| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1. 材料，试剂和仪器 | 第12-19页 |
| ·主要试剂 | 第12-14页 |
| ·菌株 | 第14页 |
| ·质粒 | 第14-16页 |
| ·DNA 测序 | 第16页 |
| ·蛋白质谱鉴定 | 第16页 |
| ·抗体制作 | 第16页 |
| ·主要试剂的配制 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17-19页 |
| 2. 实验路线设计图 | 第19-20页 |
| 3. 实验方法与步骤 | 第20-31页 |
| ·克隆目的基因NDNF 构建载体 | 第20-24页 |
| ·PCR 扩增目的条带 | 第20-21页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第21-22页 |
| ·回收产物进行双酶切 | 第22页 |
| ·酶切后产物回收纯化 | 第22页 |
| ·产物与载体连接 | 第22-23页 |
| ·构建的载体转化入感受态细胞及质粒鉴定 | 第23-24页 |
| ·真核细胞表达目的蛋白NDNF | 第24-25页 |
| ·神经元细胞元代培养 | 第25-26页 |
| ·Transwell migration assay 分析NDNF 对神经元的迁移作用 | 第26页 |
| ·Western blot 检测目的蛋白NDNF | 第26-28页 |
| ·总蛋白的提取 | 第26-27页 |
| ·蛋白定量 | 第27页 |
| ·蛋白印迹具体步骤 | 第27-28页 |
| ·免疫共沉淀富集目的蛋白 | 第28-29页 |
| ·目的蛋白的糖基化检测 | 第29页 |
| ·Immunofluorence | 第29页 |
| ·Immuohistology | 第29-30页 |
| ·Nissle 染色 | 第30-31页 |
| 4 实验结果 | 第31-42页 |
| ·新基因的克隆及序列分析 | 第31-33页 |
| ·胞内定位与NDNF 的分泌特征 | 第33-34页 |
| ·原代培养的神经元 | 第34-35页 |
| ·Transwell migration assay 分析显示NDNF 可促进神经元的迁移和分化 | 第35-36页 |
| ·Western blot 研究表明NDNF 主要存在于神经系统 | 第36-37页 |
| ·Western blot 分析NDNF 的糖基化 | 第37-39页 |
| ·Immuofluornece 和 Immuohistology 研究NDNF 时间和空间表达的发育学特点 | 第39-40页 |
| ·NDNF 与脑片层发育之间的关系研究 | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 文献综述 | 第53-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
