中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分:rHSG 基因在COPD 模型大鼠气道成纤维细胞中的表达研究 | 第13-20页 |
1 材料与仪器 | 第13-15页 |
2 试验方法 | 第15-16页 |
·制造COPD 大鼠模型 | 第15页 |
·组织标本采集及原代培养 | 第15-16页 |
·时差贴壁法纯化成纤维细胞 | 第16页 |
·成纤维细胞的鉴定 | 第16页 |
·免疫组化检测大鼠气道成纤维细胞中的rHSG 表达 | 第16页 |
3 结果 | 第16-20页 |
·COPD 大鼠造模结果 | 第16-18页 |
·COPD 大鼠和正常大鼠气道成纤维细胞原代培养及纯化结果 | 第18页 |
·成纤维细胞鉴定结果 | 第18页 |
·免疫组化检测两组细胞中rHSG 蛋白表达 | 第18-20页 |
第二部分:pEGFP-hHSG 体外转染对COPD 气道成纤维细胞生长影响 | 第20-34页 |
一、质粒pEGFP-111、pEGFP-hHSG 的转化、扩增、鉴定、抽提 | 第20-28页 |
1 材料与仪器 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-25页 |
·用氯化钙法制备感受细胞 | 第22-23页 |
·质粒转化 | 第23页 |
·质粒扩增 | 第23页 |
·质粒抽提 | 第23-24页 |
·质粒 DNA 纯度和浓度的测定 | 第24-25页 |
·质粒鉴定 | 第25页 |
3 结果 | 第25-28页 |
·pEGFP-hHSG 、pEGFP-111 转染级质粒纯度和浓度测定 | 第25页 |
·pEGFP-hHSG的酶切鉴定结果 | 第25-26页 |
·目的 DNA 测序结果 | 第26-28页 |
二、pEGFP-hHSG 体外转染对COPD 气道成纤维细胞生长影响 | 第28-34页 |
1 材料与仪器 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-30页 |
·脂质体介导的基因转染 | 第29页 |
·免疫组化检测转然后细胞与空白对照组中hHSG 表达 | 第29-30页 |
3 观察指标 | 第30页 |
·荧光显微镜观察转染情况 | 第30页 |
·细胞计数 | 第30页 |
·MTT 实验及细胞生长曲线的测定 | 第30页 |
4 结果 | 第30-34页 |
·荧光显微镜观察转染情况 | 第30-31页 |
·免疫组化检测结果 | 第31页 |
·细胞计数结果 | 第31-32页 |
·MTT 实验及细胞生长曲线描绘 | 第32-34页 |
讨论 | 第34-36页 |
第一部分:rHSG 基因在 COPD 模型大鼠气道成纤维细胞中的表 达研究 | 第34-35页 |
第二部分: pEGFP-hHSG 体外转染对 COPD 患者气道成纤维细 胞增值影响 | 第35-36页 |
全文总结与展望 | 第36-39页 |
参考文献 | 第39-41页 |
附录一 缩略语表 | 第41-42页 |
附录二 综述 | 第42-46页 |
参考文献 | 第45-46页 |
附录三 致谢 | 第46-47页 |
附录四 个人简介 | 第47-49页 |