本文所用英文名称及其缩写 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
前言 | 第16-18页 |
上篇 文献综述 | 第18-54页 |
第一章 伪狂犬病毒分子生物学研究进展 | 第18-41页 |
1 病毒分类 | 第18页 |
2 病毒粒子结构 | 第18-24页 |
2.1 病毒基因组 | 第18-19页 |
2.2 衣壳 | 第19-20页 |
2.3 皮层 | 第20-22页 |
2.4 病毒囊膜与糖蛋白 | 第22-24页 |
3 病毒的溶细胞性复制 | 第24-26页 |
3.1 吸附和穿入 | 第24页 |
3.2 核内过程 | 第24-26页 |
3.3 病毒的出芽 | 第26页 |
4 潜伏性和嗜神经性 | 第26-27页 |
5 毒力致弱与猪伪狂犬病疫苗的研究进展 | 第27-41页 |
5.1 毒力致弱 | 第27-29页 |
5.2 伪狂犬病疫苗 | 第29-34页 |
5.2.1 传统疫苗 | 第29-30页 |
5.2.2 基因缺失标记疫苗 | 第30-32页 |
5.2.3 重组疫苗 | 第32-34页 |
5.3 基因疫苗 | 第34-35页 |
5.4 亚单位疫苗 | 第35-41页 |
第二章 胸苷激酶基因与胸苷激酶 | 第41-54页 |
1 针对TK的分子生物学和药物研究 | 第41-42页 |
2 病毒和细胞TK基因的结构 | 第42-45页 |
3 TK基因表达的调控 | 第45-46页 |
4 病毒TK的特性 | 第46-47页 |
5 TK酶的底物结合位点 | 第47-48页 |
6 HSV-1 TK基因治疗恶性肿瘤 | 第48-50页 |
7 用TK~-重组病毒作疫苗 | 第50-54页 |
下篇 研究报告 | 第54-162页 |
第一章 猪伪狂犬病毒鲁A株的分离鉴定 | 第54-74页 |
中英文摘要 | 第54-55页 |
1 材料与方法 | 第55-57页 |
1.1 抗原与血清 | 第55页 |
1.2 试验动物 | 第55页 |
1.3 参考病毒 | 第55页 |
1.4 培养基与血清 | 第55-56页 |
1.5 试剂 | 第56页 |
1.6 细胞 | 第56页 |
1.6.1 原代RK细胞 | 第56页 |
1.6.2 鸡胚成纤维细胞 | 第56页 |
1.6.3 传代细胞 | 第56页 |
1.7 PCR检测病毒的特异性 | 第56页 |
1.8 病料处理 | 第56页 |
1.9 病毒分离 | 第56页 |
1.10 分离毒株的克隆纯化 | 第56-57页 |
1.11 克隆毒株TCID_(50)滴定 | 第57页 |
1.12 动物接种试验 | 第57页 |
1.13 电镜观察 | 第57页 |
1.14 中和试验 | 第57页 |
2 结果 | 第57-70页 |
3 讨论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-74页 |
第二章 伪狂犬病毒鲁A株gD基因的序列测定及其结构与进化分析 | 第74-95页 |
中英文摘要 | 第74-76页 |
1 材料与方法 | 第76-78页 |
1.1 病毒株和细胞株 | 第76页 |
1.2 质粒和菌株 | 第76页 |
1.3 工具酶 | 第76页 |
1.4 PRV LA株病毒DNA的提取 | 第76页 |
1.5 gD基因的扩增、克隆与序列测定 | 第76-77页 |
1.6 计算机分析 | 第77页 |
1.7 序列资料 | 第77页 |
1.8 序列与功能分析 | 第77-78页 |
1.9 疱疹病毒TK起源分析 | 第78页 |
2 结果 | 第78-89页 |
3 讨论 | 第89-93页 |
参考文献 | 第93-95页 |
第三章 猪伪狂犬病毒鲁A株TK基因的序列测定及其结构与进化分析 | 第95-116页 |
中英文摘要 | 第95-97页 |
1 材料与方法 | 第97-101页 |
1.1 病毒株与细胞 | 第97页 |
1.2 质粒和菌株 | 第97页 |
1.3 工具酶 | 第97页 |
1.4 病毒DNA提取 | 第97页 |
1.5 TK基因的扩增、克隆与序列测定 | 第97-101页 |
