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羟基红花黄色素A动态积累规律研究及相关基因的克隆

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
英文缩略词表第10-12页
一、前言第12-15页
二、红花羟基红花黄色素A 动态积累规律研究第15-22页
 (一) 试剂及仪器第15页
 (二) 标准曲线的的建立第15-16页
  1、实验材料第15页
  2、色谱条件第15页
  3、实验方法及色谱系统适用性考察第15-16页
 (三) 实验结果与分析第16-18页
  1、羟基红花黄色素A 结构第16-17页
  2、羟基红花黄色素A 标准曲线的建立第17-18页
 (四) 红花HSYA 动态积累研究第18-20页
  1、实验材料第18页
  2、实验方法第18页
  3、实验结果与分析第18-20页
 (五) F_2代红花HSYA 含量测定第20-22页
  1、实验材料第20页
  2、实验方法第20页
  3、实验结果与分析第20-22页
三、红花cDNA-AFLP 反应体系的建立及与红花品质相关分子标记的筛选第22-37页
 (一) 常用生化试剂及酶第22页
 (二) 主要试剂的配制第22-24页
 (三) 主要实验仪器第24-25页
 (四) 总RNA 的提取第25-26页
  1、实验材料第25页
  2、实验方法第25-26页
  3、RNA 质量与浓度检测第26页
 (五) 双链cDNA 的合成与精制第26-28页
  1、单链cDNA 的合成第26-27页
  2、双链cDNA 的合成第27页
  3、双链cDNA 的纯化第27-28页
 (六) 红花cDNA-AFLP 标记的反应体系的建立第28-31页
  1、实验材料第29页
  2、主要生化试剂及仪器第29页
  3、实验方法第29-31页
 (七) cDNA-AFLP 结合BSA 方法筛选与红花品质相关分子标记第31-37页
  1、植物材料第32页
  2、试剂与仪器第32页
  3、实验方法第32-37页
四、特异性片段的单株验证、遗传距离的计算及克隆基因全长第37-41页
 (一) 特异性片段的单株验证第37页
 (二) 表达差异片段遗传距离的计算第37页
 (三) RT-PCR 分析表达差异片段第37-38页
  1、引物设计第37页
  2、总RNA 提取第37页
  3、第一链cDNA 的合成第37-38页
  4、RT-PCR 扩增反应第38页
 (四) cDNA 末端快速扩增克隆表达特异基因第38-39页
 (五) 生物信息学分析第39-41页
五、结果与分析第41-53页
 (一) 总RNA 的提取,双链cDNA 的合成第41-42页
  1、总RNA 的提取第41页
  2、双链cDNA 的合成第41-42页
 (二) cDNA-AFLP 反应体系的建立第42-43页
  1、限制性酶切与接头连接第42页
  2、片段的预扩增第42-43页
  3、片段的选择性扩增第43页
 (三) cDNA-AFLP 筛选红花品质相关表达差异片段第43-53页
  1、有无HSYA 池之间AFLP 法筛选表达差异片段结果第43-45页
  2、表达差异片段的单株验证及遗传距离的计算第45-48页
  3、RT-PCR 分析表达差异片段第48-49页
  4、cDNA 末端快速扩增克隆表达特异基因第49-50页
  5、生物信息学分析第50-53页
六、结论与讨论第53-55页
附录第55-64页
文献综述第64-74页
参考文献第74-80页
致谢第80页

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