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高效利用木糖产2,3-丁二醇Klebsiella pneumoniae的选育

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 前言第9-20页
    1.1 2,3-丁二醇简介第9-11页
        1.1.1 2,3-丁二醇的理化性质第9-10页
        1.1.2 2,3-丁二醇的用途第10-11页
    1.2 生物法生产2,3-丁二醇第11-15页
        1.2.1 2,3-丁二醇的生产菌种第12页
        1.2.2 2,3-丁二醇的生产原料第12-13页
        1.2.3 2,3-丁二醇的代谢途径第13-15页
    1.3 利用木糖生产2,3-丁二醇第15-17页
        1.3.1 木糖概述第15-16页
        1.3.2 利用木糖生产2,3-丁二醇的研究现状第16-17页
    1.4 微生物生产2,3-丁二醇的影响因素第17-18页
        1.4.1 转数对发酵生产2,3-丁二醇的影响第17页
        1.4.2 pH对发酵生产2,3-丁二醇的影响第17-18页
        1.4.3 温度对发酵生产2,3-丁二醇的影响第18页
        1.4.4 通气量对发酵生产2,3-丁二醇的影响第18页
    1.5 研究背景及研究内容第18-20页
        1.5.1 研究背景第18-19页
        1.5.2 研究内容第19-20页
2 材料与方法第20-43页
    2.1 实验材料第20-31页
        2.1.1 菌株及质粒第20-23页
        2.1.2 主要试剂第23-24页
        2.1.3 主要仪器第24-25页
        2.1.4 主要培养基第25-26页
        2.1.5 主要溶液第26页
        2.1.6 引物第26-31页
    2.2 实验方法第31-43页
        2.2.1 目的片段的获得第31-34页
        2.2.2 质粒的构建第34-36页
        2.2.3 菌株的构建第36-37页
        2.2.4 RT-PCR的方法第37-40页
        2.2.5 种子培养第40页
        2.2.6 发酵培养第40页
        2.2.7 菌体浓度的测定第40-41页
        2.2.8 高效液相色谱分析方法第41-42页
        2.2.9 发酵条件的优化第42-43页
3 结果与讨论第43-76页
    3.1 高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌株基因的功能验证第43-53页
        3.1.1 过表达上调基因菌株的构建第43-47页
        3.1.2 敲除下调基因菌株的构建第47-52页
        3.1.3 RT-PCR验证第52-53页
        3.1.4 小结第53页
    3.2 响应面优化高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌株产2,3-丁二醇的发酵条件第53-60页
        3.2.1 单因素各个因子对发酵影响分析第53-56页
        3.2.2 响应面实验第56-60页
        3.2.3 验证实验第60页
        3.2.4 小结第60页
    3.3 高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌的代谢改造第60-76页
        3.3.1 敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc对产2,3-丁二醇的影响第61-64页
        3.3.2 敲除磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶启动子对产2,3-丁二醇的影响第64-68页
        3.3.3 敲除富马酸还原酶基因frdA、frdBC对产2,3-丁二醇的影响第68-72页
        3.3.4 过表达2,3-丁二醇合成途径关键酶基因对产2,3-丁二醇的影响第72-75页
        3.3.5 小结第75-76页
4 结论第76-78页
    4.1 全文总结第76页
    4.2 论文的创新点第76-77页
    4.3 论文的不足之处第77-78页
5 展望第78-79页
6 参考文献第79-86页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第86-87页
8 致谢第87页

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