尖孢镰刀菌诱导下的黄瓜SSH文库的构建及分析
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-25页 |
| ·研究的目的与意义 | 第13-14页 |
| ·国内外研究动态和趋势 | 第14-25页 |
| ·尖孢镰刀菌及其致病机制 | 第14页 |
| ·黄瓜抗枯萎病机理研究进展 | 第14-17页 |
| ·植物抗病的分子机制 | 第17-20页 |
| ·植物抗病基因克隆的方法 | 第20-21页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第21-22页 |
| ·抑制消减杂交技术 | 第22-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·黄瓜品种 | 第25页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·化学试剂 | 第25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-35页 |
| ·试验材料的制备 | 第26页 |
| ·RNA 的制备 | 第26-27页 |
| ·总RNA 中mRNA 的分离 | 第27-28页 |
| ·抑制消减杂交 | 第28-31页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第31-32页 |
| ·PCR 产物克隆 | 第32页 |
| ·PCR 筛选 | 第32-33页 |
| ·斑点杂交筛选 | 第33-34页 |
| ·序列分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-53页 |
| ·总RNA 的提取及MRNA 的分离 | 第35-36页 |
| ·抑制消减杂交结果检测 | 第36-39页 |
| ·ds cDNA 的合成及合成效率检测 | 第36-37页 |
| ·接头连接效率检测 | 第37页 |
| ·两次PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
| ·消减效率的PCR 检测 | 第38-39页 |
| ·SSH 产物克隆及文库质量评价 | 第39页 |
| ·斑点杂交筛选结果 | 第39-40页 |
| ·ESTS 获得与分析 | 第40-51页 |
| ·信号转导及转录因子相关基因 | 第44-46页 |
| ·防御相关基因 | 第46-49页 |
| ·次生代谢相关基因 | 第49-51页 |
| ·EST 功能分类 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·高质量RNA 是构建CDNA 文库的基础 | 第53页 |
| ·SSH 技术在克隆抗病相关基因中的优点 | 第53页 |
| ·ABA 在黄瓜抗枯萎病中的作用 | 第53-54页 |
| ·初级代谢产物在黄瓜抗病中的作用 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