1.6 序列与功能分析 | 第101页 |
1.7 疱疹病毒TK基因起源分析 | 第101页 |
2 结果 | 第101-111页 |
3 讨论 | 第111-114页 |
参考文献 | 第114-116页 |
第四章 含EGFP PRV TK~-转移载体和表达EGFP和Bartha-K61 TK~-突变株的构建 | 第116-138页 |
中英文摘要 | 第116-117页 |
1 材料与方法 | 第117-128页 |
1.1 材料 | 第117-119页 |
1.1.1 毒株和细胞 | 第118页 |
1.1.2 质粒和菌株 | 第118页 |
1.1.3 工具酶 | 第118页 |
1.1.4 质粒提取kit与脂质体 | 第118页 |
1.1.5 细胞培养用品 | 第118页 |
1.1.6 PCR仪 | 第118页 |
1.1.7 PRV基因组UL区TK基因及其前后基因的排列资料 | 第118页 |
1.1.8 引物 | 第118-119页 |
1.2 方法 | 第119-128页 |
1.2.1 伪狂犬病毒基因组结构示意图 | 第119页 |
1.2.2 转移质粒载体构建策略 | 第119-120页 |
1.2.3 病毒增殖 | 第120页 |
1.2.4 病毒DNA提取 | 第120-121页 |
1.2.5 左右重组臂PCR扩增 | 第121页 |
1.2.6 左右重组臂的克隆与鉴定 | 第121-125页 |
1.2.7 EGFP基因表达盒DNA片段的分离、回收、补平与纯化 | 第125-126页 |
1.2.8 含EGFP基因表达盒转移载体pSKLRG的构建 | 第126-127页 |
1.2.9 同原重组与重组病毒PRV rBGFP获得 | 第127-128页 |
2 结果 | 第128-134页 |
3 讨论 | 第134-136页 |
参考文献 | 第136-138页 |
第五章 表达EGFP和CSFV-E2基因的TK PRV rGE2的构建 | 第138-157页 |
中英文摘要 | 第138-140页 |
1 材料与方法 | 第140-146页 |
1.1 材料 | 第140-141页 |
1.1.1 毒株和细胞 | 第140页 |
1.1.2 转移质粒载体 | 第140页 |
1.1.3 质粒提取kit与脂质体 | 第140页 |
1.1.4 细胞培养用品 | 第140页 |
1.1.5 SDS-PAGE试剂 | 第140-141页 |
1.1.6 免疫转印有关试剂和材料 | 第141页 |
1.1.7 主要仪器 | 第141页 |
1.2 方法 | 第141-146页 |
1.2.1 PRV LA株在BHK-21上TCID_(50)和PFU测定 | 第141页 |
1.2.2 转移质粒载体的构建、提取与线性化 | 第141-143页 |
1.2.3 同源重组 | 第143-144页 |
1.2.4 PCR扩增重组病毒中CSFV-E2中特定e2片段 | 第144-145页 |
1.2.5 Western blotting检测重组病毒中CSFV-E2蛋白的表达 | 第145页 |
1.2.6 表达产物的免疫转印 | 第145-146页 |
1.2.7 重组病毒生物学特性观察 | 第146页 |
2 结果 | 第146-152页 |
3 讨论 | 第152-155页 |
参考文献 | 第155-157页 |
第六章 重组病毒PRV rGE2对猪的安全与免疫力试验 | 第157-162页 |
中英文摘要 | 第157-158页 |
1 材料与方法 | 第158-160页 |
1.1 试验猪 | 第158-159页 |
1.2 对照疫苗 | 第159页 |
1.3 试验疫苗 | 第159页 |
1.4 安全与效力试验 | 第159页 |
1.5 攻毒剂量与途径 | 第159页 |
1.6 PRV与CSFV抗体效价测定 | 第159-160页 |
2 结果 | 第160页 |
3 讨论 | 第160-161页 |
参考文献 | 第161-162页 |
全文总结 | 第162-164页 |
致谢 | 第164-165页 |
在学期间论著情况 | 第165-166页 |
附录 | 第166-168页 |