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肺动脉平滑肌细胞的结构变化在缺氧性肺动脉高压发生、发展中的作用及其机制初探

中文摘要第1-8页
英文缩写词第8-10页
1.文献综述第10-35页
2.前言第35-36页
3.材料与方法第36-50页
     ·主要试剂及仪器第36-37页
     ·主要溶液的配制第37-38页
     ·整体动物实验第38-41页
       ·动物模型第38页
       ·血流动力学指标测定第38页
       ·IAA结构观察第38-39页
         ·IAA分类计数第38-39页
         ·IAA内膜面积测量及EC核计数第39页
         ·IAA超微结构观察第39页
       ·肺外动脉结构与相应功能的观察第39-41页
         ·超微结构观察第39-40页
         ·离体肺动脉环Ach内皮依赖性舒张反应的测定第40页
         ·肺动脉壁羟脯氨酸含量测定第40-41页
     ·离体细胞培养第41-49页
       ·成年牛、新生小牛PASMC体外培养及生长曲线第41-43页
         ·贴块法培养PASMC第41-42页
         ·绘制生长曲线第42-43页
       ·培养PASMC缺氧模型的建立及有关指标测定、药物干预实验第43-45页
         ·相对生长静息PASMC的获取第43页
         ·缺氧模型第43页
         ·~3H-TdR参入法检测PASMC DNA合成第43页
         ·DNA含量测定第43-44页
         ·影响PASMC ~3H-TdR参入的药物干预实验第44-45页
       ·培养PASMC透射电镜标本制备第45页
       ·新生小牛、成年牛PAEC培养、缺氧实验、缺氧EC条件培养液(HECCM)对培养PASMC ~3H-TdR参入的影响第45页
         ·PAEC体外培养第45页
         ·缺氧实验第45页
         ·HECCM的收集及对培养PASMC ~3H-TdR参入的影响第45页
       ·利用核酸分子原位杂交技术检测培养PASHC内原癌基因mRNA表达第45-47页
         ·平滑肌(SM)α-actin及非肌性(NM)β-actin基因质粒转化、扩增第45-46页
         ·光敏生物素直接标记SM α-actin和NM β-actin目的基因质粒DNA第46-47页
         ·培养PASMC原位杂交第47页
       ·培养PASMC总RNA的c-myc斑点及Northern膜印迹杂交第47-49页
         ·细胞总RNA的提取第47页
         ·c-myc斑点杂交第47-48页
         ·Northern膜印迹杂交第48页
         ·用随机寡核苷酸引物合成均一标记的c-myo cDNA探针第48页
         ·分子杂交及放射自显影第48-49页
     ·数据处理第49-50页
4.结果第50-73页
     ·IAA肌化与肺循环血流动力学变化趋势的关系第50-52页
     ·肺动脉中膜SMC表型及肺动脉壁羟脯氨酸含量变化与PAP的关系第52-53页
     ·肺动脉EC结构及Ach内皮依赖性舒张反应的动态变化第53-56页
     ·缺氧时培养PAEC的变化及PAEC对SMC增殖的影响第56-59页
     ·缺氧对培养PASMC的直接影响第59-72页
       ·缺氧对PASMC增殖的影响第59-63页
       ·缺氧对PASMC表型的影响第63-65页
       ·缺氧对施用了细胞信息传导途径干预药物后PASMC ~3H-TdR参入的影响第65-67页
         ·异搏定、H_7第65页
         ·PMA、EGF第65-67页
         ·EGF+PMA、异搏定+PMA复合作用第67页
       ·缺氧对PASMC c-myc mRNA表达的影响第67-72页
     ·-3对PASMC ~3H-TdR参入的影响第72-73页
附:1.电镜照片插图第73-84页
 2.照片说明第82-84页
5.讨论第84-89页
     ·PASMC的结构变化在缺氧性肺动脉高压发生、发展中的作用第84-85页
     ·缺氧时PASMC结构变化的原因第85-89页
       ·PAEC结构和功能的变化对PASMC的影响第85-86页
       ·缺氧对SMC结构变化的直接影响及其作用途径初探第86-89页
6.总结第89-90页
7.参考文献第90-98页
8.英文摘要第98-102页
已发表和待发表的研究论文及论文摘要第102-105页
致谢第105页

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