英文缩写词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
前言 | 第12-13页 |
文献回顾 抗体库技术的研究进展 | 第13-26页 |
1.抗体库技术的发展 | 第14-15页 |
2.噬菌体抗体库的构建、表达及筛选 | 第15-20页 |
3.噬菌体抗体库技术的特点与优势 | 第20-21页 |
4.噬菌体抗体库技术的难点及其可能的解决途径 | 第21-24页 |
5.噬菌体抗体库技术在医学微生物学中的应用 | 第24-26页 |
研究内容 | 第26-69页 |
研究内容一 人源性噬菌体抗体库的构建 | 第26-39页 |
(一) 实验材料 | 第26-29页 |
(二) 实验方法 | 第29-34页 |
1.PBL总RNA的提取及逆转录 | 第29页 |
2.PCR扩增重链Fd基因和轻链基因 | 第29-30页 |
3.抗体重链Fd基因库的构建 | 第30-32页 |
4.Fab抗体基因库的构建 | 第32页 |
5.噬菌体Fab抗体库的制备 | 第32-34页 |
(三) 实验结果 | 第34-37页 |
1.RNA的提取和逆转录 | 第34页 |
2.PCR扩增人抗体重链Fd基因及轻链基因 | 第34页 |
3.人抗体重链Fd基因库的构建 | 第34-35页 |
4.人源性Fab抗体基因库的构建 | 第35页 |
5.噬菌体Fab抗体库的制备 | 第35-37页 |
(四) 讨论 | 第37-39页 |
研究内容二 从噬菌体抗体库中筛选人源性抗HFRS病毒抗体 | 第39-53页 |
(一) 实验材料 | 第39-40页 |
(二) 实验方法 | 第40-43页 |
1.噬菌体抗体库的淘筛 | 第40页 |
2.噬菌体抗体的制备与鉴定 | 第40-41页 |
3.抗HFRS病毒抗体阳性克隆的酶切鉴定 | 第41页 |
4.抗HFRS病毒抗体阳性克隆的序列分析 | 第41-43页 |
(三) 实验结果 | 第43-51页 |
1.噬菌体Fab抗体库的淘筛结果 | 第43页 |
2.噬菌体抗体的鉴定结果 | 第43页 |
3.抗HFRS病毒抗体阳性克隆的酶切鉴定 | 第43-44页 |
4.抗HFRS病毒抗体阳性克隆No.11的序列分析 | 第44-51页 |
(四) 讨论 | 第51-53页 |
研究内容三 人源性抗HFRS病毒抗体真核表达载体的构建 | 第53-69页 |
(一) 实验材料 | 第53-54页 |
(二) 实验方法 | 第54-60页 |
1.人源性抗HFRS病毒抗体重链真核表达载体的构建 | 第54-56页 |
2.人源性抗HFRS病毒抗体轻链真核表达载体的构建 | 第56-60页 |
(三) 实验结果 | 第60-67页 |
1.人源性抗HFRS病毒抗体重链真核表达载体的构建 | 第60-63页 |
2.人源性抗HFRS病毒抗体轻链真核表达载体的构建 | 第63-67页 |
(四) 讨论 | 第67-69页 |
小结 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |