| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-24页 |
| 一、植物抗病分子机制 | 第10-13页 |
| （一） 植物抗病类型 | 第10-11页 |
| （二） 植物抗病基因及识别 | 第11-12页 |
| （三） 植物防卫基因及防卫反应 | 第12-13页 |
| （四） 植物抗病信号传导 | 第13页 |
| 二、植物抗病基因工程 | 第13-18页 |
| （一） 外源基因转化 | 第14-15页 |
| 1、几丁质酶 | 第14页 |
| 2、β-1, 3-葡聚糖酶 | 第14-15页 |
| 3、溶菌酶 | 第15页 |
| 4、细菌素 | 第15页 |
| 5、核糖体失活蛋白 | 第15页 |
| 6、防御素 | 第15页 |
| （二） 内源基因修饰和诱导 | 第15-17页 |
| 1、提高自身免疫性 | 第16页 |
| 2、增强激发子作用 | 第16页 |
| 3、促进活性氧产生 | 第16页 |
| 4、细胞程序死亡 | 第16-17页 |
| （三） 转基因方法 | 第17-18页 |
| 1、农杆菌介导法 | 第17页 |
| 2、基因枪法 | 第17页 |
| 3、离子束介导法 | 第17页 |
| 4、脂质体法（阳离子转化法） | 第17-18页 |
| 5、花粉管通道法 | 第18页 |
| 三、植物多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（PGIP）及其基因 | 第18-23页 |
| （一） PGIP 结构及理化特性 | 第18-20页 |
| （二） PGIP 抗病功能及机制 | 第20-21页 |
| （三） PGIP 含量与分布 | 第21页 |
| （四） PGIP 基因及其表达 | 第21-22页 |
| （五） PGIP 在植物抗真菌基因工程中的应用 | 第22-23页 |
| （六） 水稻PGIP 及其基因 | 第23页 |
| 四、本研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 材料与方法 | 第24-33页 |
| 一、供试植株 | 第24页 |
| 二、供试菌株 | 第24页 |
| （一） 水稻纹枯病菌 | 第24页 |
| （二） 大肠杆菌 | 第24页 |
| 三、质粒载体 | 第24页 |
| 四、试剂和仪器 | 第24-25页 |
| （一） 主要试剂 | 第24-25页 |
| （二） 主要仪器 | 第25页 |
| 五、水稻基因组 DNA 提取 | 第25-26页 |
| （一） DNA 提取方法 | 第25-26页 |
| （二） DNA 纯度和浓度测定 | 第26页 |
| 六、水稻 Ospgip1 基因克隆与序列分析 | 第26-30页 |
| （一） 引物设计 | 第26页 |
| （二） PCR 扩增 | 第26-27页 |
| （三） PCR 产物纯化 | 第27页 |
| （四） 重组质粒构建 | 第27页 |
| （五） 感受态细胞制备与转化 | 第27-28页 |
| （六） 重组子酶切验证 | 第28-29页 |
| 1、微量质粒 DNA 提取 | 第28页 |
| 2、酶切验证 | 第28-29页 |
| （七） 测序 | 第29页 |
| （八） 生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 1、序列相似性比对 | 第29页 |
| 2. ORF 查找 | 第29页 |
| 3、蛋白质结构预测 | 第29-30页 |
| 4、蛋白质性质与功能分析 | 第30页 |
| 5、系统进化树构建 | 第30页 |
| 七、水稻Ospgip1 基因的时空表达 | 第30-31页 |
| （一） 总RNA 提取 | 第30-31页 |
| （二） 反转录PCR（RT-PCR） | 第31页 |
| （三） 荧光定量PCR（Real Time PCR） | 第31页 |
| 八、水稻 Ospgip1 基因的诱导表达 | 第31-33页 |
| （一） 黄化处理 | 第31-32页 |
| （二） 病菌接种 | 第32-33页 |
| 结果与分析 | 第33-47页 |
| 一、水稻Ospgip1 基因的克隆与序列分析 | 第33-44页 |
| （一） 基因组 DNA 提取 | 第33-34页 |
| （二） Ospgip1 基因克隆 | 第34-35页 |
| （三） Ospgip1 序列分析 | 第35-44页 |
| 1.O RF 与序列相似性 | 第35页 |
| 2、蛋白质一级结构 | 第35-37页 |
| 3、蛋白质二级结构 | 第37-38页 |
| 4、蛋白质三级结构 | 第38-39页 |
| 5、蛋白质性质与功能 | 第39-43页 |
| 6、系统进化 | 第43-44页 |
| 二、水稻 Ospgip1 基因的时空表达 | 第44-46页 |
| （一） 不同品种、不同生育期、不同部位 Ospgip1 的表达 | 第44-45页 |
| （二） 不同品种、不同生育期茎部Ospgip1 表达量的差异 | 第45-46页 |
| 三、水稻 Ospgip1 基因的诱导表达 | 第46-47页 |
| （一） 黄化处理对Ospgip1 表达的诱导 | 第46页 |
| （二） 纹枯病菌侵染对 Ospgip1 表达的诱导 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-52页 |
| 一、水稻 Ospgip1 基因及其产物的特征 | 第47-48页 |
| （一） 序列与结构 | 第47-48页 |
| （二） 系统进化 | 第48页 |
| 二、水稻 Ospgip1 基因的表达 | 第48-50页 |
| （一） 时空表达 | 第48-49页 |
| （二） 诱导表达 | 第49-50页 |
| 三、水稻 Ospgip1 基因的功能 | 第50-51页 |
| 四、Ospgip1 基因在水稻抗病育种中的利用 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
