摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 引言 | 第8-19页 |
·杆状病毒简介 | 第8页 |
·杆状病毒表达载体系统的特点 | 第8-9页 |
·Bac-to-Bac 表达系统 | 第9-10页 |
·昆虫杆状病毒表达载体系统的研究及应用 | 第10-15页 |
·在基础研究领域中的应用 | 第11页 |
·在医药、检疫领域中的应用 | 第11页 |
·昆虫杆状病毒载体重组亚单位疫苗 | 第11-12页 |
·非复制性病毒载体疫苗 | 第12页 |
·基因治疗载体方面 | 第12-13页 |
·用于体外测定新药和抗病毒复合物的效果 | 第13页 |
·稳定细胞系的构建及基因的长效表达 | 第13-14页 |
·重组杆状病毒作为哺乳动物细胞基因递送载体 | 第14-15页 |
·杆状病毒基因启动子 | 第15-19页 |
·启动子的概念 | 第15页 |
·杆状病毒表达系统所用启动子的类型 | 第15-16页 |
·病毒启动子调控机制 | 第16-17页 |
·启动子和增强子作用机制 | 第17页 |
·启动子的研究意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-25页 |
·主要仪器和试剂 | 第19页 |
·菌株、质粒和细胞 | 第19页 |
·不同启动子 | 第19页 |
·重组转移载体的构建及鉴定 | 第19-22页 |
·目的片段的获得 | 第19-20页 |
·目的片段与载体的连接 | 第20-21页 |
·连接产物的转化 | 第21页 |
·重组质粒DNA 的小量制备 | 第21-22页 |
·重组质粒的限制性内切酶分析 | 第22页 |
·重组杆粒的获得及鉴定 | 第22-23页 |
·重组杆粒的获得 | 第22页 |
·重组杆粒的PCR 鉴定 | 第22-23页 |
·重组杆状病毒的获得与鉴定 | 第23-25页 |
·细胞准备 | 第23页 |
·昆虫细胞的转染 | 第23-24页 |
·重组杆状病毒DNA 的提取及鉴定 | 第24页 |
·重组杆状病毒的毒力扩增与保存 | 第24页 |
·重组杆状病毒的滴度测定(空斑分析法) | 第24-25页 |
·利用流式细胞仪检测报告基因EGFP 的表达 | 第25页 |
3 结果 | 第25-36页 |
·目的片段的获得 | 第25页 |
·重组转移载体的获得及酶切鉴定 | 第25-28页 |
·重组杆粒的PCR 鉴定结果 | 第28-29页 |
·重组杆状病毒的PCR 鉴定 | 第29页 |
·含有不同启动子的重组杆状病毒在Sf9 细胞中的活性 | 第29-30页 |
·不同启动子在昆虫细胞中的活性 | 第30-33页 |
·不同感染复数与表达效率的关系 | 第33-34页 |
·hr1对ETL启动子的增强作用 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
·重组杆状病毒在基因治疗及非复制性病毒载体疫苗研制中的前景 | 第36页 |
·杆状病毒的复制及表达调控 | 第36-37页 |
·不同启动子在昆虫杆状病毒表达系统中的活性比较 | 第37页 |
·病毒感染复数(MOI)对外源基因表达效率的影响 | 第37页 |
·杆状病毒同源重复区(hr1)序列对外源基因表达效率的影响 | 第37-39页 |
5 结论 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
附录 | 第49-54页 |
作者简历 | 第54页 |