| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 迟缓爱德华氏菌及其危害 | 第10页 |
| 1.2 1,6-二磷酸果糖醛缩酶 | 第10-11页 |
| 1.3 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 | 第11页 |
| 1.4 磷酸丙糖异构酶 | 第11-12页 |
| 1.5 磷酸甘油酸激酶 | 第12页 |
| 1.6 烯醇化酶 | 第12-13页 |
| 1.7 革兰氏阴性菌的分泌系统 | 第13-17页 |
| 1.7.1 分泌系统 | 第13-16页 |
| 1.7.2 一步分泌途径和两步分泌途径 | 第16-17页 |
| 1.8 探索蛋白间相互作用的方法 | 第17-20页 |
| 1.8.1 Pull-down实验 | 第18-19页 |
| 1.8.2 免疫共沉淀 | 第19-20页 |
| 1.9 本课题的研究内容及意义 | 第20-22页 |
| 第2章 糖酵解酶在不同来源爱德华氏菌中的定位 | 第22-30页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.2.1 菌株 | 第22页 |
| 2.2.2 培养基与溶液配制 | 第22页 |
| 2.2.3 实验试剂与仪器 | 第22-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 爱德华氏菌的培养 | 第24页 |
| 2.3.2 爱德华氏菌胞外蛋白和周质空间蛋白提取 | 第24-25页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE与免疫印迹实验 | 第25-27页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第27-28页 |
| 2.5 本章小结 | 第28-30页 |
| 第3章 迟缓爱德华氏菌EIB202持家酶分泌途径的筛查 | 第30-34页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.2.1 菌株 | 第30页 |
| 3.2.2 培养基与溶液配制 | 第30页 |
| 3.2.3 实验试剂与仪器 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第31-32页 |
| 3.5 本章小结 | 第32-34页 |
| 第4章 糖酵解酶在迟缓爱德华氏菌侵染和粘附宿主细胞中的作用 | 第34-40页 |
| 4.1 引言 | 第34页 |
| 4.2 实验材料 | 第34页 |
| 4.2.1 菌株与细胞 | 第34页 |
| 4.2.2 培养基与溶液配制 | 第34页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第34页 |
| 4.3 实验方法 | 第34-37页 |
| 4.3.1 HeLa细胞的复苏与传代 | 第34-35页 |
| 4.3.2 Bf-2细胞的复苏与传代 | 第35-36页 |
| 4.3.3 细胞侵染实验 | 第36-37页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第37-38页 |
| 4.5 本章小结 | 第38-40页 |
| 第5章 与FBA相互作用的蛋白筛选 | 第40-59页 |
| 5.1 引言 | 第40页 |
| 5.2 实验材料 | 第40-43页 |
| 5.2.1 菌株和质粒 | 第40页 |
| 5.2.2 引物 | 第40-41页 |
| 5.2.3 培养基与溶液配制 | 第41-43页 |
| 5.2.4 实验试剂 | 第43页 |
| 5.3 实验方法 | 第43-50页 |
| 5.3.1 His-tag Pull-down | 第43-44页 |
| 5.3.2 GST Pull-down和MBP Pull-down | 第44-47页 |
| 5.3.3 Flag标签的Co-IP实验 | 第47-50页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第50-57页 |
| 5.4.1 基于His-tag Pull-down的筛选 | 第50-51页 |
| 5.4.2 基于GST Pull-down和MBP Pull-down的筛选 | 第51-55页 |
| 5.4.3 基于FLAG标签的Co-IP筛选 | 第55-57页 |
| 5.6 本章小结 | 第57-59页 |
| 第6章 结论与展望 | 第59-60页 |
| 6.1 主要结论 | 第59页 |
| 6.2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
