| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 前言 | 第15-22页 |
| 第一章 大肠埃希菌O157:H7 Tir基因的生物信息学分析 | 第22-31页 |
| ·方法 | 第22-23页 |
| ·Tir基因序列和氨基酸序列查找 | 第22页 |
| ·分析EHEC O157:H7 Tir的理化性质 | 第22页 |
| ·预测Tir的跨膜螺旋区域 | 第22页 |
| ·预测EHEC O157:H7 Tir的B细胞抗原表位 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-28页 |
| ·EHEC O157:H7 Tir基因及其编码序列 | 第23-24页 |
| ·EHEC O157:H7 Tir的理化性质 | 第24-25页 |
| ·翻译后修饰与结构的特征性序列 | 第25-26页 |
| ·InterProScan扫描一级结构中包含的结构和功能域特征序列 | 第26页 |
| ·Predictprotein分析蛋白质的拓扑结构、二级结构和亲水性特征 | 第26页 |
| ·Tir的三维结构图 | 第26-27页 |
| ·Tir跨膜螺旋预测 | 第27页 |
| ·Tir的B细胞表位预测 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-31页 |
| 第二章 大肠埃希菌O157:H7 Tir基因的克隆表达与鉴定 | 第31-47页 |
| ·材料 | 第31-34页 |
| ·菌株及质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第31页 |
| ·主要器材 | 第31-32页 |
| ·主要溶液的配置 | 第32-34页 |
| ·方法 | 第34-41页 |
| ·菌种培养与染色体DNA提取 | 第34页 |
| ·Tir基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·Tir基因的克隆 | 第35-38页 |
| ·重组蛋白在大肠埃希菌BL21/DE3的诱导表达 | 第38页 |
| ·重组蛋白的大量表达、亲和层析纯化 | 第38-39页 |
| ·纯化的重组蛋白浓度的测定 | 第39-40页 |
| ·抗6×His单克隆抗体Western Blotting鉴定重组蛋白 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-44页 |
| ·Tir基因的扩增和克隆 | 第41-42页 |
| ·Tir重组蛋白表达与纯化 | 第42-44页 |
| ·Tir重组蛋白Western Blotting鉴定 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 大肠埃希菌O157:H7 Tir的免疫保护作用研究 | 第47-59页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·主要试剂的配制 | 第47-48页 |
| ·统计软件 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·免疫小鼠 | 第48-49页 |
| ·采集血清样品 | 第49页 |
| ·粪便提取物制备 | 第49页 |
| ·间接ELISA法检测血清IgG | 第49-50页 |
| ·间接ELISA法检测血清和粪便IgA | 第50页 |
| ·小鼠攻毒保护试验 | 第50页 |
| ·病理组织学检查 | 第50页 |
| ·统计学处理 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-55页 |
| ·抗体效价的检测结果 | 第50-53页 |
| ·病理组织学检查结果 | 第53-55页 |
| ·小鼠攻毒后存活率 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-59页 |
| 全文总结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 附录 | 第70-77页 |
| 英文缩略词表 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
