| 摘要 | 第1-10页 |
| 导言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-39页 |
| 1 转基因动物研究进展 | 第12-29页 |
| ·转基因动物的制作方法 | 第12-15页 |
| ·转基因动物研究的应用 | 第15-24页 |
| ·转基因动物研究中出现的问题 | 第24-25页 |
| ·转基因的表达特征及提高转基因表达的策略 | 第25-27页 |
| ·绿色荧光蛋白(GFP)---转基因动物理想的选择标记 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 2 肥胖基因研究概况 | 第29-39页 |
| ·肥胖基因的分子生物学基础 | 第29-30页 |
| ·Leptin可能的生物学作用 | 第30-35页 |
| ·Leptin的其它作用 | 第35页 |
| ·Leptin的其他作用 | 第35-37页 |
| ·Leptin的作用位点 | 第37页 |
| ·重组Leptin的生产 | 第37-38页 |
| ·关于Leptin研究应用的展望 | 第38-39页 |
| 第二章 材料与方法 | 第39-51页 |
| 1 材料 | 第39-41页 |
| 2 方法 | 第41-51页 |
| 第三章 结果与分析 | 第51-62页 |
| 1 表达载体的构建策略 | 第51-52页 |
| 2 人肥胖基因(cDNA)序列的测序 | 第52-53页 |
| 3 克隆载体及表达载体的酶切鉴定 | 第53-54页 |
| 4 用于显微注射的DNA的物理图谱 | 第54页 |
| 5 小鼠尾组织DNA的提取 | 第54-55页 |
| 6 用PCR扩增的方法检测转基因小鼠 | 第55-57页 |
| 7 通过Southern杂交的方法检测转基因小鼠 | 第57-58页 |
| 8 转基因遗传的检测 | 第58-59页 |
| 9 转基因表达产物的检测 | 第59-62页 |
| ·小鼠奶样SDS-PAGE条件的建立 | 第59-60页 |
| ·转基因在始祖转基因小鼠乳腺中的表达 | 第60-62页 |
| 第四章 讨论 | 第62-69页 |
| 1 关于载体的亚克隆 | 第62-63页 |
| ·关于5′突出端的补平 | 第62页 |
| ·防止星号活力(Star Activity)的出现 | 第62页 |
| ·平齐末端在连接前的热处理 | 第62页 |
| ·连接反应完成后的热处理 | 第62页 |
| ·连接效果的初步评价 | 第62-63页 |
| ·不进行载体的去磷酸化处理 | 第63页 |
| ·用裂解细菌的方法初步鉴定重组质粒 | 第63页 |
| 2 关于小鼠尾组织DNA的提取 | 第63-64页 |
| 3 关于检测转基因动物的方法 | 第64-65页 |
| 4 建立转基因小鼠动物模型的意义 | 第65页 |
| 5 关于表达载体的特征及其在转基因小鼠中的表达 | 第65-67页 |
| 6 关于转基因在转基因小鼠基因组中的整合 | 第67页 |
| 7 关于转基因的遗传 | 第67-68页 |
| 8 关于重组蛋白质的生产及检测 | 第68页 |
| 9 需进一步研究的问题 | 第68-69页 |
| 第五章 结论 | 第69-70页 |
| 第六章 参考文献 | 第70-82页 |
| 附录Ⅰ 小鼠原核期胚胎显微注射图片 | 第82-84页 |
| 附录Ⅱ 质粒p26及pR的构建及酶切图谱 | 第84-86页 |
| 附录Ⅲ 人肥胖基因cDNA序列测定结果扫描图(反向) | 第86-87页 |
| 附录Ⅳ 人肥胖基因cDNA序列测定结果扫描图(正向) | 第87页 |
