| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
| 1. 布鲁氏菌病概述 | 第11-12页 |
| 2. 布鲁氏菌病原学 | 第12-13页 |
| 3. 流行病学 | 第13-14页 |
| ·传染源 | 第13页 |
| ·传播途径 | 第13-14页 |
| ·易感动物 | 第14页 |
| ·流行特征 | 第14页 |
| 4. 发病机理与病理变化 | 第14-15页 |
| 5. 临床表现 | 第15-16页 |
| 6. 诊断方法 | 第16-23页 |
| ·流行病学资料 | 第16页 |
| ·临床表现 | 第16页 |
| ·实验室检查 | 第16-23页 |
| ·常规病原学检测方法 | 第16-17页 |
| ·生化试验鉴定种型 | 第17-18页 |
| ·免疫学检测方法 | 第18-20页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第20-23页 |
| 7. 相关因子 | 第23-25页 |
| ·四型分泌系统基因 | 第23-24页 |
| ·布鲁氏菌赤藓醇代谢基因(Ery) | 第24-25页 |
| 8. 预防 | 第25-27页 |
| ·管理传染源 | 第25页 |
| ·切断传播途径 | 第25页 |
| ·主动免疫接种 | 第25-26页 |
| ·培育健康幼畜 | 第26-27页 |
| 第二部分 研究内容 | 第27-56页 |
| 第一章 布鲁氏菌VirB8-PCR 方法的建立与应用 | 第27-38页 |
| 1. 材料 | 第27-29页 |
| ·菌株及DNA | 第27-28页 |
| ·实验设备与仪器 | 第28页 |
| ·实验试剂 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·PCR 预混液成分 | 第29页 |
| 2. 方法 | 第29-31页 |
| ·模板制备 | 第29页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2 法) | 第29-30页 |
| ·PCR 检测方法的建立和检测条件的优化 | 第30页 |
| ·PCR 样品检测 | 第30页 |
| ·PCR 试剂盒特性测定 | 第30页 |
| ·预混液保存期试验 | 第30页 |
| ·VirB8-PCR 的特异性评估 | 第30-31页 |
| ·VirB8-PCR 的应用 | 第31页 |
| 3. 结果 | 第31-37页 |
| ·PCR 检测方法的建立和检测条件的优化 | 第31-32页 |
| ·VirB8-PCR 特性检验结果 | 第32-33页 |
| ·PCR 预混液的保存期 | 第33-34页 |
| ·VirB8-PCR 方法的特异性评估 | 第34-35页 |
| ·序列分析 | 第34页 |
| ·进化关系 | 第34-35页 |
| ·碱基和氨基酸变化 | 第35页 |
| ·VirB8-PCR 的应用 | 第35-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-38页 |
| 第二章 布鲁氏菌的分离鉴定 | 第38-50页 |
| 1 流行病学调查 | 第38-39页 |
| ·养殖场情况 | 第38-39页 |
| ·发病情况 | 第39页 |
| ·临床症状 | 第39页 |
| 2 试验材料 | 第39页 |
| ·被检样品 | 第39页 |
| ·诊断试剂 | 第39页 |
| 3 方法 | 第39-45页 |
| ·血清学检测 | 第39-41页 |
| ·分离培养 | 第41页 |
| ·染色鉴定 | 第41-43页 |
| ·生化试验 | 第43页 |
| ·PCR 检测 | 第43-44页 |
| ·试验流程图 | 第44-45页 |
| 4 结果 | 第45-48页 |
| ·养殖场一 | 第45页 |
| ·养殖场二 | 第45页 |
| ·养殖场三 | 第45-46页 |
| ·养殖场四 | 第46-48页 |
| 5 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 三株布鲁氏菌19 疫苗株赤藓醇代谢基因的克隆与序列分析 | 第50-56页 |
| 引言 | 第50-51页 |
| 1. 材料与方法 | 第51-52页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-52页 |
| ·细菌的复苏和培养 | 第51页 |
| ·用试剂盒提取DNA | 第51页 |
| ·引物设计 | 第51-52页 |
| ·PCR 反应体系 | 第52页 |
| ·PCR 反应程序 | 第52页 |
| ·PCR 产物的克隆与鉴定 | 第52页 |
| ·序列的比较和分析 | 第52页 |
| 2. 结果 | 第52-54页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第52-53页 |
| ·序列分析 | 第53页 |
| ·进化关系 | 第53页 |
| ·碱基变化 | 第53-54页 |
| ·氨基酸变化 | 第54页 |
| 3. 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录A 溶液与试剂配方 | 第62-64页 |
| 附录 B 缩略语表 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |