摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-23页 |
引言 | 第11页 |
1 双生病毒的鉴定与分类 | 第11-14页 |
·双生病毒的检测鉴定 | 第11-13页 |
·双生病毒的分类 | 第13-14页 |
2 双生病毒的基因组结构及功能蛋白 | 第14-18页 |
·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第14-15页 |
·甜菜曲顶病毒属(Curtovirus) | 第15-16页 |
·番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第16页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第16-18页 |
3 双生病毒基因组的进化 | 第18-20页 |
4 双生病毒侵染性克隆的构建 | 第20-21页 |
5 福建双生病毒的研究进展 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-39页 |
1 材料 | 第23-24页 |
·供试样品 | 第23页 |
·供试寄主植物 | 第23页 |
·供试菌株和质粒 | 第23页 |
·供试介体昆虫 | 第23页 |
·PCR 引物 | 第23-24页 |
2 实验方法 | 第24-37页 |
·植物总DNA 提取(CTAB 法) | 第24-25页 |
·PCR 技术 | 第25-26页 |
·反应体系 | 第25页 |
·反应参数设置 | 第25-26页 |
·反应后检验 | 第26页 |
·割胶回收 | 第26-27页 |
·DNA 克隆技术 | 第27-29页 |
·连接方法 | 第27页 |
·CaCl_2 法制备感受态细胞 | 第27-28页 |
·转化 | 第28页 |
·重组克隆的初步筛选和菌液PCR 鉴定 | 第28页 |
·提取重组质粒和重组鉴定 | 第28-29页 |
·序列测定与序列分析 | 第29-31页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
·转化农杆菌 | 第32页 |
·农杆菌接种 | 第32页 |
·粉虱传毒接种步骤 | 第32-33页 |
·Southern Blot 分析 | 第33-37页 |
·探针的标记 | 第33页 |
·探针标记效价的检测 | 第33-34页 |
·DNA 的转印 | 第34-37页 |
3 MaLCV 侵染性克隆的构建 | 第37页 |
4 常用生化试剂及仪器 | 第37-39页 |
·常用生化试剂 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37-39页 |
第三章 结果与分析 | 第39-69页 |
1 侵染福建赛葵的赛葵曲叶病毒的基因组结构 | 第39-51页 |
·病毒分离物F1 的基因组结构 | 第39-40页 |
·病毒分离物F1 的同源进化分析 | 第40-51页 |
2 赛葵曲叶病毒的致病性研究 | 第51-56页 |
·MaLCV 病毒分离物侵染性克隆的构建 | 第51-53页 |
·MaLCV 的接种症状 | 第53-55页 |
·病毒DNA 的PCR,克隆和测序鉴定 | 第55页 |
·MaLCV 分离物的Southern 印迹检测结果 | 第55-56页 |
3 醴肠上分离到的双生病毒的分子鉴定 | 第56-69页 |
·病毒分离物F2 的基因组结构 | 第56-57页 |
·病毒分离物F2 的同源进化分析 | 第57-69页 |
第四章 总结与讨论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
附录 I 赛葵曲叶病毒核苷酸序列登录号 FJ712189 | 第76-77页 |
附录 II 空心莲子草黄脉病毒核苷酸序列登录号为 FJ712190 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |