摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第9-20页 |
1.1 2,3-丁二醇简介 | 第9-11页 |
1.1.1 2,3-丁二醇的理化性质 | 第9-10页 |
1.1.2 2,3-丁二醇的用途 | 第10-11页 |
1.2 生物法生产2,3-丁二醇 | 第11-15页 |
1.2.1 2,3-丁二醇的生产菌种 | 第12页 |
1.2.2 2,3-丁二醇的生产原料 | 第12-13页 |
1.2.3 2,3-丁二醇的代谢途径 | 第13-15页 |
1.3 利用木糖生产2,3-丁二醇 | 第15-17页 |
1.3.1 木糖概述 | 第15-16页 |
1.3.2 利用木糖生产2,3-丁二醇的研究现状 | 第16-17页 |
1.4 微生物生产2,3-丁二醇的影响因素 | 第17-18页 |
1.4.1 转数对发酵生产2,3-丁二醇的影响 | 第17页 |
1.4.2 pH对发酵生产2,3-丁二醇的影响 | 第17-18页 |
1.4.3 温度对发酵生产2,3-丁二醇的影响 | 第18页 |
1.4.4 通气量对发酵生产2,3-丁二醇的影响 | 第18页 |
1.5 研究背景及研究内容 | 第18-20页 |
1.5.1 研究背景 | 第18-19页 |
1.5.2 研究内容 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-43页 |
2.1 实验材料 | 第20-31页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第20-23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 主要培养基 | 第25-26页 |
2.1.5 主要溶液 | 第26页 |
2.1.6 引物 | 第26-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-43页 |
2.2.1 目的片段的获得 | 第31-34页 |
2.2.2 质粒的构建 | 第34-36页 |
2.2.3 菌株的构建 | 第36-37页 |
2.2.4 RT-PCR的方法 | 第37-40页 |
2.2.5 种子培养 | 第40页 |
2.2.6 发酵培养 | 第40页 |
2.2.7 菌体浓度的测定 | 第40-41页 |
2.2.8 高效液相色谱分析方法 | 第41-42页 |
2.2.9 发酵条件的优化 | 第42-43页 |
3 结果与讨论 | 第43-76页 |
3.1 高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌株基因的功能验证 | 第43-53页 |
3.1.1 过表达上调基因菌株的构建 | 第43-47页 |
3.1.2 敲除下调基因菌株的构建 | 第47-52页 |
3.1.3 RT-PCR验证 | 第52-53页 |
3.1.4 小结 | 第53页 |
3.2 响应面优化高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌株产2,3-丁二醇的发酵条件 | 第53-60页 |
3.2.1 单因素各个因子对发酵影响分析 | 第53-56页 |
3.2.2 响应面实验 | 第56-60页 |
3.2.3 验证实验 | 第60页 |
3.2.4 小结 | 第60页 |
3.3 高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌的代谢改造 | 第60-76页 |
3.3.1 敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc对产2,3-丁二醇的影响 | 第61-64页 |
3.3.2 敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶启动子对产2,3-丁二醇的影响 | 第64-68页 |
3.3.3 敲除富马酸还原酶基因frdA、frdBC对产2,3-丁二醇的影响 | 第68-72页 |
3.3.4 过表达2,3-丁二醇合成途径关键酶基因对产2,3-丁二醇的影响 | 第72-75页 |
3.3.5 小结 | 第75-76页 |
4 结论 | 第76-78页 |
4.1 全文总结 | 第76页 |
4.2 论文的创新点 | 第76-77页 |
4.3 论文的不足之处 | 第77-78页 |
5 展望 | 第78-79页 |
6 参考文献 | 第79-86页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第86-87页 |
8 致谢 | 第87页 |