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莪术细胞悬浮培养,挥发油、多糖分离及其多糖生物学活性研究

中文摘要第1-8页
前言第8页
第一部分 文献综述第8-16页
 1 莪术的自然属性及研究进展第8-11页
  1.1 莪术的分类、形态结构及分布状况第8页
  1.2 莪术的传统药效、药理研究及在现代医学中的应用第8-10页
   1.2.1 莪术调节机体免疫反应.第9页
   1.2.2 莪术直接抑制和破坏癌细胞作用第9页
   1.2.3 莪术拮抗致癌反应.第9页
   1.2.4 莪术遗传毒性.第9-10页
   1.2.5 莪术临床应用第10页
  1.3 莪术有效成分的研究进展第10-11页
   1.3.1 挥发油类第10-11页
   1.3.2 微量元素.第11页
   1.3.3 多糖类第11页
 2 中药活性多糖的研究进展第11-13页
  2.1 中药多糖的免疫调节作用第11-12页
   2.1.1 对免疫细胞的调节第11页
   2.1.2 对补体细胞的调节第11页
   2.1.3 对细胞因子的调节.第11-12页
  2.2 中药多糖的抗肿瘤作用第12页
   2.2.1 对细胞膜组分的影响第12页
   2.2.2 对磷脂酰肌醇(PI)转换的影响第12页
   2.2.3 对抗癌基因的影响第12页
  2.3 中药多糖的抗氧化作用第12-13页
  2.4 中药多糖的抗突变功能第13页
  2.5 中药多糖的抗溃疡作用第13页
  2.6 中药多糖调节心脏功能的作用第13页
  2.7 中药多糖的其他作用第13页
 3 中药植物细胞培养的研究进展第13-16页
  3.1 中药植物细胞培养生产次生代谢产物的研究进展第14-15页
  3.2 中药植物细胞培养的展望第15-16页
第二部分 高产莪术细胞悬浮系的建立及其合成挥发油的调控.第16-28页
 1 材料与方法第16-17页
  1.1 材料与培养条件第16-17页
   1.1.1 愈伤组织的诱导第16页
   1.1.2 悬浮培养条件第16页
   1.1.3 高产细胞系的建立第16-17页
  1.2 前体物质的添加第17页
  1.3 仪器、试剂与分析方法第17页
 2 结果与分析第17-27页
  2.1 莪术愈伤组织诱导的结果第17-19页
   2.1.1 外植体对莪术愈伤组织诱导的影响第17-18页
   2.1.2 激素配比对莪术愈伤组织诱导的影响第18-19页
   2.1.3 光照对莪术愈伤组织诱导的影响第19页
   2.1.4 温度对莪术愈伤组织诱导的影响第19页
  2.2 高产莪术细胞悬浮系的形态特征第19页
  2.3 莪术悬浮细胞生长及挥发油合成的曲线第19-20页
  2.4 碳源对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第20-21页
  2.5 氮源对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第21页
  2.6 激素对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第21-22页
  2.7 光照条件对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第22页
  2.8 培养基pH值对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第22-23页
  2.9 接种量对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第23页
  2.10 摇床转速对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第23-24页
  2.11 温度对莪术细胞生长和挥发油含量的影响第24页
  2.12 前体及能量物质的添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响第24-26页
   2.12.1 不同前体的添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响第24页
   2.12.2 不同培养时期添加前体对莪术细胞生长和挥发油合成的影响第24-25页
   2.12.3 不同浓度的前体添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响第25-26页
  2.13 能量物质添加对莪术细胞生长和挥发油合成的影响第26-27页
 3 讨论第27-28页
  3.1 影响建立莪术高产细胞悬浮系的因素第27页
  3.2 莪术挥发油合成调控机理的探讨第27-28页
第三部分 莪术悬浮细胞系合成多糖的调控研究第28-35页
 1 材料与方法第28页
  1.1 材料与试剂第28页
  1.2 方法第28页
   1.2.1 细胞悬浮培养第28页
   1.2.2 细胞生长量测定第28页
   1.2.3 多糖的提取、测定第28页
   1.2.4 多糖含量测定第28页
    1.2.4.1 标准曲线的制作第28页
    1.2.4.2 多糖含量测定方法第28页
 2 结果与分析第28-34页
  2.1 培养基成分对莪细胞生长量和多糖含量的影响第28-29页
  2.2 碳源对细胞生长量和多糖含量的影响第29-30页
  2.3 氮源对细胞生长量和多糖含量的影响第30-31页
  2.4 激素对细胞生长量和多糖含量的影响第31-32页
  2.5 接种量对细胞生长量和多糖含量的影响第32页
  2.6 继代周期对细胞生长量和多糖含量的影响第32-33页
  2.7 pH值对细胞生长量和多糖含量的影响第33-34页
  2.8 摇床转速对细胞生长量和多糖含量的影响第34页
  2.9 光照培养对细胞生长量和多糖含量的影响第34页
 3 讨论第34-35页
第四部分 莪术多糖的分离提取及其生物学活性研究第35-49页
 1 材料与方法第35-38页
  1.1 实验材料第35页
  1.2 试剂第35页
  1.3 多糖的提取及含量的测定第35页
  1.4 莪术多糖的分离提取、纯化第35-36页
   1.4.1 莪术多糖的醇析第35-36页
   1.4.2 多糖除色素第36页
   1.4.3 多糖除蛋白第36页
   1.4.4 多糖的DEAE-52柱层析第36页
   1.4.5 纯度检测第36页
    1.4.5.1 琼脂糖凝胶电泳第36页
    1.4.5.2 纸层析.第36页
   1.4.6 蛋白质含量的检测第36页
  1.5 莪术多糖体内抗肿瘤实验.第36-37页
   1.5.1 实验动物及瘤株第36页
   1.5.2 小鼠H22肝癌腹水瘤细胞接种.第36-37页
   1.5.3 莪术多糖的给药方式及分组第37页
   1.5.4 抑瘤率和体重变化率的计算第37页
  1.6 莪术多糖体内免疫功能实验第37页
   1.6.1 材料第37页
   1.6.2 方法第37页
    1.6.2.1 血液中淋巴细胞的分离及其转化率的计算第37页
    1.6.2.2 脾指数的测定第37页
  1.7 莪术多糖体内抗氧化实验第37-38页
   1.7.1 材料第37页
   1.7.2 邻苯三酚(PR)法测定血液中SOD活性第37-38页
    1.7.2.1 试剂第37页
    1.7.2.2 实验步骤第37-38页
  1.8 莪术多糖体外抗氧化实验第38页
   1.8.1 材料第38页
   1.8.2 Fenton法测定莪术多糖抗羟自由基活性.第38页
    1.8.2.1 羟自由基的产生——Fenton反应第38页
    1.8.2.2 羟自由基的测定第38页
    1.8.2.3 羟自由基清除率的计算第38页
  1.9 从莪术中同时提取多糖和挥发油的最佳条件的确立第38页
  1.10 数理统计分析第38页
 2 结果与分析第38-47页
  2.1 莪术多糖提取条件确立的实验结果第38-39页
  2.2 莪术多糖性质的检测第39页
  2.3 莪术多糖的分离提取、纯化的实验结果第39-42页
   2.3.1 莪术多糖的醇析结果第39页
   2.3.2 除色素方法的比较结果第39-40页
   2.3.3 Savage法除蛋白的实验结果第40页
   2.3.4 莪术多糖的DEAE-52柱层析的实验结果第40-41页
   2.3.5 莪术多糖的琼脂糖凝胶电泳检测结果第41页
   2.3.6 莪术不同器官多糖含量的测定结果第41页
   2.3.7 纸层析检测结果第41-42页
  2.4 莪术多糖体内抗肿瘤实验第42-43页
   2.4.1 莪术多糖的注射给药及口服给药对小鼠H22肝癌腹水瘤的抑制作用第42-43页
  2.5 莪术多糖体内免疫功能实验第43-44页
   2.5.1 莪术多糖对H22荷瘤小鼠脾指数和淋巴细胞转化的影响第43-44页
  2.6 莪术多糖体内抗氧化实验第44页
   2.6.1 莪术多糖对H22荷瘤小鼠血液SOD活性的影响第44页
  2.7 莪术多糖体外抗氧化实验第44-46页
   2.7.1 不同材料相同醇析级份的多糖抗羟自由基的能力比较第44-45页
   2.7.2 莪术多糖浓度对清除羟自由基的影响第45-46页
  2.8 从莪术中同时提取多糖和挥发油的最佳条件确立的实验结果第46-47页
 3 讨论第47-49页
  3.1 莪术多糖的提取、纯化工艺的研究第47页
  3.2 莪术多糖与莪术次生代谢物——挥发油的关系第47页
  3.3 莪术多糖生物学活性机理的探讨第47-49页
结论第49-50页
英文摘要第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55页

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