摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略词表 | 第10-12页 |
一、前言 | 第12-15页 |
二、红花羟基红花黄色素A 动态积累规律研究 | 第15-22页 |
(一) 试剂及仪器 | 第15页 |
(二) 标准曲线的的建立 | 第15-16页 |
1、实验材料 | 第15页 |
2、色谱条件 | 第15页 |
3、实验方法及色谱系统适用性考察 | 第15-16页 |
(三) 实验结果与分析 | 第16-18页 |
1、羟基红花黄色素A 结构 | 第16-17页 |
2、羟基红花黄色素A 标准曲线的建立 | 第17-18页 |
(四) 红花HSYA 动态积累研究 | 第18-20页 |
1、实验材料 | 第18页 |
2、实验方法 | 第18页 |
3、实验结果与分析 | 第18-20页 |
(五) F_2代红花HSYA 含量测定 | 第20-22页 |
1、实验材料 | 第20页 |
2、实验方法 | 第20页 |
3、实验结果与分析 | 第20-22页 |
三、红花cDNA-AFLP 反应体系的建立及与红花品质相关分子标记的筛选 | 第22-37页 |
(一) 常用生化试剂及酶 | 第22页 |
(二) 主要试剂的配制 | 第22-24页 |
(三) 主要实验仪器 | 第24-25页 |
(四) 总RNA 的提取 | 第25-26页 |
1、实验材料 | 第25页 |
2、实验方法 | 第25-26页 |
3、RNA 质量与浓度检测 | 第26页 |
(五) 双链cDNA 的合成与精制 | 第26-28页 |
1、单链cDNA 的合成 | 第26-27页 |
2、双链cDNA 的合成 | 第27页 |
3、双链cDNA 的纯化 | 第27-28页 |
(六) 红花cDNA-AFLP 标记的反应体系的建立 | 第28-31页 |
1、实验材料 | 第29页 |
2、主要生化试剂及仪器 | 第29页 |
3、实验方法 | 第29-31页 |
(七) cDNA-AFLP 结合BSA 方法筛选与红花品质相关分子标记 | 第31-37页 |
1、植物材料 | 第32页 |
2、试剂与仪器 | 第32页 |
3、实验方法 | 第32-37页 |
四、特异性片段的单株验证、遗传距离的计算及克隆基因全长 | 第37-41页 |
(一) 特异性片段的单株验证 | 第37页 |
(二) 表达差异片段遗传距离的计算 | 第37页 |
(三) RT-PCR 分析表达差异片段 | 第37-38页 |
1、引物设计 | 第37页 |
2、总RNA 提取 | 第37页 |
3、第一链cDNA 的合成 | 第37-38页 |
4、RT-PCR 扩增反应 | 第38页 |
(四) cDNA 末端快速扩增克隆表达特异基因 | 第38-39页 |
(五) 生物信息学分析 | 第39-41页 |
五、结果与分析 | 第41-53页 |
(一) 总RNA 的提取,双链cDNA 的合成 | 第41-42页 |
1、总RNA 的提取 | 第41页 |
2、双链cDNA 的合成 | 第41-42页 |
(二) cDNA-AFLP 反应体系的建立 | 第42-43页 |
1、限制性酶切与接头连接 | 第42页 |
2、片段的预扩增 | 第42-43页 |
3、片段的选择性扩增 | 第43页 |
(三) cDNA-AFLP 筛选红花品质相关表达差异片段 | 第43-53页 |
1、有无HSYA 池之间AFLP 法筛选表达差异片段结果 | 第43-45页 |
2、表达差异片段的单株验证及遗传距离的计算 | 第45-48页 |
3、RT-PCR 分析表达差异片段 | 第48-49页 |
4、cDNA 末端快速扩增克隆表达特异基因 | 第49-50页 |
5、生物信息学分析 | 第50-53页 |
六、结论与讨论 | 第53-55页 |
附录 | 第55-64页 |
文献综述 | 第64-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
致谢 | 第80页 |