| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 1 引言 | 第16-31页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒概述 | 第16-18页 |
| ·病原 | 第16-17页 |
| ·病毒生长繁殖特性 | 第17-18页 |
| ·TGEV 与PRCV 分子生物学研究进展 | 第18-22页 |
| ·基因组结构 | 第18-19页 |
| ·TGEV 与PRCV 的蛋白结构与功能 | 第19-21页 |
| ·TGEV 与PRCV 的组织嗜性 | 第21-22页 |
| ·TGEV 与PRCV 鉴别检测方法研究进展 | 第22-25页 |
| ·核酸探针杂交技术 | 第22-23页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第23-25页 |
| ·等温环介导扩增（LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION ，LAMP） | 第25-29页 |
| ·反应原理 | 第25-28页 |
| ·LAMP 优缺点 | 第28-29页 |
| ·研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| 2 材料方法 | 第31-45页 |
| ·TGEV/PRCV 套式RT-PCR 鉴别诊断方法的材料方法 | 第31-36页 |
| ·病毒与细胞 | 第31页 |
| ·实验试剂 | 第31页 |
| ·引物设计与合成 | 第31-32页 |
| ·病毒繁殖 | 第32页 |
| ·套式RT-PCR | 第32-34页 |
| ·套式RT-PCR 敏感性测定 | 第34页 |
| ·套式RT-PCR 特异性测定 | 第34-35页 |
| ·套式RT-PCR 重复性测定 | 第35页 |
| ·电镜观察 | 第35-36页 |
| ·TGEV/PRCV RT-LAMP 鉴别诊断方法的材料方法 | 第36-39页 |
| ·材料和试剂、设备 | 第36页 |
| ·目的基因序列分析及引物设计 | 第36-37页 |
| ·病毒繁殖 | 第37页 |
| ·RT-LAMP | 第37-38页 |
| ·扩增产物检测与鉴定 | 第38页 |
| ·RT-LAMP 条件优化 | 第38-39页 |
| ·RT-LAMP 敏感性实验 | 第39页 |
| ·RT-LAMP 特异性实验 | 第39页 |
| ·TGEV N 蛋白单克隆抗体的制备的材料与方法 | 第39-45页 |
| ·病毒与细胞 | 第39-40页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·阳性血清 | 第40页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第40页 |
| ·病毒纯化及鉴定 | 第40页 |
| ·小鼠免疫 | 第40-41页 |
| ·间接ELISA 检测方法反应条件的确定 | 第41页 |
| ·细胞融合 | 第41-42页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株筛选及克隆 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体细胞株的冻存、复苏及稳定性试验 | 第43页 |
| ·单克隆抗体腹水的生产及预处理 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体免疫球蛋白亚类鉴定 | 第44页 |
| ·腹水单克隆抗体饱和值测定 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-62页 |
| ·套式RT-PCR 方法试验结果 | 第45-51页 |
| ·PRCV 细胞培养结果 | 第45页 |
| ·扩增产物的测序鉴定结果 | 第45-46页 |
| ·套式RT-PCR 条件优化 | 第46-47页 |
| ·套式RT-PCR 敏感性测定 | 第47-49页 |
| ·套式RT-PCR 特异性测定 | 第49页 |
| ·套式RT-PCR 重复性测定 | 第49-51页 |
| ·RT-LAMP 方法结果 | 第51-54页 |
| ·引物设计与合成 | 第51页 |
| ·扩增产物检测与鉴定 | 第51-52页 |
| ·RT-LAMP 条件优化 | 第52页 |
| ·RT-LAMP 敏感性结果 | 第52-53页 |
| ·RT-LAMP 特异性结果 | 第53-54页 |
| ·TGEV N 蛋白单克隆抗体制备结果 | 第54-62页 |
| ·病毒纯化后的鉴定 | 第54-55页 |
| ·间接ELISA 反应条件确定 | 第55-56页 |
| ·饲养细胞的制备结果 | 第56页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备结果 | 第56-57页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第57页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清及腹水单克隆抗体效价的测定 | 第57-58页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性试验 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体的特异性分析 | 第59-61页 |
| ·单克隆抗体免疫球蛋白类—亚类—型鉴定 | 第61页 |
| ·腹水单克隆抗体饱和值测定 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| ·套式 RT-PCR 方法 | 第62-63页 |
| ·RT-LAMP 方法 | 第63-64页 |
| ·TGEV N 蛋白单克隆抗体制备 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附 录 | 第74-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
