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抗氧化乐果棉蚜谷胱甘肽S-转移酶研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 前言第12-20页
 1 棉蚜的抗药性现状第12-14页
   ·棉蚜抗药性研究现状第12-13页
   ·棉蚜对有机磷类杀虫剂的抗药性第13-14页
 2 羧酸酯酶与有机磷杀虫剂抗药性第14-16页
   ·羧酸酯酶第14-15页
   ·羧酸酯酶与杀虫剂抗药性第15-16页
 3 乙酰胆碱酯酶与有机磷杀虫剂抗药性第16-17页
   ·乙酰胆碱酯酶第16页
   ·乙酰胆碱酯酶与杀虫剂抗药性第16-17页
 4 谷胱甘肽 S-转移酶与有机磷杀虫剂抗药性第17-19页
   ·谷胱甘肽 S-转移酶第17页
   ·谷胱甘肽 S-转移酶与杀虫剂抗药性的关系第17-18页
   ·谷胱甘肽 S-转移酶对杀虫剂抗药性的分子机理第18-19页
 5 研究意义第19-20页
第二章 棉蚜氧化乐果敏感和抗性品系的筛选及交互抗性谱的建立第20-25页
 1 材料与方法第20-22页
   ·供试药剂第20-21页
   ·棉蚜氧化乐果敏感、抗性品系的选育第21-22页
 2 实验结果第22-24页
   ·棉蚜品系的选育第22页
   ·氧化乐果抗性品系棉蚜的交互抗性谱第22-24页
 3 小结与讨论第24-25页
   ·氧化乐果敏感和抗性品系的选育第24页
   ·氧化乐果抗性棉蚜的交互抗性第24-25页
第三章 羧酸酯酶与棉蚜氧化乐果抗性的关系第25-30页
 1 材料与方法第25-27页
   ·主要仪器第25页
   ·化学试剂第25页
   ·主要试剂配制第25页
   ·蛋白质标准曲线制作第25-26页
   ·CarE 酶液制备第26页
   ·CarE 比活力的测定第26页
   ·CarE Km和 Vmax的测定第26-27页
   ·蛋白质含量的测定第27页
 2 实验结果第27-28页
   ·蛋白质标准曲线第27-28页
   ·CarE 比活力、Km和 Vmax的比较第28页
 3 小结与讨论第28-30页
第四章 乙酰胆碱酯酶与棉蚜氧化乐果抗性的关系第30-35页
 1 材料和方法第30-32页
   ·化学试剂第30页
   ·主要试剂配制第30页
   ·蛋白质标准曲线制作第30页
   ·AChE 酶液制备第30-31页
   ·AChE 比活力的测定第31页
   ·AChE Km和 Vmax的测定第31页
   ·AChE 的体外抑制第31-32页
   ·蛋白质含量的测定第32页
 2 实验结果第32-34页
   ·蛋白质标准曲线第32页
   ·AChE 比活力、Km和 Vmax的比较第32-33页
   ·AChE 的敏感性比较第33-34页
 3 小结与讨论第34-35页
第五章 抗氧化乐果棉蚜谷胱甘肽 S-转移酶研究第35-57页
 第一节 谷胱甘肽 S-转移酶的生化特性研究第35-42页
  1 材料和方法第35-37页
   ·化学试剂第35-36页
   ·主要试剂配制第36页
   ·蛋白质标准曲线制作第36页
   ·DEM 增效生物测定第36页
   ·GSTs 酶液制备第36页
   ·GSTs 酶促反应稳态动力学测定第36-37页
   ·GSTs 的体外抑制第37页
   ·蛋白质含量的测定第37页
  2 实验结果第37-41页
   ·蛋白质标准曲线第37-38页
   ·DEM 处理生物测定第38页
   ·GSTs 比活力、Km和 Vmax的比较第38-39页
   ·GSTs 催化反应机制的变化第39页
   ·抑制剂对 GSTs 的体外抑制第39-40页
   ·抑制剂对 GSTs 的抑制类型测定第40-41页
  3 小结与讨论第41-42页
 第二节 谷胱甘肽 S-转移酶基因克隆和序列分析第42-50页
  1 材料和方法第42-48页
   ·主要仪器第42页
   ·主要试剂第42-43页
   ·主要试剂配制第43-44页
   ·菌种和载体第44页
   ·引物设计第44页
   ·总 RNA 的提取与纯化第44-45页
   ·反转录第45-46页
   ·PCR 扩增第46页
   ·PCR 产物的回收纯化第46-47页
   ·大肠杆菌的转化第47页
   ·质粒 DNA 的小量提取第47-48页
   ·序列分析第48页
  2 实验结果第48-50页
   ·gst 基因的克隆第48-49页
   ·gst 基因的序列分析第49-50页
  3 小结与讨论第50页
 第三节 谷胱甘肽 S-转移酶基因的 Real-time PCR 验证第50-57页
  1 材料与方法第51-53页
   ·主要仪器第51页
   ·主要试剂第51页
   ·引物设计第51页
   ·DNA 提取第51-52页
   ·RNA 的提取第52页
   ·反转录第52页
   ·Real-time PCR 反应第52-53页
   ·绝对定量标准曲线的制作第53页
   ·数据分析第53页
  2 实验结果第53-55页
   ·gst 基因 mRNA 的表达量的比较第53-55页
   ·gst 基因 DNA 拷贝数的比较第55页
  3 小结与讨论第55-57页
第六章 结论第57-58页
参考文献第58-67页
作者简介及在攻读学位期间发表的 SCI 论文第67-68页
致谢第68页

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