| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-33页 |
| ·天门冬氨酸与β-丙氨酸及天门冬氨酸α-脱羧酶简介 | 第12-15页 |
| ·天门冬氨酸简介 | 第12-13页 |
| ·β-丙氨酸简介 | 第13-14页 |
| ·天门冬氨酸α-脱羧酶简介 | 第14-15页 |
| ·酶的提取与纯化 | 第15-18页 |
| ·酶的提取 | 第15-16页 |
| ·水溶液提取法 | 第15页 |
| ·有机溶剂提取法 | 第15-16页 |
| ·提取液的pH值和盐浓度的选择 | 第16页 |
| ·酶的纯化 | 第16-18页 |
| ·根据蛋白质溶解度不同的分离方法 | 第16-17页 |
| ·蛋白质的盐析 | 第16-17页 |
| ·等电点沉淀法 | 第17页 |
| ·低温有机溶剂沉淀法 | 第17页 |
| ·根据蛋白质分子大小不同的分离方法 | 第17页 |
| ·透析与超滤 | 第17页 |
| ·凝胶过滤法 | 第17页 |
| ·根据蛋白质带电性质进行分离 | 第17-18页 |
| ·电泳法 | 第18页 |
| ·离子交换层析法 | 第18页 |
| ·根据配体特异性的分离方法—亲和色谱法 | 第18页 |
| ·固定化技术 | 第18-28页 |
| ·吸附法 | 第19-20页 |
| ·包埋法 | 第20页 |
| ·凝胶包埋法 | 第20页 |
| ·微囊化包埋法 | 第20页 |
| ·共价偶联法 | 第20-21页 |
| ·交联法 | 第21-22页 |
| ·结晶法 | 第22页 |
| ·新型酶固定化方法 | 第22页 |
| ·固定化细胞载体及其影响条件 | 第22-25页 |
| ·天然高分子载体 | 第22-23页 |
| ·海藻酸盐载体 | 第22-23页 |
| ·聚乙烯醇、卡拉胶、明胶等载体 | 第23页 |
| ·合成高分子载体 | 第23-24页 |
| ·无机载体 | 第24-25页 |
| ·酶的定向固定化及多酶共固技术 | 第25-26页 |
| ·改性载体及新型载体固定化酶 | 第26-27页 |
| ·改性载体固定化酶 | 第26页 |
| ·新型载体固定化酶 | 第26-27页 |
| ·固定化方法与载体的选择 | 第27页 |
| ·固定化细胞 | 第27-28页 |
| ·固定化细胞的优点 | 第27页 |
| ·固定化酶(细胞)的性质 | 第27-28页 |
| ·选题背景和目的 | 第28页 |
| 参考文献 | 第28-33页 |
| 第二章 天门冬氨酸α-脱羧酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第33-50页 |
| ·材料与方法 | 第33-40页 |
| ·菌种来源 | 第33页 |
| ·药品与试剂的配制 | 第33-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·培养基及培养条件 | 第35页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第35页 |
| ·一级种子培养基及培养条件 | 第35页 |
| ·二级发酵培养基及培养条件 | 第35页 |
| ·液相色谱条件 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-40页 |
| ·用整细胞研究粗酶的酶学性质 | 第36-37页 |
| ·酶的耐受温度 | 第36页 |
| ·酶的耐受pH | 第36页 |
| ·酶的最适温度 | 第36页 |
| ·酶的最适pH | 第36页 |
| ·PanD酶活测定 | 第36-37页 |
| ·相关计算公式 | 第37页 |
| ·细胞破壁条件研究 | 第37-38页 |
| ·细胞破壁条件研究1 | 第37页 |
| ·细胞破壁条件研究2 | 第37-38页 |
| ·酶提取介质的选择 | 第38-39页 |
| ·酶的纯化 | 第39页 |
| ·酶的盐析纯化 | 第39页 |
| ·盐析 | 第39页 |
| ·脱盐 | 第39页 |
| ·酶的离子交换纯化 | 第39页 |
| ·酶的凝胶层析纯化 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-48页 |
| ·发酵液直接转化液相结果 | 第40-41页 |
| ·酶的温度耐受性结果 | 第41-42页 |
| ·酶的pH(酸性)耐受性结果 | 第42页 |
| ·酶的最适温度结果 | 第42-43页 |
| ·酶的最适pH结果 | 第43页 |
| ·细胞的破壁条件 | 第43-45页 |
| ·酶提取介质的选取 | 第45-46页 |
| ·酶的FPLC脱盐 | 第46页 |
| ·酶的离子交换纯化 | 第46页 |
| ·纯化后酶活力比较 | 第46-48页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第三章 天门冬氨酸α-脱羧酶细胞的固定化研究 | 第50-60页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·菌种来源 | 第51页 |
| ·斜面培养基及培养条件 | 第51页 |
| ·摇瓶培养基及培养条件 | 第51页 |
| ·一级种子培养基及培养条件 | 第51页 |
| ·二级发酵培养基及培养条件 | 第51页 |
| ·主要药品与试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·固定化方法 | 第51-52页 |
| ·固定化交联时间实验 | 第52页 |
| ·固定化交联温度实验 | 第52页 |
| ·固定化交联pH实验 | 第52页 |
| ·固定化细胞重复转化实验 | 第52页 |
| ·固定化细胞温度耐受性实验 | 第52-53页 |
| ·固定化细胞pH耐受性实验 | 第53页 |
| ·固定化细胞最适温度实验 | 第53页 |
| ·固定化细胞最适pH实验 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-59页 |
| ·固定化交联时间研究结果 | 第53-54页 |
| ·固定化交联温度结果 | 第54-55页 |
| ·固定化交联pH结果 | 第55页 |
| ·固定化细胞多次转化结果 | 第55-56页 |
| ·固定化细胞温度耐受性结果 | 第56-57页 |
| ·固定化细胞pH耐受性结果 | 第57页 |
| ·固定化细胞最适温度结果 | 第57-58页 |
| ·固定化细胞最适pH结果 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 第四章 酶法生产β-丙氨酸工艺条件的研究 | 第60-70页 |
| ·材料与方法 | 第60-64页 |
| ·菌种来源 | 第60页 |
| ·药品与试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·培养基 | 第60-61页 |
| ·斜面培养基 | 第60-61页 |
| ·种子培养基 | 第61页 |
| ·发酵培养基 | 第61页 |
| ·转化液 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-64页 |
| ·菌种斜面活化 | 第61页 |
| ·种子培养 | 第61页 |
| ·发酵方法 | 第61页 |
| ·转化 | 第61页 |
| ·样品衍生 | 第61-62页 |
| ·Asp、β-alanine标准曲线的配制 | 第62页 |
| ·发酵条件优化 | 第62-63页 |
| ·转化条件优化 | 第63页 |
| ·转化时间(短)对转化反应的影响 | 第63页 |
| ·转化时间(长)对转化反应的影响 | 第63-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-68页 |
| ·Asp液相图谱及标准曲线 | 第64页 |
| ·β-alanine液相图谱及标准曲线 | 第64-65页 |
| ·发酵条件优化结果 | 第65-66页 |
| ·转化条件优化结果 | 第66-67页 |
| ·转化时间(短)对酶活的影响结果 | 第67页 |
| ·转化时间(长)对酶活的影响结果 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 第五章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第73页 |