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生防绿色木霉工程菌的构建及其诱导植物抗病性研究

第一部分 文献综述与前言第1-48页
 第一章 生防制剂与诱导植物抗病第15-23页
  第一节 植物生防制剂及其使用优点第15-17页
   1.1 植物生防制剂的定义和特点第15页
   1.2 植物生防制剂的种类第15-17页
  第二节 植物生防制剂菌株的改良途径第17-19页
   2.1 分子生物学途径第17-19页
   2.2 原生质体融合途径第19页
   2.3 诱变育种途径第19页
  第三节 植物生防制剂与诱导抗病性第19-23页
   3.1 植物诱导抗病性的概念及其特点第19-20页
   3.2 植物诱导抗病性产生的机制第20-21页
   3.3 植物诱导抗病性的应用前景第21-23页
 第二章 丝状真菌遗传转化第23-36页
  第一节 丝状真菌遗传转化的特点第23-24页
   1.1 整合转化为主第23页
   1.2 转化不需要序列同源性第23-24页
   1.3 丝状真菌转化率比较低第24页
  第二节 丝状真菌遗传转化研究简史第24页
  第三节 丝状真菌遗传转化载体系统第24-28页
   3.1 丝状真菌转化子的筛选标记和稳定性第24-26页
   3.2 丝状真菌载体质粒的构建第26-27页
   3.3 外源DNA进入真菌后的复制机制第27-28页
  第四节 丝状真菌基因表达分泌系统第28-30页
   4.1 基因的表达调控元件第29页
   4.2 蛋白质的加工与分泌第29-30页
   4.3 真菌基因表达的位置效应第30页
  第五节 丝状真菌转化方法第30-34页
   5.1 原生质体技术转化法第31-33页
   5.2 醋酸锂转化法第33页
   5.3 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)转化法第33-34页
  第六节 丝状真菌转化系统的应用第34-36页
   6.1 作为异源基因表达和分泌系统第34页
   6.2 开展育种工作第34-36页
 第三章 生防菌木霉研究进展第36-48页
  第一节 木霉菌在生防中的作用第36-40页
   1.1 木霉菌对植物病原真菌的拮抗机制第36-39页
   1.2 木霉菌对植物生长的影响第39-40页
  第二节 木霉菌分子生物学研究进展第40-44页
   2.1 大分子物质研究第40-41页
   2.2 转胞壁降解酶基因工程第41-42页
   2.3 基因克隆第42-43页
   2.4 外源基因表达第43-44页
  第三节 木霉菌生防应用近况第44-45页
  第四节 实验选题依据、研究内容以及目的意义第45-48页
   4.1 选题依据第45-46页
   4.2 研究内容第46-47页
   4.3 研究目的意义第47页
   4.4 研究内容的创新之处第47-48页
第二部分 研究论文第48-107页
 第四章 隐地蛋白基因的真菌表达载体构建第49-61页
  1 材料与方法第49-55页
   1.1 材料第49-50页
   1.2 Crypt基因和CrypK13V基因的克隆第50-51页
   1.3 信号肽ThChi基因的克隆第51-52页
   1.4 载体构建技术路线第52-55页
  2 结果与分析第55-58页
   2.1 Crypt基因转化载体构建第55-56页
   2.2 CrypK13V基因转化载体构建第56-58页
  3 讨论第58-61页
   3.1 激发子基因第58页
   3.2 真菌表达载体构建策略第58-59页
   3.3 启动子和终止子的选择第59-60页
   3.4 信号肽的选择第60-61页
 第五章 限制性酶介导绿色木霉转化及转化子鉴定第61-78页
  1 材料与方法第61-66页
   1.1 材料第61-62页
   1.2 方法第62-66页
  2 结果与分析第66-75页
   2.1 绿色木霉原生质体制备第66-70页
   2.2 绿色木霉原生质体再生第70页
   2.3 绿色木霉原生质体的转化第70-72页
   2.4 绿色木霉转化子的鉴定第72-75页
  3 讨论第75-78页
   3.1 影响原生质体制备的因素第75页
   3.2 影响原生质体再生的因素第75-76页
   3.3 影响转化效率的主要因素第76页
   3.4 影响转化子稳定性的主要因素第76-77页
   3.5 影响蛋白表达的主要因素第77-78页
 第六章 木霉转化子提高烟草和拟南芥对病原菌抗性分析第78-98页
  1 材料与方法第78-82页
   1.1 材料第78页
   1.2 方法第78-82页
  2 结果与分析第82-93页
   2.1 转化子诱导烟草抗病性分析第82-90页
   2.2 转化子诱导拟南芥抗病性分析第90-93页
  3 讨论第93-98页
   3.1 转基因木霉分泌elicitin诱导植物抗病作用第93页
   3.2 elicitin诱导植物抗病性的分子机理第93-96页
   3.3 转激发子基因木霉菌在植物防治中应用前景第96-98页
 第七章 转化子TV-3培养条件及培养基筛选初报第98-107页
  1 材料和方法第98-100页
   1.1 材料第98页
   1.2 方法第98-100页
  2 实验结果第100-105页
   2.1 不同培养温度对木霉产孢量影响第100页
   2.2 不同pH对转化子产孢量影响第100页
   2.3 不同固体培养基对TV-3产孢量的影响第100-101页
   2.4 固体发酵培养基配方的筛选第101-102页
   2.5 不同振荡频率对菌丝生长的影响第102页
   2.6 液体摇瓶培养基的筛选第102-103页
   2.7 TV-3对烟草生长的刺激作用第103-105页
  3 分析与讨论第105-107页
小结第107-108页
参考文献第108-120页
附录A 常用培养基以及培养液配方第120-122页
附录B 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第122-124页

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