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转染HSG基因干预COPD气道成纤维细胞增殖的研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
前言第11-13页
第一部分:rHSG 基因在COPD 模型大鼠气道成纤维细胞中的表达研究第13-20页
 1 材料与仪器第13-15页
 2 试验方法第15-16页
   ·制造COPD 大鼠模型第15页
   ·组织标本采集及原代培养第15-16页
   ·时差贴壁法纯化成纤维细胞第16页
   ·成纤维细胞的鉴定第16页
   ·免疫组化检测大鼠气道成纤维细胞中的rHSG 表达第16页
 3 结果第16-20页
   ·COPD 大鼠造模结果第16-18页
   ·COPD 大鼠和正常大鼠气道成纤维细胞原代培养及纯化结果第18页
   ·成纤维细胞鉴定结果第18页
   ·免疫组化检测两组细胞中rHSG 蛋白表达第18-20页
第二部分:pEGFP-hHSG 体外转染对COPD 气道成纤维细胞生长影响第20-34页
 一、质粒pEGFP-111、pEGFP-hHSG 的转化、扩增、鉴定、抽提第20-28页
  1 材料与仪器第20-22页
  2 实验方法第22-25页
   ·用氯化钙法制备感受细胞第22-23页
   ·质粒转化第23页
   ·质粒扩增第23页
   ·质粒抽提第23-24页
   ·质粒 DNA 纯度和浓度的测定第24-25页
   ·质粒鉴定第25页
  3 结果第25-28页
   ·pEGFP-hHSG 、pEGFP-111 转染级质粒纯度和浓度测定第25页
   ·pEGFP-hHSG的酶切鉴定结果第25-26页
   ·目的 DNA 测序结果第26-28页
 二、pEGFP-hHSG 体外转染对COPD 气道成纤维细胞生长影响第28-34页
  1 材料与仪器第28-29页
  2 实验方法第29-30页
   ·脂质体介导的基因转染第29页
   ·免疫组化检测转然后细胞与空白对照组中hHSG 表达第29-30页
  3 观察指标第30页
   ·荧光显微镜观察转染情况第30页
   ·细胞计数第30页
   ·MTT 实验及细胞生长曲线的测定第30页
  4 结果第30-34页
   ·荧光显微镜观察转染情况第30-31页
   ·免疫组化检测结果第31页
   ·细胞计数结果第31-32页
   ·MTT 实验及细胞生长曲线描绘第32-34页
讨论第34-36页
 第一部分:rHSG 基因在 COPD 模型大鼠气道成纤维细胞中的表 达研究第34-35页
 第二部分: pEGFP-hHSG 体外转染对 COPD 患者气道成纤维细 胞增值影响第35-36页
全文总结与展望第36-39页
参考文献第39-41页
附录一 缩略语表第41-42页
附录二 综述第42-46页
 参考文献第45-46页
附录三 致谢第46-47页
附录四 个人简介第47-49页

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