中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
上篇 文献综述 | 第10-31页 |
第一章 小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)的概况 | 第11-19页 |
1 小麦赤霉病病源、病症和防治 | 第11-12页 |
2 禾谷镰刀菌(Gibberella zeae)致病基因的研究概述 | 第12-14页 |
·赤霉病菌的遗传转化 | 第12-13页 |
·小麦赤霉病菌功能基因的研究 | 第13-14页 |
参考文献 | 第14-19页 |
第二章 异三聚体G蛋白与SNARE蛋白VAM7在真菌生长发育与致病中的功能研究 | 第19-31页 |
1 G蛋白在真菌中的相关研究 | 第19-22页 |
·G蛋白的结构及分类 | 第19页 |
·异三聚体G蛋白在真菌生长发育与致病中的功能研究进展 | 第19-22页 |
·卵菌的G蛋白研究 | 第22页 |
2 SNARE蛋白及VAM7基因的研究 | 第22-26页 |
·SNARE蛋白的结构 | 第23-24页 |
·VAM7在真核细胞液泡融合中的作用及真菌中的研究 | 第24-26页 |
参考文献 | 第26-31页 |
下篇 研究内容 | 第31-87页 |
第一章 小麦赤霉病菌G蛋白β和γ亚基功能分析 | 第33-59页 |
1 材料与方法 | 第35-41页 |
·供试菌株及培养条件 | 第35-36页 |
·赤霉病菌DNA、RNA提取和cDNA合成 | 第36页 |
·GzG1蛋白序列分析 | 第36页 |
·Southern杂交 | 第36-37页 |
·赤霉病菌基因敲除载体构建和赤霉病菌原生质体转化 | 第37页 |
·赤霉病菌转化子验证 | 第37-38页 |
·小麦病菌敲除转化子表型分析 | 第38页 |
·突变体DON和3-ADON毒素产量的测定 | 第38-39页 |
·突变体的胞外多聚半乳糖醛酸酶的活性分析 | 第39-40页 |
·突变体突变体的致病性分析 | 第40页 |
·突变体的基因互补实验 | 第40-41页 |
2 结果 | 第41-50页 |
·GzG1编码小麦赤霉病菌G蛋白β亚基 | 第41-42页 |
·赤霉病菌GzB1和GzG1敲除转化子的获得 | 第42-43页 |
·小麦赤霉病菌ΔGzB1和ΔGzG1突变体菌丝生长速率和色素形成能力下降,分生孢子产量发生改变 | 第43-46页 |
·GzB1和GzG1在孢子萌发中调控孢子的极性 | 第46-47页 |
·ΔGzB1和ΔGzG1突变体产生DON、3-ADON毒素的能力下降 | 第47-48页 |
·小麦赤霉病菌ΔGzB1胞外多聚半乳糖醛酸酶活性丧失,两个突变体在创伤番茄果实上不能定殖 | 第48-49页 |
·ΔGzB1和ΔGzG1突变体丧失了在小麦穗部的致病性 | 第49-50页 |
·野生型基因可以互补突变体多方面的缺陷 | 第50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
第二章 小麦赤霉病菌SNARE蛋白VAM7功能分析 | 第59-87页 |
1 材料与方法 | 第61-65页 |
·供试菌株及培养条件 | 第61页 |
·赤霉病菌DNA、RNA提取和cDNA合成 | 第61页 |
·GzVAM7蛋白序列分析 | 第61页 |
·Southern杂交 | 第61页 |
·赤霉病菌基因敲除载体构建和原生质体转化 | 第61-62页 |
·赤霉病菌转化子验证 | 第62-63页 |
·小麦赤霉病菌敲除转化子菌丝生长表型分析 | 第63页 |
·突变体产孢量测定 | 第63页 |
·突变体菌丝干重的测定 | 第63-64页 |
·FM4-64对突变体胞吞作用的观察分析 | 第64页 |
·BFA预处理观察突变体菌丝胞吞作用 | 第64页 |
·突变体的孢子萌发情况 | 第64页 |
·突变体DON和3-ADON毒素产量的测定 | 第64页 |
·突变体的胞外多聚半乳糖醛酸酶的活性分析 | 第64页 |
·突变体的致病性分析 | 第64页 |
·突变体的基因互补实验 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-80页 |
·赤霉病菌GzVAM7编码一个SNARE蛋白 | 第65-67页 |
·GzVAM7敲除突变体的获得 | 第67-69页 |
·小麦赤霉病菌中GzVAM7突变体影响菌落形态、菌丝的分枝及生物量,在分生孢子的形成过程中起重要的调控作用 | 第69-71页 |
·GzVAM7调控小麦赤霉病菌分生孢子萌发的极性 | 第71-72页 |
·GzVAM7基因敲除突变体在液泡功能和结构上存在缺陷 | 第72-75页 |
·GzVAM7突变体胞吞作用受阻,无顶体结构形成 | 第75-77页 |
·GzVAM7突变导致小麦赤霉病菌DON及3-ADON毒素产生能力降低 | 第77-78页 |
·小麦赤霉病菌ΔGzVAM7突变体胞外多聚半乳糖醛酸酶活性没有变化,突变体在番茄果实上的定殖能力丧失 | 第78-79页 |
·ΔGzVAM7突变体丧失在小麦穗部的致病能力 | 第79页 |
·赤霉病菌ΔGzVAM7突变体的互补实验 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-87页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第87-89页 |
致谢 | 第89页 |