| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| ·植物病原细菌毒性调控机制 | 第12-14页 |
| ·双组份调控系统（two-component signal transduction systems，TCSTS） | 第12页 |
| ·单组份系统（One-component system） | 第12页 |
| ·Crp-Fnr 家族蛋白 | 第12-13页 |
| ·细菌群体感应系统 | 第13页 |
| ·黄单胞属细菌毒性调控网络 | 第13-14页 |
| ·细菌第二信使环鸟苷二磷酸 c-di-GMP | 第14-17页 |
| ·c-di-GMP 的代谢 | 第14-15页 |
| ·c-di-GMP 代谢的调控 | 第15-16页 |
| ·c-di-GMP 效应因子 | 第16页 |
| ·c-di-GMP 信号目标及其控制的细胞功能 | 第16-17页 |
| ·水稻白叶枯病和黄单胞细菌水稻致病变种（Xoo） | 第17页 |
| ·本研究的目的意义和技术路线 | 第17-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 水稻白叶枯病菌clpxoo 基因的分子克隆和功能分析 | 第19-34页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·生化试剂 | 第19页 |
| ·培养基和菌株培养条件 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-25页 |
| ·Xoo 基因组DNA 的制备 | 第20-21页 |
| ·clpxoo 基因的扩增 | 第21页 |
| ·clpxoo 基因纯化 | 第21页 |
| ·clpxoo 基因的连接与转化 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·clpxoo 突变体构建 | 第23页 |
| ·构建clpxoo 突变体的互补菌株 | 第23-24页 |
| ·clpxoo 突变体致病性测试和过敏性反应（HR）分析 | 第24页 |
| ·clpxoo 突变体鞭毛运动性检测 | 第24页 |
| ·clpxoo 突变体胞外酶活性的检测 | 第24页 |
| ·clpxoo 突变体胞外多糖分泌的检测 | 第24页 |
| ·clpxoo 突变体对过氧化氢敏感性测定 | 第24-25页 |
| ·clpxoo 序列的生物信息学分析 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-32页 |
| ·clpxoo 基因克隆 | 第25页 |
| ·clpxoo 生物信息学分析 | 第25-28页 |
| ·构建clpxoo 突变体菌株 | 第28-29页 |
| ·clpxoo 基因突变体的互补分析 | 第29页 |
| ·clpxoo 突变体HR 诱导能力和致病性测试 | 第29-30页 |
| ·clpxoo 突变体运动性分析 | 第30-31页 |
| ·clpxoo 突变体对 H_2O_2 敏感性测定 | 第31页 |
| ·clpxoo 突变体胞外多糖分泌检测 | 第31页 |
| ·clpxoo 突变体胞外酶活性分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 Clpxoo 对鞭毛合成基因及过氧化物酶相关基因的转录调控分析 | 第34-42页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·供试菌株和突变体 | 第34-35页 |
| ·生化试剂 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·fleQxoo 基因启动子分析 | 第35页 |
| ·相关基因实时定量PCR 引物设计 | 第35-36页 |
| ·细菌总RNA 的提取 | 第36-37页 |
| ·总RNA 反转录合成第一链cDNA | 第37页 |
| ·实时定量PCR 反应程序及体系 | 第37-38页 |
| ·相对定量方法 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-40页 |
| ·fleQxoo 基因启动子分析 | 第38-39页 |
| ·在△clpxoo 中相关基因的表达 | 第39页 |
| ·在△clpxoo 中鞭毛基因簇基因fleQxoo、fliDxoo、fliLxoo、fliAxoo、fliCxoo 的表达 | 第39-40页 |
| ·在△clpxoo 中ahpCxoo 和katExoo 的表达 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 Clpxoo 的表达及纯化 | 第42-50页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·实验所需溶液及其配制 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·Clpxoo 表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第44页 |
| ·Clpxoo 蛋白特性分析 | 第44页 |
| ·重组表达载体的诱导表达 | 第44页 |
| ·表达条件的优化 | 第44页 |
| ·检测蛋白是否可溶 | 第44-45页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第45页 |
| ·重组载体的序列测定 | 第45页 |
| ·Clpxoo 蛋白特性分析 | 第45-47页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定目的蛋白诱导表达结果 | 第47页 |
| ·诱导表达条件的优化和蛋白可溶性检测 | 第47页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 全文结论和下一步工作展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
