中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第8-16页 |
1 酵母双杂交系统 | 第8-12页 |
·酵母双杂交系统的基本原理 | 第8-11页 |
·酵母双杂交系统特点与优点 | 第11页 |
·酵母双杂交系统局限性和改进 | 第11-12页 |
·酵母双杂交系统的发展 | 第12页 |
2 酵母双杂交系统在植物病毒学上的应用 | 第12-16页 |
·病毒粒体分子结构和装配研究中的应用 | 第12-13页 |
·病毒核酸复制以及基因表达调控研究中的应用 | 第13-14页 |
·病毒介体传播的分子机制研究中的应用 | 第14-15页 |
·病毒运动模式中的应用 | 第15页 |
·病毒致病机制研究中的应用 | 第15页 |
·病毒编码蛋白联系图谱研究中的应用 | 第15-16页 |
第二章 酵母表达载体的构建 | 第16-26页 |
1 材料 | 第16页 |
2 方法 | 第16-23页 |
·BYDV-GPV-CP,MP基因的克隆 | 第16-23页 |
·BYDV-GPV-CP,MP基因PCR扩增 | 第17-18页 |
·制备外源基因 | 第18-19页 |
·制备载体 | 第19-20页 |
·连接、转化、提取质粒DNA | 第20-23页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第23页 |
·序列测定及分析 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-24页 |
·BYDV-GPV-CP,MP基因PCR扩增 | 第23页 |
·BYDV-GPV-CP,MP基因的克隆和重组质粒鉴定 | 第23-24页 |
·序列测定及分析 | 第24页 |
4 小结与讨论 | 第24-26页 |
第三章 酵母双杂交筛选 | 第26-40页 |
1 材料 | 第26页 |
2 方法 | 第26-34页 |
·酵母菌株表现型的确认 | 第26-28页 |
·酵母共转化筛选 | 第28-30页 |
·酵母感受态细胞的制备 | 第28页 |
·酵母共转化阳性对照 | 第28-29页 |
·共转化筛选互作的寄主因子 | 第29-30页 |
·酵母匹配筛选 | 第30-31页 |
·制备酵母菌Y187感受态细胞 | 第30页 |
·pGBKT7-GPV-CP,MP转化Y187感受态细胞 | 第30页 |
·酵母匹配 | 第30-31页 |
·半乳糖苷酶发色检测 | 第31-32页 |
·提取质粒DNA、电转化 | 第32-33页 |
·制备电转化大肠杆菌感受态细胞 | 第32页 |
·从酵母中提取质粒DNA | 第32-33页 |
·电转化 | 第33页 |
·从大肠杆菌中提取质粒DNA,双酶切鉴定 | 第33页 |
·小麦cDNA文库检测 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-38页 |
·酵母菌株表现型的确认 | 第34页 |
·酵母共转化筛选 | 第34-35页 |
·酵母共转化阳性对照 | 第34页 |
·共转化筛选互作的寄主因子 | 第34-35页 |
·酵母匹配筛选 | 第35页 |
·小麦cDNA文库检测 | 第35-38页 |
4 小结与讨论 | 第38-40页 |
第四章 结论 | 第40-41页 |
附录 | 第41-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50页 |