1 文献综述 | 第1-32页 |
·杆状病毒分子生物学概述 | 第10-21页 |
·杆状病毒的分类地位 | 第10-11页 |
·杆状病毒的形态结构 | 第11页 |
·杆状病毒的生活史 | 第11-12页 |
·杆状病毒的细胞系及杆状病毒感染细胞所引起的细胞病理变化 | 第12-14页 |
·杆状病毒功能基因组学研究概述 | 第14-20页 |
·杆状病毒的进化 | 第20-21页 |
·杆状病毒功能基因组学研究的方法学概述 | 第21-27页 |
·基因功能的预测 | 第21-23页 |
·由功能到基因的研究方法 | 第23-24页 |
·通过基因表达产物的定位来获得基因的功能信息 | 第24-25页 |
·利用基因突变分析的方法研究杆状病毒基因的功能 | 第25-26页 |
·基因的超量表达功能分析 | 第26页 |
·在杆状病毒分子生物学研究中一些高通量研究方法的可能的应用 | 第26-27页 |
·杆状病毒分子生物学研究的实践意义 | 第27-28页 |
·杆状病毒生物杀虫剂 | 第27-28页 |
·杆状病毒表达系统 | 第28页 |
·杆状病毒表面展示系统 | 第28页 |
·杆状病毒基因治疗载体 | 第28页 |
·本实验研究的背景及前期工作的总结 | 第28-30页 |
·棉花生产及其病虫害防治 | 第28-29页 |
·棉铃虫病毒的早期研究 | 第29页 |
·棉铃虫病毒分子生物学研究阶段 | 第29-30页 |
·本实验的目的和意义 | 第30-32页 |
2 材料与方法 | 第32-42页 |
·材料 | 第32-35页 |
·大肠杆菌菌株 | 第32页 |
·昆虫细胞系 | 第32-33页 |
·病毒和Bacmid | 第33页 |
·质粒 | 第33-34页 |
·引物 | 第34页 |
·培养基 | 第34-35页 |
·酶、化学试剂和试剂盒 | 第35页 |
·抗生素 | 第35页 |
·方法 | 第35-42页 |
·大肠杆菌中质粒的提取方法 | 第35-36页 |
·大肠杆菌中Bacmid的提取法 | 第36页 |
·大肠杆菌转化子的快速检测 | 第36页 |
·DNA限制性酶切片段和PCR产物的回收 | 第36-37页 |
·电转化用感受态细胞的制备和电转化 | 第37页 |
·基因的原核表达和SDS-PAGE分析 | 第37页 |
·以大肠杆菌为宿主的蛋白质的纯化 | 第37-38页 |
·抗血清的制备 | 第38-39页 |
·Western杂交 | 第39页 |
·HaSNPV多角体的制备 | 第39-40页 |
·杆状病毒对昆虫细胞的感染和扩增 | 第40页 |
·HaSNPV DNA及Bacmid DNA对昆虫细胞的转染 | 第40-41页 |
·PCR(聚合酶链式反应) | 第41页 |
·杆状病毒序列的分析 | 第41页 |
·切片制备和电子显微镜的观察 | 第41-42页 |
3 结果与讨论 | 第42-90页 |
·一种有效的在大肠杆菌中构建同源重组杆状病毒的方法的建立 | 第42-52页 |
·引言 | 第42页 |
·载体的构建和线型片段的制各 | 第42-44页 |
·以BW25113(Pkd46)为宿主的同源重组 | 第44-46页 |
·重组子的鉴定 | 第46-48页 |
·缺失v-cath基因的重组HaSNPV的功能鉴定 | 第48-50页 |
·小结 | 第50-52页 |
·一种以PCR产物直接构建同源重组杆状病毒的方法 | 第52-58页 |
·引言 | 第52页 |
·orf135基因缺失型重组病毒的构建 | 第52-54页 |
·重组Bacmid的鉴定 | 第54-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
·棉铃虫病毒基因组随机插入突变文库的构建及突变子的定向筛选 | 第58-66页 |
·引言 | 第58页 |
·转座子TnMax13插入突变文库的构建 | 第58-60页 |
·特定基因突变的PCR筛选和鉴定 | 第60-64页 |
·特定基因的插入突变子的测序鉴定 | 第64页 |
·转座子随机突变子文库的进一步应用及应注意的问题 | 第64-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
·orf107的鉴定和功能分析 | 第66-81页 |
·引言 | 第66页 |
·orf107在棉铃虫病毒基因组中的位置及其相邻基因在整个基因组中的分布特征 | 第66-67页 |
·orf107的启动子,终止子和一级结构序列的特征 | 第67-69页 |
·orf107的功能结构域分析及其在细胞中的定位信息的预测 | 第69-70页 |
·orf107的相似性比较分析 | 第70页 |
·orf107的表达分析 | 第70-73页 |
·orf107的突变病毒的构建 | 第73-76页 |
·orf107的突变分析 | 第76-79页 |
·小结 | 第79-81页 |
·棉铃虫病毒基因组中orf135的鉴定和功能分析 | 第81-90页 |
·引言 | 第81页 |
·orf135在棉铃虫病毒基因组中的位置及其序列特征 | 第81-83页 |
·orf135功能的软件分析 | 第83-84页 |
·orf135在HzAM1细胞中表达情况的研究 | 第84-87页 |
·orf135的缺失分析 | 第87-89页 |
·小结 | 第89-90页 |
4 总结 | 第90-92页 |
5 参考文献 | 第92-102页 |
6 已发表和撰写的论文 | 第102-103页 |
7 致谢 | 第103-104页 |