色素测定结果及比较分析第54-55页
   3 结论第55-57页
  第二节 叶片绿黄相间花斑突变体的筛选与分析第57-60页
   1 材料与方法第57-58页
    1.1 EMS突变体库中筛选叶片绿黄相间花斑突变体Ad1-1第57页
    1.2 用SSLP分子标记对Ad1-1突变基因进行染色体粗略定位第57页
    1.3 针对怀疑基因测序并比对分析第57-58页
   2 结果与讨论第58-60页
    2.1 Ad1-1突变体的表型第58页
    2.2 突变基因的鉴定第58-60页
  第三节 叶片绿白相间花斑突变体的筛选与分析第60-63页
   1 材料与方法第60页
    1.1 花斑(variegation,var)突变体的筛选第60页
     1.1.1 EMS突变体库中筛选var-a突变体第60页
     1.1.2 T—DNA插入失活筛选var-b突变体第60页
    1.2 等位性测验第60页
   2 结果与讨论第60-63页
    2.1 花斑突变体的表型第60-62页
     2.1.1 var-a表型特征第60页
     2.1.2 var-b表型特征第60-62页
    2.2 等位性测验及测序结果分析第62-63页
     2.2.1 var-a突变体第62页
     2.2.2 var-b突变体第62-63页
  第四节 小结与展望第63-64页
参考文献第64-70页
致谢第70页

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