| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 序 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 1 引言 | 第13-19页 |
| ·突触囊泡的再循环过程 | 第13-14页 |
| ·Dynamin分子的主要功能 | 第14-15页 |
| ·Dynamin家族分子的结构 | 第15页 |
| ·阿尔茨海默病与突触囊泡功能障碍 | 第15-16页 |
| ·阿尔茨海默病的发病机制 | 第15-16页 |
| ·阿尔茨海默病与突触囊泡循环障碍 | 第16页 |
| ·Dynamin家族分子与阿尔茨海默病 | 第16-17页 |
| ·Dynamin1与阿尔茨海默病的关系 | 第16-17页 |
| ·Dynamin2是阿尔茨海默病易感性候选基因 | 第17页 |
| ·Dynamin1在阿尔茨海默病中的药效学评价作用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料 | 第19-20页 |
| ·试剂和耗材 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19-20页 |
| 3 方法 | 第20-31页 |
| ·3×Tg AD模型小鼠基因型的鉴定 | 第20-21页 |
| ·小鼠全血基因组DNA的提取 | 第20页 |
| ·PCR鉴定3×Tg AD模型小鼠的APP基因 | 第20-21页 |
| ·PCR联合限制性内切酶酶切鉴定3×Tg AD模型小鼠的Psen #1基因 | 第21页 |
| ·小鼠脑组织总蛋白的提取 | 第21-23页 |
| ·小鼠脑组织取材和预处理 | 第21-22页 |
| ·SDS法提取脑组织总蛋白 | 第22页 |
| ·Laemmli buffer法处理脑组织总蛋白 | 第22页 |
| ·RIPA法提取脑组织总蛋白 | 第22页 |
| ·Triton X-100法提取脑组织总蛋白 | 第22-23页 |
| ·超速离心法提取脑组织蛋白 | 第23页 |
| ·Western blot分析 | 第23-24页 |
| ·Western blot | 第23-24页 |
| ·Western blot结果分析 | 第24页 |
| ·实时定量PCR | 第24-26页 |
| ·实时定量PCR引物的设计 | 第24页 |
| ·样本的收集与RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·cDNA的第一链合成 | 第25-26页 |
| ·实时定量PCR | 第26页 |
| ·数据分析 | 第26页 |
| ·亚硫酸氢盐测序PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP) | 第26-28页 |
| ·启动子区CpG岛的预测和BSP引物的设计 | 第26-27页 |
| ·小鼠脑组织基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·基因组DNA的亚硫酸盐修饰 | 第27-28页 |
| ·甲基化DNA的测序PCR | 第28页 |
| ·多抗血清被动免疫治疗3×Tg AD模型小鼠 | 第28-30页 |
| ·小鼠抗Aβ血清的制备 | 第28页 |
| ·小鼠血清抗Aβ抗体滴度的测定 | 第28-29页 |
| ·被动免疫治疗3×Tg AD模型小鼠 | 第29页 |
| ·被动免疫治疗3×Tg AD模型小鼠体内药物代谢动力学观察 | 第29-30页 |
| ·Dot blot | 第30页 |
| ·PDAPP转基因小鼠的主动免疫治疗 | 第30-31页 |
| 4 结果 | 第31-53页 |
| ·3×Tg AD模型小鼠的基因型鉴定 | 第31-33页 |
| ·3×Tg AD模型小鼠全血基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·3×Tg AD模型小鼠的APP基因鉴定 | 第31-32页 |
| ·3×Tg AD模型小鼠的Psen1基因的鉴定 | 第32-33页 |
| ·不同方法提取脑组织总蛋白的比较 | 第33-36页 |
| ·SDS法提取脑组织蛋白 | 第33-34页 |
| ·Laemmli buffer法处理脑组织蛋白 | 第34页 |
| ·RIPA法提取脑组织蛋白 | 第34-35页 |
| ·1% Triton X-100提取脑组织蛋白 | 第35页 |
| ·0.25M蔗糖超速离心法提取脑组织蛋白 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·实时定量PCR检测小鼠不同发育阶段脑组织中dynamin家族mRNA水平的表达 | 第36-39页 |
| ·实时定量PCR检测3周和3月龄小鼠脑内dynamin家族分子mRNA水平的表达 | 第36-37页 |
| ·实时定量PCR检测6月龄和8月小鼠脑内dynamin家族分子mRNA水平的表达 | 第37-38页 |
| ·BSP法检测小鼠dynamin1基因启动子区的甲基化状态 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39页 |
| ·Dynamin家族在3×Tg AD小鼠不同发育阶段的脑组织中蛋白表达检测 | 第39-44页 |
| ·3周龄小鼠脑组织dynamin家族蛋白的表达检测 | 第40页 |
| ·3月龄小鼠脑组织dynamin家族蛋白的表达检测 | 第40-41页 |
| ·6月龄小鼠脑组织dynamin家族蛋白的表达检测 | 第41-42页 |
| ·8月龄小鼠脑组织dynamin家族蛋白的表达检测 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| ·Dynamin家族在免疫治疗的AD转基因小鼠脑组织中的表达水平分析 | 第44-49页 |
| ·被动免疫治疗3×Tg AD模型小鼠脑组织dynamin的表达检测 | 第44-46页 |
| ·被动免疫治疗前后3×Tg AD模型小鼠脑组织寡聚体Ap含量的分析 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47页 |
| ·主动免疫治疗的PADPP转基因小鼠脑组织dynamin家族的表达检测 | 第47-49页 |
| ·PDAPP小鼠主动免疫治疗的效果评价 | 第49-53页 |
| ·主动免疫治疗PDAPP小鼠后的行为学评价 | 第49-50页 |
| ·主动免疫治疗PDAPP小鼠的脑组织淀粉样斑块分析 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-56页 |
| ·不同方法提取脑组织蛋白对分析dynamin1表达差异的影响 | 第53页 |
| ·Dynamin1在3×Tg AD模型小鼠脑内发生表达水平的下降 | 第53-54页 |
| ·Dynamin家族各分子在转录水平的改变和潜在的代偿机制 | 第54-55页 |
| ·AD的免疫治疗与dynamin1表达水平的改变 | 第55-56页 |
| 6 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 附录A | 第59-60页 |
| 附录B | 第60-61页 |
| 引物序列 | 第60-61页 |
| 附录C | 第61-64页 |
| Dynamin1 实时定量引物的溶解曲线分析结果 | 第61页 |
| Dynamin2 实时定量引物的溶解曲线分析结果 | 第61-62页 |
| Dynamin3 实时定量引物的溶解曲线分析结果 | 第62页 |
| β-Tubulin实时定量引物的溶解曲线分析结果 | 第62-63页 |
| 实时定量PCR引物的扩增效率曲线 | 第63页 |
| Dynamin1启动子区CpG岛的预测结果 | 第63-64页 |
| 作者简历 | 第64-66页 |
| 学位论文数据集 | 第66页 |
