中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
目录 | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-35页 |
1 微囊藻毒素 | 第11-20页 |
·我国微囊藻毒素污染现状 | 第11-12页 |
·微囊藻毒素的产生机制 | 第12-13页 |
·环境因子对微囊藻毒素产生的影响 | 第12-13页 |
·遗传结构的不同 | 第13页 |
·微囊藻毒素的结构 | 第13-14页 |
·微囊藻毒素的理化性质 | 第14页 |
·微囊藻毒素的毒性 | 第14-17页 |
·肝毒性 | 第15页 |
·促癌作用 | 第15-16页 |
·肾毒性 | 第16页 |
·肠毒性 | 第16页 |
·遗传毒性 | 第16-17页 |
·其它毒性 | 第17页 |
·微囊藻毒素的致毒机理 | 第17-19页 |
·对细胞骨架的损伤 | 第17页 |
·氧化损伤和凋亡 | 第17-18页 |
·细胞增殖 | 第18页 |
·DNA损伤 | 第18-19页 |
·生物体微囊藻毒素去毒分子机理 | 第19-20页 |
2 孔雀石绿 | 第20-26页 |
·孔雀石绿及其代谢物的化学结构、理化性质 | 第20-21页 |
·孔雀石绿及其代谢物的危害现状 | 第21-22页 |
·孔雀石绿的毒性及致毒机理 | 第22-23页 |
·细胞毒性 | 第22-23页 |
·体内毒性 | 第23页 |
·孔雀石绿在鱼体内的分布与代谢 | 第23-25页 |
·孔雀石绿及代谢物微生物降解处理的研究 | 第25-26页 |
3 外源性毒物去毒相关基因的研究进展 | 第26-33页 |
·细胞色素P450(CYP450) | 第26-28页 |
·谷胱甘肽S-转移酶(GST) | 第28-30页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶(GPX) | 第30-31页 |
·解偶联蛋白2(UCP2) | 第31-32页 |
·热休克蛋白(HSP70) | 第32-33页 |
4 本研究开展背景和意义 | 第33-35页 |
第二章 微囊藻毒素对尼罗罗非鱼原代肝细胞致毒机理的探讨 | 第35-43页 |
1 实验材料 | 第35页 |
·实验鱼 | 第35页 |
·主要实验试剂 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-38页 |
·尼罗罗非鱼肝实质细胞培养 | 第35-36页 |
·肝细胞形态学观察 | 第36页 |
·肝细胞活力的测定 | 第36页 |
·单细胞凝胶电泳试验 | 第36-37页 |
·制片 | 第36-37页 |
·裂解 | 第37页 |
·解旋 | 第37页 |
·电泳 | 第37页 |
·漂洗中和 | 第37页 |
·染色 | 第37页 |
·结果观察与拍照 | 第37页 |
·Annexin Ⅴ和PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第37-38页 |
3 结果 | 第38-41页 |
·光学显微镜观察细胞形态及活力 | 第38页 |
·彗星电泳图 | 第38-39页 |
·PI/Annexin Ⅴ双染色流式细胞仪检测 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-42页 |
5 小结 | 第42-43页 |
第三章 尼罗罗非鱼原代肝细胞去毒相关基因对外源性毒物的反应 | 第43-60页 |
1 实验材料 | 第44页 |
·实验鱼 | 第44页 |
·试剂盒与试剂 | 第44页 |
·引物合成 | 第44页 |
2 实验方法 | 第44-49页 |
·尼罗罗非鱼肝实质细胞培养 | 第44页 |
·实验设计与MG和MC-LR暴露实验 | 第44页 |
·肝细胞CYP1A1、GSTA、GSTR、GPX、UCP2和HSP70 mRNA表达水平的研究 | 第44-49页 |
·肝细胞总RNA提取 | 第45-46页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测总RNA质量 | 第46页 |
·总RNA的定量 | 第46页 |
·合成第一链cDNA | 第46-47页 |
·半定量PCR | 第47-48页 |
·PCR产物电泳分析 | 第48页 |
·统计分析 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-57页 |
·总RNA质量测定及核酸定量 | 第49-51页 |
·MG诱导对罗非鱼肝实质细胞CYP1A1、GSTA、GSTR、GPX、UCP2与HSP70 mRNA表达的影响 | 第51页 |
·MC-LR诱导对罗非鱼肝实质细胞CYP1A1、GSTA、GSTR、GPX、UCP2与HSP70 mRNA表达的影响 | 第51-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
5 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-80页 |
在学期间发表论文清单 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |