| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 脱水蛋白及其基因表达调控 | 第13-20页 |
| 1 脱水蛋白的定义和存在 | 第13页 |
| 2 脱水蛋白的结构 | 第13-14页 |
| 3 脱水蛋白的分布 | 第14页 |
| 4 脱水蛋白基因的克隆和定位 | 第14-15页 |
| 5 脱水蛋白的功能 | 第15-16页 |
| 6 脱水蛋白基因表达调控 | 第16-17页 |
| 7 ABA调控的脱水蛋白基因表达 | 第17-18页 |
| 8 脱水蛋白与植物抗逆性的相关性研究 | 第18-20页 |
| 第二章 植物抗冻机制中的基因表达及其调控 | 第20-35页 |
| 第一节 植物在低温胁迫下的伤害机制 | 第20-24页 |
| 1 植物低温伤害的类型 | 第20-21页 |
| ·冷害 | 第20页 |
| ·冻害 | 第20-21页 |
| 2 冰冻伤害的机理 | 第21-24页 |
| ·冰冻引起的脱水损伤 | 第21页 |
| ·膜系统的脱水损伤 | 第21-23页 |
| ·HII相位的形成机理 | 第23-24页 |
| 第二节 低温诱导的植物基因表达 | 第24-29页 |
| 1 编码功能蛋白的基因 | 第24-27页 |
| ·渗透调节物质 | 第24-25页 |
| ·活性氧清除剂 | 第25页 |
| ·冰冻保护蛋白 | 第25页 |
| ·膜脂相的改变 | 第25-26页 |
| ·冷诱导基因 | 第26-27页 |
| 2 编码调节蛋白的基因 | 第27-29页 |
| ·蛋白激酶 | 第27页 |
| ·CBF/DREB1转录因子 | 第27-28页 |
| ·其他低温调控基因 | 第28-29页 |
| 第三节 CBF/DREB1基因家族的结构与表达调控 | 第29-35页 |
| 1 CRT/DRE核心序列元件 | 第29页 |
| 2 CBF/DREB转录因子的结构 | 第29-31页 |
| 3 CBF/DREB基因的表达调控 | 第31-32页 |
| 4 CBF/DREB1转基因研究进展 | 第32-35页 |
| 第三章 铁皮石斛脱水蛋白的表达及其功能研究 | 第35-64页 |
| 第一节 干燥诱导的脱水蛋白表达 | 第35-45页 |
| 1 前言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-39页 |
| ·培养条件 | 第36页 |
| ·ABA处理 | 第36页 |
| ·空气干燥法脱水处理及超低温保存 | 第36页 |
| ·含水量的计算 | 第36-37页 |
| ·脱水速率的控制 | 第37页 |
| ·存活率的计算 | 第37页 |
| ·可溶性总糖含量测定 | 第37页 |
| ·可溶性蛋白和热稳定蛋白的提取及SDS-PAGE分析 | 第37-38页 |
| ·脱水蛋白的Western Blot检测 | 第38页 |
| ·糖蛋白的检测 | 第38页 |
| ·数据的统计分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·脱水时间、脱水速率和含水量 | 第39-40页 |
| ·PLBs的脱水处理及超低温保存 | 第40-41页 |
| ·脱水过程中可溶性糖含量的变化 | 第41-42页 |
| ·热稳定蛋白、脱水蛋白和糖蛋白分析 | 第42-45页 |
| 第二节 低温驯化与脱水蛋白表达及其抗冻性的关系 | 第45-52页 |
| 1 前言 | 第45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-47页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·低温控制体系的建立 | 第45-46页 |
| ·TTC法和恢复生长测定存活率 | 第46-47页 |
| ·热稳定蛋白的提取及SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| ·脱水蛋白的Western Blot检测 | 第47页 |
| ·数据的统计分析 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·低温控制体系的建立 | 第47-48页 |
| ·不同冰冻温度对铁皮石斛类原球茎存活率的影响 | 第48-49页 |
| ·低温驯化的时间对PLBs抗冻性的影响 | 第49-50页 |
| ·不同的低温驯化时间与脱水蛋白积累的关系 | 第50-52页 |
| 第三节 高盐、渗透压处理与脱水蛋白积累的关系 | 第52-60页 |
| 1 前言 | 第52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·盐处理 | 第52页 |
| ·渗透压处理 | 第52-53页 |
| ·TTC法和恢复生长测定存活率 | 第53页 |
| ·热稳定蛋白的提取及SDS-PAGE分析 | 第53页 |
| ·脱水蛋白的Western Blot检测 | 第53页 |
| ·数据的统计分析 | 第53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-60页 |
| ·不同浓度NaCl溶液对铁皮石斛类原球茎存活率的影响 | 第53-55页 |
| ·铁皮石斛类原球茎的NaCl半致死浓度确立 | 第53-54页 |
| ·不同浓度NaCl溶液处理对铁皮石斛类原球茎存活率的影响 | 第54-55页 |
| ·不同浓度PEG溶液对铁皮石斛类原球茎存活率的影响 | 第55-57页 |
| ·不同浓度的PEG处理对PLBs渗透调节后鲜重变化的影响 | 第55-56页 |
| ·不同浓度PEG处理对PLBs相对存活率的影响 | 第56-57页 |
| ·盐胁迫与PLBs热稳定蛋白和脱水蛋白积累的关系 | 第57-58页 |
| ·渗透压胁迫与PLBs热稳定蛋白和脱水蛋白的关系 | 第58-60页 |
| 第四节 讨论 | 第60-64页 |
| 1 干燥、低温、渗透、高盐和ABA处理对铁皮石斛类原球茎脱水蛋白积累的影响 | 第60-61页 |
| 2 影响铁皮石斛类原球茎脱水蛋白积累水平的因素 | 第61页 |
| 3 脱水蛋白的积累与铁皮石斛类原球茎抗脱水抗冻性的相关性 | 第61-62页 |
| 4 渗透胁迫诱导的热稳定蛋白 | 第62-64页 |
| 第四章 CBF1基因在烟草中的转化、遗传及其抗冻性和抗旱性研究 | 第64-99页 |
| 第一节 农杆菌介导法将CBF1基因转入烟草及转基因植株的鉴定 | 第64-72页 |
| 1 前言 | 第64-65页 |
| 2 材料与方法 | 第65-69页 |
| ·pBI121-CBF1表达载体的构建 | 第65-68页 |
| ·农杆菌介导的叶圆盘法转化 | 第68-69页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-72页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第69-70页 |
| ·卡那霉素抗性愈伤组织的筛选及转化植株再生 | 第70-71页 |
| ·转化烟草中CBF1基因的PCR鉴定 | 第71-72页 |
| 第二节 转CBF1基因烟草植株后代的遗传分析 | 第72-77页 |
| 1 前言 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-73页 |
| ·植物材料的培养 | 第72页 |
| ·卡那霉素抗性检测 | 第72-73页 |
| ·数据的统计分析 | 第73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-77页 |
| ·T1代烟草小苗的卡那霉素筛选 | 第73-74页 |
| ·T2代烟草小苗的卡那霉素筛选及PCR鉴定 | 第74-76页 |
| ·卡那霉素抗性筛选 | 第74-75页 |
| ·CBF1基因的PCR鉴定 | 第75-76页 |
| ·T3代烟草小苗的卡那霉素筛选实验和转基因烟草纯系鉴定 | 第76-77页 |
| 第三节 转CBF1烟草植株的抗冻性测定 | 第77-81页 |
| 1 前言 | 第77页 |
| 2 材料与方法 | 第77-78页 |
| ·烟草小苗的培养 | 第77-78页 |
| ·低温控制体系 | 第78页 |
| ·电导率法测定烟草存活率 | 第78页 |
| ·转基因烟草小苗抗冻性测定 | 第78页 |
| 3 结果与分析 | 第78-81页 |
| ·不同低温温度对转基因烟草和野生型烟草的存活率影响 | 第78-79页 |
| ·转基因烟草与野生型烟草小苗抗冻性比较 | 第79-81页 |
| 第四节 转CBF1烟草植株的抗旱性测定 | 第81-87页 |
| 1 前言 | 第81页 |
| 2 材料与方法 | 第81-82页 |
| ·烟草小苗的培养 | 第81页 |
| ·不同PEG浓度的MS培养基配制 | 第81页 |
| ·转基因烟草的耐干旱测定 | 第81-82页 |
| 3 结果与分析 | 第82-87页 |
| ·T2-19转基因烟草与野生型烟草的耐干旱性 | 第82-85页 |
| ·15％PEG处理时间与烟草小苗存活率的关系 | 第82页 |
| ·不同浓度PEG及其处理时间对T2-19和野生型烟草耐旱性的影响 | 第82-85页 |
| ·不同转基因株系的耐干旱性比较 | 第85-87页 |
| 第五节 转CBF1基因烟草植株中的表型变异 | 第87-96页 |
| 1 前言 | 第87页 |
| 2 材料与方法 | 第87-88页 |
| ·株高、叶、花、果实的观察及统计 | 第87-88页 |
| ·花粉管的萌发培养 | 第88页 |
| 3 结果与分析 | 第88-96页 |
| ·T1烟草株高的变异 | 第88-89页 |
| ·花器官和叶的变化 | 第89-93页 |
| ·蒴果数量与花粉管萌发率 | 第93-96页 |
| 第六节 讨论 | 第96-99页 |
| 1 转CBF1基因烟草的抗冻性和抗旱性分析 | 第96-97页 |
| 2 CBF1基因的异位表达对烟草植株表型的影响 | 第97-99页 |
| 第五章 展望 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-111页 |
| 在读期间发表的论文 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
