中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
1.引言 | 第9-22页 |
·植物抗逆研究进展 | 第9-14页 |
·植物耐寒性研究进展 | 第9-11页 |
·植物抗旱性研究进展 | 第11-14页 |
·miRNA对基因表达的调控 | 第14-20页 |
·miRNA概念与作用机理 | 第14-17页 |
·植物miRNA | 第17-19页 |
·逆境相关miRNA | 第19-20页 |
·miRNA及其靶基因在作物遗传改良上的应用 | 第20-21页 |
·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
2.材料和方法 | 第22-28页 |
·miRNA及其靶基因的生物信息学预测 | 第22-23页 |
·保守miRNA的计算机预测 | 第22页 |
·计算预测的miRNA的候选目标 | 第22-23页 |
·材料 | 第23页 |
·植物材料及其处理 | 第23页 |
·miRNA的差异表达分析 | 第23-28页 |
·miRNA接头以及引物的设计 | 第23-26页 |
·miRNA的差异表达 | 第26-27页 |
·miRNA的提取 | 第26页 |
·miRNA的Poly(A)加尾 | 第26页 |
·第一链cDNA合成 | 第26页 |
·终点法和实时定量法进行miRNA的表达分析 | 第26-27页 |
·靶基因验证 | 第27-28页 |
·RNA的提取 | 第27页 |
·mRNA的分离 | 第27页 |
·连接和逆转录反应 | 第27页 |
·巢式PCR反应 | 第27页 |
·PCR产物回收与测序 | 第27页 |
·序列分析 | 第27-28页 |
3.结果与分析 | 第28-54页 |
·蓖麻miRNAs的特征及其结构 | 第28-33页 |
·胁迫材料的表型变化 | 第33-34页 |
·验证预测的蓖麻miRNA | 第34-54页 |
·预测miRNA在大戟科四物种苗期发育时的表达模式 | 第34-36页 |
·终点法RT-PCR验证预测的miRNA | 第34-35页 |
·定量分析预测的miRNA | 第35-36页 |
·预测miRNA在胁迫条件下的表达模式 | 第36-48页 |
·终点法RT-PCR验证预测的miRNA | 第37页 |
·定量RT-PCR验证预测的miRNA | 第37-39页 |
·miRNA在冷害条件下的表达模式 | 第39-40页 |
·miRNA在旱害条件下的表达模式 | 第40-46页 |
·miRNA在胁迫回复条件下的表达模式 | 第46-47页 |
·发育和胁迫应激反应之间共同的和独特的表达模式 | 第47-48页 |
·蓖麻miRNA的靶基因预测 | 第48-50页 |
·蓖麻miRNA的靶基因的5'RACE验证 | 第50-54页 |
4.讨论 | 第54-66页 |
·大戟科物种中miRNA的保守性和多样性 | 第56-57页 |
·Euphorbiaceous物种中miRNA及其靶基因的关系 | 第57-58页 |
·植物发育相关的miRNA的功能 | 第58-62页 |
·植物非生物胁迫相关的miRNA的功能 | 第62-63页 |
·miRNA剪切位点的多样性分析 | 第63-65页 |
·关于miRNA介导的基因调控 | 第65-66页 |
5.总结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
博士后工作小结 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |