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木薯等大戟科植物耐寒抗旱相关miRNA的分离与鉴定

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-9页
1.引言第9-22页
   ·植物抗逆研究进展第9-14页
     ·植物耐寒性研究进展第9-11页
     ·植物抗旱性研究进展第11-14页
   ·miRNA对基因表达的调控第14-20页
     ·miRNA概念与作用机理第14-17页
     ·植物miRNA第17-19页
     ·逆境相关miRNA第19-20页
   ·miRNA及其靶基因在作物遗传改良上的应用第20-21页
   ·本研究的目的与意义第21-22页
2.材料和方法第22-28页
   ·miRNA及其靶基因的生物信息学预测第22-23页
     ·保守miRNA的计算机预测第22页
     ·计算预测的miRNA的候选目标第22-23页
   ·材料第23页
     ·植物材料及其处理第23页
   ·miRNA的差异表达分析第23-28页
     ·miRNA接头以及引物的设计第23-26页
     ·miRNA的差异表达第26-27页
       ·miRNA的提取第26页
       ·miRNA的Poly(A)加尾第26页
       ·第一链cDNA合成第26页
       ·终点法和实时定量法进行miRNA的表达分析第26-27页
     ·靶基因验证第27-28页
       ·RNA的提取第27页
       ·mRNA的分离第27页
       ·连接和逆转录反应第27页
       ·巢式PCR反应第27页
       ·PCR产物回收与测序第27页
       ·序列分析第27-28页
3.结果与分析第28-54页
   ·蓖麻miRNAs的特征及其结构第28-33页
   ·胁迫材料的表型变化第33-34页
   ·验证预测的蓖麻miRNA第34-54页
     ·预测miRNA在大戟科四物种苗期发育时的表达模式第34-36页
       ·终点法RT-PCR验证预测的miRNA第34-35页
       ·定量分析预测的miRNA第35-36页
     ·预测miRNA在胁迫条件下的表达模式第36-48页
       ·终点法RT-PCR验证预测的miRNA第37页
       ·定量RT-PCR验证预测的miRNA第37-39页
       ·miRNA在冷害条件下的表达模式第39-40页
       ·miRNA在旱害条件下的表达模式第40-46页
       ·miRNA在胁迫回复条件下的表达模式第46-47页
       ·发育和胁迫应激反应之间共同的和独特的表达模式第47-48页
     ·蓖麻miRNA的靶基因预测第48-50页
     ·蓖麻miRNA的靶基因的5'RACE验证第50-54页
4.讨论第54-66页
   ·大戟科物种中miRNA的保守性和多样性第56-57页
   ·Euphorbiaceous物种中miRNA及其靶基因的关系第57-58页
   ·植物发育相关的miRNA的功能第58-62页
   ·植物非生物胁迫相关的miRNA的功能第62-63页
   ·miRNA剪切位点的多样性分析第63-65页
   ·关于miRNA介导的基因调控第65-66页
5.总结第66-67页
参考文献第67-73页
博士后工作小结第73-74页
致谢第74页

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