中文摘要 | 第1-8页 |
前言 | 第8页 |
第一部分 文献综述 | 第8-16页 |
1 莪术的自然属性及研究进展 | 第8-11页 |
1.1 莪术的分类、形态结构及分布状况 | 第8页 |
1.2 莪术的传统药效、药理研究及在现代医学中的应用 | 第8-10页 |
1.2.1 莪术调节机体免疫反应. | 第9页 |
1.2.2 莪术直接抑制和破坏癌细胞作用 | 第9页 |
1.2.3 莪术拮抗致癌反应. | 第9页 |
1.2.4 莪术遗传毒性. | 第9-10页 |
1.2.5 莪术临床应用 | 第10页 |
1.3 莪术有效成分的研究进展 | 第10-11页 |
1.3.1 挥发油类 | 第10-11页 |
1.3.2 微量元素. | 第11页 |
1.3.3 多糖类 | 第11页 |
2 中药活性多糖的研究进展 | 第11-13页 |
2.1 中药多糖的免疫调节作用 | 第11-12页 |
2.1.1 对免疫细胞的调节 | 第11页 |
2.1.2 对补体细胞的调节 | 第11页 |
2.1.3 对细胞因子的调节. | 第11-12页 |
2.2 中药多糖的抗肿瘤作用 | 第12页 |
2.2.1 对细胞膜组分的影响 | 第12页 |
2.2.2 对磷脂酰肌醇(PI)转换的影响 | 第12页 |
2.2.3 对抗癌基因的影响 | 第12页 |
2.3 中药多糖的抗氧化作用 | 第12-13页 |
2.4 中药多糖的抗突变功能 | 第13页 |
2.5 中药多糖的抗溃疡作用 | 第13页 |
2.6 中药多糖调节心脏功能的作用 | 第13页 |
2.7 中药多糖的其他作用 | 第13页 |
3 中药植物细胞培养的研究进展 | 第13-16页 |
3.1 中药植物细胞培养生产次生代谢产物的研究进展 | 第14-15页 |
3.2 中药植物细胞培养的展望 | 第15-16页 |
第二部分 高产莪术细胞悬浮系的建立及其合成挥发油的调控. | 第16-28页 |
1 材料与方法 | 第16-17页 |
1.1 材料与培养条件 | 第16-17页 |
1.1.1 愈伤组织的诱导 | 第16页 |
1.1.2 悬浮培养条件 | 第16页 |
1.1.3 高产细胞系的建立 | 第16-17页 |
1.2 前体物质的添加 | 第17页 |
1.3 仪器、试剂与分析方法 | 第17页 |
2 结果与分析 | 第17-27页 |
2.1 莪术愈伤组织诱导的结果 | 第17-19页 |
2.1.1 外植体对莪术愈伤组织诱导的影响 | 第17-18页 |
2.1.2 激素配比对莪术愈伤组织诱导的影响 | 第18-19页 |
2.1.3 光照对莪术愈伤组织诱导的影响 | 第19页 |
2.1.4 温度对莪术愈伤组织诱导的影响 | 第19页 |
2.2 高产莪术细胞悬浮系的形态特征 | 第19页 |
2.3 莪术悬浮细胞生长及挥发油合成的曲线 | 第19-20页 |
2.4 碳源对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第20-21页 |
2.5 氮源对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第21页 |
2.6 激素对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第21-22页 |
2.7 光照条件对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第22页 |
2.8 培养基pH值对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第22-23页 |
2.9 接种量对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第23页 |
2.10 摇床转速对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第23-24页 |
2.11 温度对莪术细胞生长和挥发油含量的影响 | 第24页 |
2.12 前体及能量物质的添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响 | 第24-26页 |
2.12.1 不同前体的添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响 | 第24页 |
2.12.2 不同培养时期添加前体对莪术细胞生长和挥发油合成的影响 | 第24-25页 |
2.12.3 不同浓度的前体添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响 | 第25-26页 |
2.13 能量物质添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-28页 |
3.1 影响建立莪术高产细胞悬浮系的因素 | 第27页 |
3.2 莪术挥发油合成调控机理的探讨 | 第27-28页 |
第三部分 莪术悬浮细胞系合成多糖的调控研究 | 第28-35页 |
1 材料与方法 | 第28页 |
1.1 材料与试剂 | 第28页 |
1.2 方法 | 第28页 |
1.2.1 细胞悬浮培养 | 第28页 |
1.2.2 细胞生长量测定 | 第28页 |
1.2.3 多糖的提取、测定 | 第28页 |
1.2.4 多糖含量测定 | 第28页 |
1.2.4.1 标准曲线的制作 | 第28页 |
1.2.4.2 多糖含量测定方法 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-34页 |
2.1 培养基成分对莪细胞生长量和多糖含量的影响 | 第28-29页 |
