第一章 复制型溶瘤病毒研究 | 第1-39页 |
·前言 | 第15页 |
·基因突变是肿瘤发生的基础 | 第15-18页 |
·肿瘤基因治疗 | 第18-19页 |
·复制型溶瘤病毒治疗 | 第19-37页 |
·理想的OV特征及来源 | 第20-21页 |
·OV杀灭肿瘤细胞的机制 | 第21-22页 |
·OV特异性增殖的机制 | 第22-29页 |
·OV的临床试验 | 第29-34页 |
·OV技术进展 | 第34-37页 |
·靶向基因-病毒治疗 | 第37页 |
·结论 | 第37-39页 |
第二章 TNF超家族及TRAIL研究 | 第39-67页 |
·TNF和TNFR超家族概述 | 第39-53页 |
·TNF及其受体TNFR | 第42-44页 |
·FasL及其受体Fas | 第44-47页 |
·TWEAK及其受体Fn14 | 第47页 |
·BLys及其受体 | 第47-48页 |
·LIGHT及其受体 | 第48页 |
·RANKL及受体 | 第48-49页 |
·人淋巴毒素 | 第49-50页 |
·TNF配体和受体超家族讨论总结 | 第50-53页 |
·TRAIL | 第53-59页 |
·TRAIL | 第53-55页 |
·TRAIL的受体 | 第55-57页 |
·TRAIL及其受体介导的信号转导通路 | 第57-59页 |
·常细胞逃避TRAIL杀伤作用的机制 | 第59-60页 |
·诱骗受体的保护作用 | 第59页 |
·FLIP的抑制作用 | 第59-60页 |
·IAP的作用 | 第60页 |
·IL-1的作用 | 第60页 |
·TRAIL的旁观者效应 | 第60-61页 |
·有关TRAIL的毒性问题 | 第61-63页 |
·TRAIL在肿瘤治疗中的研究现状 | 第63-66页 |
·TRAIL蛋白直接用于肿瘤治疗 | 第63-64页 |
·TRAIL蛋白的联合治疗 | 第64-66页 |
·结语 | 第66-67页 |
第三章 靶向基因-病毒与5-FU联合的抗恶性结肠癌效应※ | 第67-101页 |
·前言 | 第68-70页 |
·实验材料与方法 | 第70-88页 |
·菌株、细胞及试剂 | 第70-71页 |
·质粒 | 第71-74页 |
·病毒和实验动物 | 第74页 |
·质粒DNA的制备 | 第74-76页 |
·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第76-77页 |
·酶切与连接 | 第77页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第77-79页 |
·同源重组法构建腺病毒 | 第79页 |
·病毒的空斑纯化、大量制备与滴度测定: | 第79-81页 |
·抽提病毒DNA(QIAamp DNA Blood Mini Kit) | 第81页 |
·斑点杂交(Dot blotting) | 第81-82页 |
·RT-PCR | 第82-83页 |
·Western blot | 第83-84页 |
·细胞存活率和CPE(细胞病变效应)实验 | 第84-85页 |
·流式细胞术检测亚二倍体峰 | 第85页 |
·动物实验 | 第85-86页 |
·血清学测定 | 第86页 |
·免疫组化检测 | 第86页 |
·透射电镜观察 | 第86-88页 |
·研究结果 | 第88-99页 |
·ZD55-hTRAIL的构建和鉴定 | 第88页 |
·肿瘤细胞对ZD55-hTRAIL和ONYX015敏感性比较 | 第88-91页 |
·ZD55-hTRAIL与5-FU的协同/增强作用 | 第91-93页 |
·ZD55-hTRAIL单用或联合5-FU对荷瘤小鼠的肿瘤生长抑制 | 第93-95页 |
·ZD55-hTRAIL与5-FU联合治疗抑制肿瘤生长的证据 | 第95-99页 |
·讨论 | 第99-101页 |
第四章 携带hTRAIL和k5的溶瘤腺病毒对肿瘤的双基因治疗 | 第101-121页 |
·前言 | 第102-104页 |
·实验材料与方法 | 第104-107页 |
·菌株、质粒、细胞和试剂 | 第104页 |
·病毒 | 第104页 |
·病毒感染、制备、纯化及滴定 | 第104页 |
·流式细胞术检测 | 第104-105页 |
·细胞增殖实验 | 第105页 |
·病毒报告基因分析 | 第105页 |
·细胞存活率和CPE(细胞病变效应)实验 | 第105页 |
·动物试验 | 第105-106页 |
·RT-PCR分析 | 第106页 |
·TUNEL检测DNA片段化 | 第106-107页 |
·TRAIL免疫组化检测 | 第107页 |
·统计学分析 | 第107页 |
·研究结果 | 第107-118页 |
·ZD55-hTRAIL对肿瘤细胞的特异性极其抗肿瘤效应 | 第107-109页 |
·ZD55-hTRAIL在动物水平上的抗肿瘤效应 | 第109-112页 |
·靶向双基因-病毒治疗肿瘤的效果 | 第112-115页 |
·ZD55-hTRAIL和Ad-k5的靶向双基因-病毒治疗肿瘤的机制 | 第115-118页 |
·讨论 | 第118-121页 |
第五章 分泌型TRAIL选择性杀伤肿瘤细胞的初步实验 | 第121-135页 |
·前言 | 第122-123页 |
·材料与方法 | 第123-128页 |
·菌种、细胞株及质粒 | 第123页 |
·酶类及主要试剂 | 第123页 |
·TRAIL受体的RT-PCR | 第123-124页 |
·重组真核表达载体构建 | 第124-125页 |
·重组真核表达载体转染COS7细胞 | 第125页 |
·肿瘤细胞MTT的检测 | 第125页 |
·ELISA(双抗体夹心法)检测 | 第125-127页 |
·统计学处理 | 第127-128页 |
·研究结果 | 第128-133页 |
·结直肠肿瘤细胞中TRAIL受体的转录 | 第128-130页 |
·携带TRAIL的分泌型重组真核表达载体的构建 | 第130-131页 |
·TRAIL在COS7.0细胞中的表达 | 第131-132页 |
·分泌型真核表达载体表达的TRAIL的抗肿瘤效应 | 第132-133页 |
·讨论 | 第133-135页 |
参考文献 | 第135-161页 |
研究总结 | 第161-162页 |
博士研究生期间发表和待发表的文章 | 第162-163页 |
致谢 | 第163-164页 |