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PRV鲁A株的分离鉴定及表达EGFP和CSFV-E2的TK~-重组伪狂犬病毒的构建

本文所用英文名称及其缩写第1-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-16页
前言第16-18页
上篇 文献综述第18-54页
 第一章 伪狂犬病毒分子生物学研究进展第18-41页
  1 病毒分类第18页
  2 病毒粒子结构第18-24页
   2.1 病毒基因组第18-19页
   2.2 衣壳第19-20页
   2.3 皮层第20-22页
   2.4 病毒囊膜与糖蛋白第22-24页
  3 病毒的溶细胞性复制第24-26页
   3.1 吸附和穿入第24页
   3.2 核内过程第24-26页
   3.3 病毒的出芽第26页
  4 潜伏性和嗜神经性第26-27页
  5 毒力致弱与猪伪狂犬病疫苗的研究进展第27-41页
   5.1 毒力致弱第27-29页
   5.2 伪狂犬病疫苗第29-34页
    5.2.1 传统疫苗第29-30页
    5.2.2 基因缺失标记疫苗第30-32页
    5.2.3 重组疫苗第32-34页
   5.3 基因疫苗第34-35页
   5.4 亚单位疫苗第35-41页
 第二章 胸苷激酶基因与胸苷激酶第41-54页
  1 针对TK的分子生物学和药物研究第41-42页
  2 病毒和细胞TK基因的结构第42-45页
  3 TK基因表达的调控第45-46页
  4 病毒TK的特性第46-47页
  5 TK酶的底物结合位点第47-48页
  6 HSV-1 TK基因治疗恶性肿瘤第48-50页
  7 用TK~-重组病毒作疫苗第50-54页
下篇 研究报告第54-162页
 第一章 猪伪狂犬病毒鲁A株的分离鉴定第54-74页
  中英文摘要第54-55页
  1 材料与方法第55-57页
   1.1 抗原与血清第55页
   1.2 试验动物第55页
   1.3 参考病毒第55页
   1.4 培养基与血清第55-56页
   1.5 试剂第56页
   1.6 细胞第56页
    1.6.1 原代RK细胞第56页
    1.6.2 鸡胚成纤维细胞第56页
    1.6.3 传代细胞第56页
   1.7 PCR检测病毒的特异性第56页
   1.8 病料处理第56页
   1.9 病毒分离第56页
   1.10 分离毒株的克隆纯化第56-57页
   1.11 克隆毒株TCID_(50)滴定第57页
   1.12 动物接种试验第57页
   1.13 电镜观察第57页
   1.14 中和试验第57页
  2 结果第57-70页
  3 讨论第70-72页
  参考文献第72-74页
 第二章 伪狂犬病毒鲁A株gD基因的序列测定及其结构与进化分析第74-95页
  中英文摘要第74-76页
  1 材料与方法第76-78页
   1.1 病毒株和细胞株第76页
   1.2 质粒和菌株第76页
   1.3 工具酶第76页
   1.4 PRV LA株病毒DNA的提取第76页
   1.5 gD基因的扩增、克隆与序列测定第76-77页
   1.6 计算机分析第77页
   1.7 序列资料第77页
   1.8 序列与功能分析第77-78页
   1.9 疱疹病毒TK起源分析第78页
  2 结果第78-89页
  3 讨论第89-93页
  参考文献第93-95页
 第三章 猪伪狂犬病毒鲁A株TK基因的序列测定及其结构与进化分析第95-116页
  中英文摘要第95-97页
  1 材料与方法第97-101页
   1.1 病毒株与细胞第97页
   1.2 质粒和菌株第97页
   1.3 工具酶第97页
   1.4 病毒DNA提取第97页
   1.5 TK基因的扩增、克隆与序列测定第97-101页
   1.6 序列与功能分析第101页
   1.7 疱疹病毒TK基因起源分析第101页
  2 结果第101-111页
  3 讨论第111-114页
  参考文献第114-116页
 第四章 含EGFP PRV TK~-转移载体和表达EGFP和Bartha-K61 TK~-突变株的构建第116-138页
  中英文摘要第116-117页
  1 材料与方法第117-128页
   1.1 材料第117-119页
    1.1.1 毒株和细胞第118页
    1.1.2 质粒和菌株第118页
    1.1.3 工具酶第118页
    1.1.4 质粒提取kit与脂质体第118页
    1.1.5 细胞培养用品第118页
    1.1.6 PCR仪第118页
    1.1.7 PRV基因组UL区TK基因及其前后基因的排列资料第118页
    1.1.8 引物第118-119页
   1.2 方法第119-128页
    1.2.1 伪狂犬病毒基因组结构示意图第119页
    1.2.2 转移质粒载体构建策略第119-120页
    1.2.3 病毒增殖第120页
    1.2.4 病毒DNA提取第120-121页
    1.2.5 左右重组臂PCR扩增第121页
    1.2.6 左右重组臂的克隆与鉴定第121-125页
    1.2.7 EGFP基因表达盒DNA片段的分离、回收、补平与纯化第125-126页
    1.2.8 含EGFP基因表达盒转移载体pSKLRG的构建第126-127页
    1.2.9 同原重组与重组病毒PRV rBGFP获得第127-128页
  2 结果第128-134页
  3 讨论第134-136页
  参考文献第136-138页
 第五章 表达EGFP和CSFV-E2基因的TK PRV rGE2的构建第138-157页
  中英文摘要第138-140页
  1 材料与方法第140-146页
   1.1 材料第140-141页
    1.1.1 毒株和细胞第140页
    1.1.2 转移质粒载体第140页
    1.1.3 质粒提取kit与脂质体第140页
    1.1.4 细胞培养用品第140页
    1.1.5 SDS-PAGE试剂第140-141页
    1.1.6 免疫转印有关试剂和材料第141页
    1.1.7 主要仪器第141页
   1.2 方法第141-146页
    1.2.1 PRV LA株在BHK-21上TCID_(50)和PFU测定第141页
    1.2.2 转移质粒载体的构建、提取与线性化第141-143页
    1.2.3 同源重组第143-144页
    1.2.4 PCR扩增重组病毒中CSFV-E2中特定e2片段第144-145页
    1.2.5 Western blotting检测重组病毒中CSFV-E2蛋白的表达第145页
    1.2.6 表达产物的免疫转印第145-146页
    1.2.7 重组病毒生物学特性观察第146页
  2 结果第146-152页
  3 讨论第152-155页
  参考文献第155-157页
 第六章 重组病毒PRV rGE2对猪的安全与免疫力试验第157-162页
  中英文摘要第157-158页
  1 材料与方法第158-160页
   1.1 试验猪第158-159页
   1.2 对照疫苗第159页
   1.3 试验疫苗第159页
   1.4 安全与效力试验第159页
   1.5 攻毒剂量与途径第159页
   1.6 PRV与CSFV抗体效价测定第159-160页
  2 结果第160页
  3 讨论第160-161页
  参考文献第161-162页
全文总结第162-164页
致谢第164-165页
在学期间论著情况第165-166页
附录第166-168页

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