2.2 碳源对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第29-30页 |
2.3 氮源对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第30-31页 |
2.4 激素对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第31-32页 |
2.5 接种量对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第32页 |
2.6 继代周期对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第32-33页 |
2.7 pH值对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第33-34页 |
2.8 摇床转速对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第34页 |
2.9 光照培养对细胞生长量和多糖含量的影响 | 第34页 |
3 讨论 | 第34-35页 |
第四部分 莪术多糖的分离提取及其生物学活性研究 | 第35-49页 |
1 材料与方法 | 第35-38页 |
1.1 实验材料 | 第35页 |
1.2 试剂 | 第35页 |
1.3 多糖的提取及含量的测定 | 第35页 |
1.4 莪术多糖的分离提取、纯化 | 第35-36页 |
1.4.1 莪术多糖的醇析 | 第35-36页 |
1.4.2 多糖除色素 | 第36页 |
1.4.3 多糖除蛋白 | 第36页 |
1.4.4 多糖的DEAE-52柱层析 | 第36页 |
1.4.5 纯度检测 | 第36页 |
1.4.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
1.4.5.2 纸层析. | 第36页 |
1.4.6 蛋白质含量的检测 | 第36页 |
1.5 莪术多糖体内抗肿瘤实验. | 第36-37页 |
1.5.1 实验动物及瘤株 | 第36页 |
1.5.2 小鼠H22肝癌腹水瘤细胞接种. | 第36-37页 |
1.5.3 莪术多糖的给药方式及分组 | 第37页 |
1.5.4 抑瘤率和体重变化率的计算 | 第37页 |
1.6 莪术多糖体内免疫功能实验 | 第37页 |
1.6.1 材料 | 第37页 |
1.6.2 方法 | 第37页 |
1.6.2.1 血液中淋巴细胞的分离及其转化率的计算 | 第37页 |
1.6.2.2 脾指数的测定 | 第37页 |
1.7 莪术多糖体内抗氧化实验 | 第37-38页 |
1.7.1 材料 | 第37页 |
1.7.2 邻苯三酚(PR)法测定血液中SOD活性 | 第37-38页 |
1.7.2.1 试剂 | 第37页 |
1.7.2.2 实验步骤 | 第37-38页 |
1.8 莪术多糖体外抗氧化实验 | 第38页 |
1.8.1 材料 | 第38页 |
1.8.2 Fenton法测定莪术多糖抗羟自由基活性. | 第38页 |
1.8.2.1 羟自由基的产生——Fenton反应 | 第38页 |
1.8.2.2 羟自由基的测定 | 第38页 |
1.8.2.3 羟自由基清除率的计算 | 第38页 |
1.9 从莪术中同时提取多糖和挥发油的最佳条件的确立 | 第38页 |
1.10 数理统计分析 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-47页 |
2.1 莪术多糖提取条件确立的实验结果 | 第38-39页 |
2.2 莪术多糖性质的检测 | 第39页 |
2.3 莪术多糖的分离提取、纯化的实验结果 | 第39-42页 |
2.3.1 莪术多糖的醇析结果 | 第39页 |
2.3.2 除色素方法的比较结果 | 第39-40页 |
2.3.3 Savage法除蛋白的实验结果 | 第40页 |
2.3.4 莪术多糖的DEAE-52柱层析的实验结果 | 第40-41页 |
2.3.5 莪术多糖的琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第41页 |
2.3.6 莪术不同器官多糖含量的测定结果 | 第41页 |
2.3.7 纸层析检测结果 | 第41-42页 |
2.4 莪术多糖体内抗肿瘤实验 | 第42-43页 |
2.4.1 莪术多糖的注射给药及口服给药对小鼠H22肝癌腹水瘤的抑制作用 | 第42-43页 |
2.5 莪术多糖体内免疫功能实验 | 第43-44页 |
2.5.1 莪术多糖对H22荷瘤小鼠脾指数和淋巴细胞转化的影响 | 第43-44页 |
2.6 莪术多糖体内抗氧化实验 | 第44页 |
2.6.1 莪术多糖对H22荷瘤小鼠血液SOD活性的影响 | 第44页 |
2.7 莪术多糖体外抗氧化实验 | 第44-46页 |
2.7.1 不同材料相同醇析级份的多糖抗羟自由基的能力比较 | 第44-45页 |
2.7.2 莪术多糖浓度对清除羟自由基的影响 | 第45-46页 |
2.8 从莪术中同时提取多糖和挥发油的最佳条件确立的实验结果 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
3.1 莪术多糖的提取、纯化工艺的研究 | 第47页 |
3.2 莪术多糖与莪术次生代谢物——挥发油的关系 | 第47页 |
3.3 莪术多糖生物学活性机理的探讨 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
英文摘要 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
致谢 | 第55页 |