摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
1 棉蚜的抗药性现状 | 第12-14页 |
·棉蚜抗药性研究现状 | 第12-13页 |
·棉蚜对有机磷类杀虫剂的抗药性 | 第13-14页 |
2 羧酸酯酶与有机磷杀虫剂抗药性 | 第14-16页 |
·羧酸酯酶 | 第14-15页 |
·羧酸酯酶与杀虫剂抗药性 | 第15-16页 |
3 乙酰胆碱酯酶与有机磷杀虫剂抗药性 | 第16-17页 |
·乙酰胆碱酯酶 | 第16页 |
·乙酰胆碱酯酶与杀虫剂抗药性 | 第16-17页 |
4 谷胱甘肽 S-转移酶与有机磷杀虫剂抗药性 | 第17-19页 |
·谷胱甘肽 S-转移酶 | 第17页 |
·谷胱甘肽 S-转移酶与杀虫剂抗药性的关系 | 第17-18页 |
·谷胱甘肽 S-转移酶对杀虫剂抗药性的分子机理 | 第18-19页 |
5 研究意义 | 第19-20页 |
第二章 棉蚜氧化乐果敏感和抗性品系的筛选及交互抗性谱的建立 | 第20-25页 |
1 材料与方法 | 第20-22页 |
·供试药剂 | 第20-21页 |
·棉蚜氧化乐果敏感、抗性品系的选育 | 第21-22页 |
2 实验结果 | 第22-24页 |
·棉蚜品系的选育 | 第22页 |
·氧化乐果抗性品系棉蚜的交互抗性谱 | 第22-24页 |
3 小结与讨论 | 第24-25页 |
·氧化乐果敏感和抗性品系的选育 | 第24页 |
·氧化乐果抗性棉蚜的交互抗性 | 第24-25页 |
第三章 羧酸酯酶与棉蚜氧化乐果抗性的关系 | 第25-30页 |
1 材料与方法 | 第25-27页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·化学试剂 | 第25页 |
·主要试剂配制 | 第25页 |
·蛋白质标准曲线制作 | 第25-26页 |
·CarE 酶液制备 | 第26页 |
·CarE 比活力的测定 | 第26页 |
·CarE Km和 Vmax的测定 | 第26-27页 |
·蛋白质含量的测定 | 第27页 |
2 实验结果 | 第27-28页 |
·蛋白质标准曲线 | 第27-28页 |
·CarE 比活力、Km和 Vmax的比较 | 第28页 |
3 小结与讨论 | 第28-30页 |
第四章 乙酰胆碱酯酶与棉蚜氧化乐果抗性的关系 | 第30-35页 |
1 材料和方法 | 第30-32页 |
·化学试剂 | 第30页 |
·主要试剂配制 | 第30页 |
·蛋白质标准曲线制作 | 第30页 |
·AChE 酶液制备 | 第30-31页 |
·AChE 比活力的测定 | 第31页 |
·AChE Km和 Vmax的测定 | 第31页 |
·AChE 的体外抑制 | 第31-32页 |
·蛋白质含量的测定 | 第32页 |
2 实验结果 | 第32-34页 |
·蛋白质标准曲线 | 第32页 |
·AChE 比活力、Km和 Vmax的比较 | 第32-33页 |
·AChE 的敏感性比较 | 第33-34页 |
3 小结与讨论 | 第34-35页 |
第五章 抗氧化乐果棉蚜谷胱甘肽 S-转移酶研究 | 第35-57页 |
第一节 谷胱甘肽 S-转移酶的生化特性研究 | 第35-42页 |
1 材料和方法 | 第35-37页 |
·化学试剂 | 第35-36页 |
·主要试剂配制 | 第36页 |
·蛋白质标准曲线制作 | 第36页 |
·DEM 增效生物测定 | 第36页 |
·GSTs 酶液制备 | 第36页 |
·GSTs 酶促反应稳态动力学测定 | 第36-37页 |
·GSTs 的体外抑制 | 第37页 |
·蛋白质含量的测定 | 第37页 |
2 实验结果 | 第37-41页 |
·蛋白质标准曲线 | 第37-38页 |
·DEM 处理生物测定 | 第38页 |
·GSTs 比活力、Km和 Vmax的比较 | 第38-39页 |
·GSTs 催化反应机制的变化 | 第39页 |
·抑制剂对 GSTs 的体外抑制 | 第39-40页 |
·抑制剂对 GSTs 的抑制类型测定 | 第40-41页 |
3 小结与讨论 | 第41-42页 |
第二节 谷胱甘肽 S-转移酶基因克隆和序列分析 | 第42-50页 |
1 材料和方法 | 第42-48页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·主要试剂配制 | 第43-44页 |
·菌种和载体 | 第44页 |
·引物设计 | 第44页 |
·总 RNA 的提取与纯化 | 第44-45页 |
·反转录 | 第45-46页 |
·PCR 扩增 | 第46页 |
·PCR 产物的回收纯化 | 第46-47页 |
·大肠杆菌的转化 | 第47页 |
·质粒 DNA 的小量提取 | 第47-48页 |
·序列分析 | 第48页 |
2 实验结果 | 第48-50页 |
·gst 基因的克隆 | 第48-49页 |
·gst 基因的序列分析 | 第49-50页 |
3 小结与讨论 | 第50页 |
第三节 谷胱甘肽 S-转移酶基因的 Real-time PCR 验证 | 第50-57页 |
1 材料与方法 | 第51-53页 |
·主要仪器 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·引物设计 | 第51页 |
·DNA 提取 | 第51-52页 |
·RNA 的提取 | 第52页 |
·反转录 | 第52页 |
·Real-time PCR 反应 | 第52-53页 |
·绝对定量标准曲线的制作 | 第53页 |
·数据分析 | 第53页 |
2 实验结果 | 第53-55页 |
·gst 基因 mRNA 的表达量的比较 | 第53-55页 |
·gst 基因 DNA 拷贝数的比较 | 第55页 |
3 小结与讨论 | 第55-57页 |
第六章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
作者简介及在攻读学位期间发表的 SCI 论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |