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新基因MR-1的功能研究

中文摘要第1-8页
English Abstract第8-12页
前言第12-17页
英文缩略语(Abbreviation)第17-19页
第一部分:新基因MR-1的克隆和生物信息学分析第19-33页
 一:材料与方法第19-25页
  1.材料部分第19-21页
  2.方法部分第21-25页
 二:实验结果与讨论第25-33页
  1.人源MR-1基因(hMR-1)的克隆及核酸序列分析第25-27页
  2.hMR-1蛋白结构域分析第27-29页
  3.小鼠源MR-1基因(mMR-1)cDNA的获得第29-30页
  4.大鼠源MR-1基因(rMR-1)cDNA的获得第30页
  5.不同种属MR-1基因的同源比较分析第30-33页
第二部分:hMR-1的表达谱分析第33-46页
 一:材料与方法第33-35页
  1.材料部分第33-34页
  2.方法部分第34-35页
 二:实验结果与讨论第35-46页
  1.hMR-1基因的Northern Blot分析第35-36页
  2.hMR-1基因的定量PCR和RT-PCR分析第36-39页
  3.SAGEmap分析hMR-1基因表达谱第39-43页
  4.hMR-1基因不同转录本分析第43-46页
第三部分:hMR-1蛋白的表达及多克隆抗体制备第46-64页
 一:材料与方法第46-53页
  1.材料部分第46-51页
  2.方法部分第51-53页
 二:实验结果与讨论第53-64页
  1.在大肠杆菌中初步探索hMR-1表达第53-54页
  2.在pET24系统中hMR-1表达规律第54-59页
  3.hMR-1表达蛋白的纯化第59-60页
  4.MR1多克隆抗体制备第60-61页
  5.hMR1抗体的Western检测第61-62页
  6.结果讨论第62-64页
第四部分:hMR-1蛋白功能分析第64-82页
 一:材料与方法第64-71页
  1.材料部分第64-68页
  2.方法部分第68-71页
 二:实验结果与讨论第71-82页
  1.酵母双杂交筛选获得MR1相互作用蛋白第71-75页
  2.蛋白体外结合实验验证酵母双杂交结果第75-76页
  3.MR-1与相互作用蛋白作用部位的分析第76-77页
  4.MR-1与MRIP-1不同部位相互作用的分析第77-80页
  5.结果讨论第80-82页
第五部分:MR-1在人肿瘤组织及细胞中的功能分析第82-93页
 一:材料与方法第82-87页
  1:材料部分第82-84页
  2:方法部分第84-87页
 二:实验结果与讨论第87-93页
  1.定量RT-PCR分析MR-1在肝癌组织中表达第87-88页
  2.肿瘤细胞MR-1高表达稳定细胞株的构建第88-90页
  3.Northern Bot鉴定MR1的表达第90-91页
  4.MR-1高表达稳定细胞系的细胞增殖第91页
  5.MR-1高表达与其它基因的关系第91-93页
第六部分:MR-1在大鼠心肌肥大动物模型中的表达第93-99页
 一:材料与方法第93-95页
  1.材料部分第93-94页
  2.方法部分第94-95页
 二:实验结果与讨论第95-99页
  1.腹主动脉结扎心肌肥大动物模型的建立第95-96页
  2.MR-1在大鼠心肌肥大模型中的表达第96-98页
  3.结果讨论第98-99页
第七部分:RNA干扰MR-1在心肌肥大细胞中的表达第99-108页
 一:材料与方法第99-101页
  1.材料部分第99-100页
  2.方法部分第100-101页
 二:实验结果与讨论第101-108页
  1.MR-1基因RNA干扰靶点设计及载体构建第101-103页
  2.筛选针对rMR-1的RNA干扰载体第103-104页
  3.RNA干扰MR-1对心肌原代细胞肥大的影响第104-107页
  4.结果讨论第107-108页
第八部分:MR-1转基因小鼠家系建立第108-117页
 一:材料与方法第108-110页
  1.材料部分第108-109页
  2.方法部分第109-110页
 二:实验结果与讨论第110-117页
  1.获得首建F1代hMR-1转基因小鼠第110-114页
  2.繁殖获得F2代hMR-1转基因小鼠第114页
  3.繁殖获得F3代hMR-1转基因小鼠第114-117页
结论第117-118页
参考文献第118-122页
论文综述第122-129页
致谢第129-130页
附录第130-150页
 (一).MR-1基因在199个SAGE库中转录水平第130-132页
 (二).与MR1具有相互作用AD质粒测序第132-140页
 (三).基因芯片检测结果第140-149页
 (四).博士在读期间申请专利及发表和在投学术论文第149-150页
 (五).参加会议和发表文摘第150页

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