| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-12页 |
| 第二章 绪论 | 第12-32页 |
| ·小反刍兽疫的研究进展 | 第12-24页 |
| ·PPRV 的发现及分类 | 第12页 |
| ·形态及理化特征 | 第12-13页 |
| ·病毒基因组 | 第13-14页 |
| ·病毒蛋白 | 第14-15页 |
| ·病毒复制 | 第15-16页 |
| ·病毒培养 | 第16页 |
| ·免疫原性 | 第16页 |
| ·致病特性 | 第16-18页 |
| ·诊断 | 第18-21页 |
| ·防制 | 第21-24页 |
| ·存在问题与展望 | 第24页 |
| ·核酸疫苗的研究进展 | 第24-32页 |
| ·核酸疫苗的概述 | 第24-26页 |
| ·DNA 疫苗的研究现状 | 第26-28页 |
| ·DNA 疫苗的免疫途径 | 第28-29页 |
| ·DNA 疫苗的优点及存在的问题 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-32页 |
| 第三章 PPRV H 和F 基因的克隆、鉴定及序列分析 | 第32-55页 |
| ·材料方法 | 第32-35页 |
| ·毒种、菌种和载体 | 第32页 |
| ·酶和试剂 | 第32页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第32-34页 |
| ·仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-36页 |
| ·Vero 细胞的复苏及培养 | 第35-36页 |
| ·小反刍兽疫Nigeria 75/1 株病毒增殖 | 第36页 |
| ·目的基因的扩增 | 第36-42页 |
| ·引物的设计与合成 | 第36-37页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第37页 |
| ·反转录 | 第37-38页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第38页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第38-39页 |
| ·目的基因的克隆 | 第39-41页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-54页 |
| ·病毒培养结果 | 第42-43页 |
| ·基因扩增 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的构建 | 第44页 |
| ·目的基因序列测定 | 第44页 |
| ·基因序列分析及蛋白结构预测 | 第44-52页 |
| ·同源性分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 H 和F 胞外区基因的连接 | 第55-63页 |
| ·材料方法 | 第55页 |
| ·菌种和载体 | 第55页 |
| ·酶和试剂 | 第55页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第55页 |
| ·仪器 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·引物的设计与合成 | 第55-56页 |
| ·目的基因的扩增 | 第56页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第56-57页 |
| ·H 和F 胞外区基因PCR 连接 | 第57页 |
| ·H_M+F_M 连接产物的回收与纯化 | 第57-58页 |
| ·pGEM- H_M+F_M 重组载体的构建 | 第58页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-60页 |
| ·H 和F 胞外区基因扩增及连接 | 第59页 |
| ·基因克隆 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 F、H、H_M+F_M基因真核表达载体的构建和瞬时表达 | 第63-73页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·菌种、真核表达载体及细胞 | 第63页 |
| ·酶和试剂 | 第63页 |
| ·仪器 | 第63页 |
| ·培养基 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-68页 |
| ·真核表达载体pEGFP-F 、pEGFP-H、pEGFP-H_M+F_M 的构建 | 第64-66页 |
| ·重组真核表达载体提取及浓度测定 | 第66-67页 |
| ·重组表达载体转染BHK-21 细胞及在细胞中表达检测 | 第67-68页 |
| ·结果 | 第68-70页 |
| ·PEGFP-F、PEGFP-H、PEGFP-H_M+F_M 的构建 | 第68页 |
| ·重组真核表达载体pEGFP-F、pEGFP-H、pEGFP-H_M+F_M及载体pEGFP-N1 的提取 | 第68页 |
| ·表达载体的转染及在细胞中的表达 | 第68-70页 |
| ·F、H 及H_M+F_M 基因表达的检测 | 第70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第六章 重组真核表达质粒对山羊的免疫效果研究 | 第73-80页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·载体及实验动物 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73页 |
| ·仪器 | 第73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·溶液 | 第73-74页 |
| ·质粒大量提取 | 第74-75页 |
| ·动物免疫试验 | 第75-77页 |
| ·试验动物及其分组 | 第75-76页 |
| ·免疫山羊血清抗PPRV 抗体的检测 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-78页 |
| ·质粒的大量提取 | 第77页 |
| ·ELISA 最佳条件的选择 | 第77页 |
| ·免疫山羊抗体的检测 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 第七章 研究结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 作者简介 | 第90页 |
