| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-45页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·糖尿病的病理生理概括 | 第15-17页 |
| ·Ⅰ型糖尿病 | 第15-16页 |
| ·Ⅱ型糖尿病 | 第16-17页 |
| ·胰岛素信号通路及GLUT4囊泡转运 | 第17-34页 |
| ·GLUT4的结构、定位及转运模型 | 第17-23页 |
| ·胰岛素信号通路调控GLUT4囊泡转运 | 第23-29页 |
| ·细胞骨架对GLUT4囊泡运动的调控 | 第29-34页 |
| ·主要研究技术 | 第34-41页 |
| ·荧光蛋白技术 | 第35-36页 |
| ·全内反射荧光显微技术 | 第36-41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| ·本课题的研究内容、目的与意义 | 第43-45页 |
| ·本课题的研究内容 | 第43页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第43-45页 |
| 第二章 大鼠原代脂肪细胞的培养及转染模型的建立 | 第45-63页 |
| ·前言 | 第45-46页 |
| ·材料与方法 | 第46-53页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的培养 | 第48-49页 |
| ·脂肪细胞的鉴定(Hoechst 33324、PI及油红O染色) | 第49页 |
| ·HA-GLUT4-GFP质粒的扩增、抽提及鉴定 | 第49-52页 |
| ·EGFP-IRAP质粒的扩增、抽提及鉴定 | 第52-53页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的转染 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-59页 |
| ·大鼠附睾脂肪组织的形态学特征 | 第53-54页 |
| ·单个脂肪细胞形态学特征 | 第54-55页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的鉴定 | 第55页 |
| ·HA-GLUT4-GFP质粒的鉴定及分析 | 第55-57页 |
| ·EGFP-IRAP质粒的鉴定及分析 | 第57-58页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的电转染 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-63页 |
| ·酶的选择 | 第59页 |
| ·实验操作 | 第59-60页 |
| ·细胞的转染 | 第60页 |
| ·实验系统的稳定 | 第60-63页 |
| 第三章 胰岛素对原代脂肪细胞中GLUT4囊泡转运的影响 | 第63-83页 |
| ·前言 | 第63-64页 |
| ·材料和方法 | 第64-70页 |
| ·实验材料 | 第64-66页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的培养及转染 | 第66-67页 |
| ·GLUT4蛋白的间接免疫荧光染色 | 第67-68页 |
| ·全内反射荧光显微(TIRFM)技术 | 第68页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的TIRFM荧光成像 | 第68-69页 |
| ·TIRF图像处理技术 | 第69-70页 |
| ·结果 | 第70-80页 |
| ·胰岛素对脂肪细胞中内源性的GLUT4转运的影响 | 第70-71页 |
| ·胰岛素对脂肪细胞中GFP标记的GLUT4转运的影响 | 第71-73页 |
| ·单个GLUT4囊泡的TIRFM成像 | 第73-76页 |
| ·胰岛素对单个GLUT4囊泡运动的调节 | 第76-79页 |
| ·GLUT4囊泡与细胞膜的融合 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-83页 |
| 第四章 细胞骨架对原代脂肪细胞中GLUT4囊泡转运的影响 | 第83-95页 |
| ·前言 | 第83-84页 |
| ·材料和方法 | 第84-86页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的培养及转染 | 第84-85页 |
| ·微管及微丝蛋白的间接免疫荧光染色 | 第85页 |
| ·全内反射荧光显微(TIRFM)技术 | 第85-86页 |
| ·图像处理技术 | 第86页 |
| ·结果 | 第86-91页 |
| ·GLUT4囊泡的沿同一轨迹长距离运动 | 第86-87页 |
| ·GLUT4囊泡的长距离运动依赖于微管细胞骨架 | 第87-90页 |
| ·GLUT4囊泡沿微管的双向运输 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-95页 |
| 第五章 大鼠原代脂肪细胞中EGFP-IRAP的TIRFM成像 | 第95-105页 |
| ·前言 | 第95-96页 |
| ·材料和方法 | 第96-97页 |
| ·实验材料 | 第96页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的培养及转染 | 第96页 |
| ·大鼠原代脂肪细胞的间接免疫荧光染色 | 第96页 |
| ·全内反射荧光显微(TIRFM)技术及Confocal成像 | 第96-97页 |
| ·图像处理技术 | 第97页 |
| ·结果 | 第97-102页 |
| ·EGFP-IRAP在大鼠脂肪细胞中的分布 | 第97-98页 |
| ·胰岛素对EGFP-IRAP转运的时间调节性研究 | 第98-100页 |
| ·EGFP-IRAP的TIRFM成像 | 第100-102页 |
| ·讨论 | 第102-105页 |
| 第六章 C2C12细胞中GLUT4囊泡转运的TIRFM研究 | 第105-115页 |
| ·绪论 | 第105-106页 |
| ·材料和方法 | 第106-109页 |
| ·实验材料 | 第106页 |
| ·C2C12细胞的培养 | 第106-107页 |
| ·C2C12细胞的间接免疫荧光染色 | 第107-108页 |
| ·C2C12细胞的脂质体转染 | 第108页 |
| ·全内反射荧光显微(TIRFM)技术 | 第108页 |
| ·激光共聚焦显微成像 | 第108-109页 |
| ·图像处理技术 | 第109页 |
| ·结果 | 第109-113页 |
| ·C2C12细胞中GLUT4及IRAP的定位 | 第109-110页 |
| ·C2C12细胞中GLUT4及IRAP蛋白的TIRFM成像 | 第110-112页 |
| ·微管细胞骨架对C2C12细胞中GLUT4囊泡运动的影响 | 第112-113页 |
| ·讨论 | 第113-115页 |
| 第七章 总结与展望 | 第115-119页 |
| ·总结 | 第115-118页 |
| ·展望 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-145页 |
| 博士期间相关论文发表情况 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147页 |
