| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-24页 |
| ·内酯水解酶 | 第11页 |
| ·镰孢霉菌内酯水解酶 | 第11-21页 |
| ·镰孢霉菌内酯水解酶的发现 | 第11-13页 |
| ·镰孢霉菌内酯水解酶的筛选 | 第13-14页 |
| ·镰孢霉菌内酯水解酶的固定化 | 第14-15页 |
| ·镰孢霉菌内酯水解酶的纯化和表征 | 第15-18页 |
| ·镰孢霉菌内酯水解酶的克隆和表达 | 第18-21页 |
| ·本课题的主要内容和创新点 | 第21-24页 |
| 第2章 重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的制备 | 第24-42页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-27页 |
| ·菌株、培养基和检测试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备及分析软件 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的克隆 | 第25页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的表达 | 第25-26页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的表达优化 | 第26页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的纯化和催化性质 | 第26页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的活力检测 | 第26-27页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶拆分泛内酯 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-39页 |
| ·镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的克隆 | 第27-30页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的表达 | 第30-35页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的纯化和催化性质研究 | 第35-39页 |
| ·小结 | 第39-42页 |
| 第3章 重组内酯水解酶应用之一:手性 2-羟基-4-取代-4-丁内酯的合成 | 第42-75页 |
| ·手性 2-羟基-4-取代-4-丁内酯的研究综述 | 第42-48页 |
| ·研究价值 | 第42-43页 |
| ·合成方法 | 第43-45页 |
| ·构型确定 | 第45-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-53页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·2-羟基-4-取代-4-丁内酯的合成 | 第49-52页 |
| ·2-羟基-4-取代-4-丁内酯的拆分 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-62页 |
| ·结构表征 | 第53-55页 |
| ·调整反应条件改变顺式/反式内酯比例 | 第55-58页 |
| ·内酯环化条件的探索 | 第58-60页 |
| ·重组内酯水解酶催化2-羟基-4-取代-4-丁内酯的不对称水解 | 第60-62页 |
| ·拆分结果 | 第60-61页 |
| ·提高催化剂的上载量和重复利用 | 第61-62页 |
| ·酶促水解产物的构型表征 | 第62-70页 |
| ·相对构型的确定 | 第62-65页 |
| ·绝对构型的确定 | 第65-70页 |
| ·X-射线衍射法确定绝对构型 | 第65-68页 |
| ·化学相关法确定绝对构型 | 第68-69页 |
| ·圆二色光谱法确定绝对构型 | 第69-70页 |
| ·案例分析—Harzialactone A的合成 | 第70-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第4章 重组内酯水解酶应用之二:手性 2-羟基-4-苯基丁酸的合成 | 第75-89页 |
| ·手性2-羟基-4-苯基丁酸的研究综述 | 第75-81页 |
| ·材料与方法 | 第81-83页 |
| ·主要实验试剂 | 第81-82页 |
| ·主要实验仪器 | 第82页 |
| ·2-羟基-4-苯基-4-丁内酯的合成 | 第82页 |
| ·重组镰孢霉菌ECU2002内酯水解酶的制备 | 第82页 |
| ·2-羟基-4-苯基丁酸的合成 | 第82-83页 |
| ·结果与讨论 | 第83-88页 |
| ·以顺反内酯的混合物作为酶促水解的底物 | 第84-86页 |
| ·筛选高效的生物催化剂 | 第86-88页 |
| ·小结 | 第88-89页 |
| 第5章 结论和创新点 | 第89-93页 |
| ·主要结论 | 第89-90页 |
| ·展望 | 第90-93页 |
| 参考文献 | 第93-101页 |
| 攻读博士学位期间撰写的论文及专利 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 附录 | 第103-158页 |
