小麦条锈菌毒性基因的RAPD标记及其ITS区序列分析研究
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 小麦条锈病研究进展 | 第12-13页 |
| ·小麦条锈病的为害与分布 | 第12页 |
| ·小麦条锈菌研究 | 第12-13页 |
| 2 小麦条锈菌的遗传多样性研究 | 第13-15页 |
| ·利用生化方法研究小麦条锈菌的遗传多样性 | 第13-14页 |
| ·利用分子生物学方法研究小麦条锈菌遗传多样性 | 第14-15页 |
| 3 遗传多样性研究方法进展 | 第15-21页 |
| ·形态标记 | 第15页 |
| ·细胞学标记 | 第15页 |
| ·生化(同工酶)标记 | 第15-16页 |
| ·DNA分子标记 | 第16-21页 |
| 4 RAPD标记在植物真菌病害研究中的应用 | 第21-25页 |
| ·在植物病原真菌的系统分类研究中的应用 | 第21-22页 |
| ·在植物病原真菌的群体遗传研究中的应用 | 第22-23页 |
| ·在植物病原真菌的毒性变异机制研究中应用 | 第23页 |
| ·在植物抗病性遗传育种中的应用 | 第23-25页 |
| 第二章 小麦条锈菌特异性DNA扩增片段的筛选 | 第25-33页 |
| 1 研究的目的意义 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·供试菌种的繁殖与鉴定 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·仪器设备 | 第27-28页 |
| ·研究方法 | 第28-33页 |
| ·小麦条锈菌基因组DNA(gDNA)的提取 | 第28页 |
| ·小麦锈菌DNA样品浓度与纯度的测定 | 第28页 |
| ·小麦条锈菌PCR扩增产物电泳 | 第28页 |
| ·小麦条锈菌RAPD分析体系的优化 | 第28-29页 |
| ·与小麦条锈菌毒性基因连锁的RAPD标记的筛选 | 第29页 |
| ·目的条带的回收、纯化 | 第29-30页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第30-32页 |
| ·CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第30页 |
| ·目的片段的连接反应 | 第30-31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第31页 |
| ·重组体的鉴定 | 第31-32页 |
| ·特异片段的测序 | 第32-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-40页 |
| 1 小麦锈菌DNA完整性验证结果 | 第33页 |
| 2 小麦条锈菌RAPD分析体系的建立 | 第33-35页 |
| ·模板DNA浓度对RAPD的影响 | 第33-34页 |
| ·Mg2+浓度对RAPD的影响 | 第34-35页 |
| ·dNTPs浓度对RAPD的影响 | 第35页 |
| ·引物浓度对RAPD的影响 | 第35页 |
| ·Taq酶量对RAPD的影响 | 第35页 |
| 3 目的片段的获得 | 第35-36页 |
| 4 目的片段的回收 | 第36页 |
| 5 克隆的获得与鉴定 | 第36-38页 |
| ·阳性克隆的挑选 | 第36-37页 |
| ·酶切鉴定 | 第37页 |
| ·PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 6 特异RAPD目的片段的序列测定及分析 | 第38-40页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第40-43页 |
| 1 结论 | 第40-41页 |
| 2 讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 小麦条锈菌的ITS区序列分析 | 第43-56页 |
| 1 ITS标记及其在植物病原菌分子检测中的应用 | 第43-44页 |
| 2 研究的目的意义 | 第44页 |
| 3 材料与方法 | 第44-45页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·供试菌种 | 第44页 |
| ·基因组DNA(gDNA)的提取 | 第44-45页 |
| ·PCR扩增及产物检测 | 第45页 |
| ·目的条带的回收、纯化 | 第45页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第45页 |
| ·DNA序列的测定 | 第45页 |
| ·特异引物设计 | 第45页 |
| ·特异性引物的PCR扩增及电泳检测 | 第45页 |
| 4 结果与分析 | 第45-54页 |
| ·PCR反应体系、扩增条件的建立 | 第45-46页 |
| ·ITS区PCR扩增结果 | 第46页 |
| ·目的片段的回收 | 第46-47页 |
| ·克隆的获得与鉴定 | 第47-54页 |
| ·阳性克隆的挑选 | 第47页 |
| ·酶切鉴定 | 第47页 |
| ·PCR鉴定 | 第47页 |
| ·DNA ITS区序列分析 | 第47-48页 |
| ·特异引物的设计 | 第48-54页 |
| ·特异引物验证及检测结果 | 第54页 |
| 5 结论与讨论 | 第54-56页 |
| 致 谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附 图 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
