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奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌凝聚因子A A区基因的克隆表达

摘要第1-3页
Abstract第3-7页
1 引言第7-18页
   ·奶牛乳腺炎的分类第7-8页
     ·传染性奶牛乳腺炎第7-8页
     ·环境性奶牛乳腺炎第8页
     ·凝固酶阴性葡萄球菌感染的奶牛乳腺炎第8页
   ·奶牛乳腺炎的诊断与检测第8-10页
     ·临床型乳腺炎第8-9页
     ·隐性乳腺炎第9-10页
     ·乳汁病原微生物检查第10页
   ·奶牛金黄色葡萄球菌性乳腺炎第10-18页
     ·与金黄色葡萄球菌性奶牛乳腺炎相关的因素第11-12页
     ·金黄色葡萄球菌致病机理第12页
     ·金黄色葡萄球菌性奶牛乳腺炎的防治第12-17页
     ·凝聚因子A(clumping factor A, ClfA)简介第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18页
2 实验一 凝聚因子 A A 区基因的克隆第18-32页
   ·实验材料第18-21页
     ·载体及菌种第18页
     ·试剂与工具酶第18页
     ·试验主要仪器第18-19页
     ·培养基与试剂按文献介绍的方法配制第19-21页
   ·实验方法第21-26页
     ·引物设计第22页
     ·目的片段的扩增及重组载体的构建第22-26页
   ·实验结果第26-31页
     ·目的基因的扩增与克隆第26-27页
     ·重组质粒双酶切鉴定第27-28页
     ·序列测定及分析第28-31页
     ·抗原位点分析第31页
   ·讨论第31-32页
     ·Mg~(2+)浓度对 PCR 扩增的影响第31页
     ·序列测定及分析第31-32页
     ·抗原位点分析第32页
3 实验二 凝聚因子 A A 区基因的表达及其检测方法的初步建立第32-47页
   ·实验材料第32-35页
     ·载体及菌种第32-33页
     ·试剂与工具酶第33页
     ·试验主要仪器第33页
     ·培养基与试剂按文献介绍的方法配制第33-35页
     ·实验动物第35页
   ·实验方法第35-43页
     ·重组表达质粒的构建第36-38页
     ·融合蛋白的表达及分析第38-40页
     ·表达蛋白的纯化及分析第40页
     ·目的蛋白及其抗体的检测第40-43页
   ·实验结果第43-46页
     ·重组表达载体双酶切鉴定第43-44页
     ·目的基因表达和SDS-PAGE 分析第44页
     ·表达产物的可溶性分析第44页
     ·表达产物的检测与分析第44-45页
     ·抗体抗黏附能力检测结果第45-46页
   ·讨论第46-47页
     ·目的蛋白的检测第46页
     ·试管凝集试验第46页
     ·吞噬调理作用第46-47页
4 总体讨论第47-48页
   ·金黄色葡萄球菌特性第47页
   ·Boost第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-55页
作者简介第55页

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