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白籽仁粗多糖的提取优化及其免疫活性研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第10-18页
    1.1 白籽仁第10-11页
        1.1.1 概述及资源分布第10页
        1.1.2 化学成分第10页
        1.1.3 生物活性第10-11页
    1.2 多糖研究进展第11-14页
        1.2.1 多糖的概述第11页
        1.2.2 多糖的研究现状第11页
        1.2.3 多糖的生物活性第11-13页
        1.2.4 多糖的应用第13-14页
    1.3 多糖的提取技术第14-16页
        1.3.1 热水浸提法第15页
        1.3.2 酸、碱浸提法第15页
        1.3.3 酶提取法第15页
        1.3.4 超声波、微波提取法第15-16页
        1.3.5 超临界流体提取法第16页
    1.4 免疫系统及免疫活性第16-17页
        1.4.1 特异性免疫第16页
        1.4.2 非特异性免疫第16页
        1.4.3 实验动物及免疫抑制剂的选择第16-17页
    1.5 本论文研究意义及内容第17-18页
        1.5.1 本论文的研究意义第17页
        1.5.2 本论文的研究内容第17-18页
2 材料与方法第18-28页
    2.1 实验材料第18-20页
        2.1.1 实验原料第18页
        2.1.2 实验动物第18页
        2.1.3 主要仪器及设备第18-19页
        2.1.4 主要试剂及材料第19-20页
    2.2 白籽仁基本成分的测定第20页
    2.3 多糖含量的测定第20-21页
        2.3.1 苯酚-硫酸法测总糖第20页
        2.3.2 DNS(3,5-二硝基水扬酸)法测还原糖第20-21页
    2.4 白籽仁粗多糖提取工艺优化第21-23页
        2.4.1 原料预处理第21页
        2.4.2 白籽仁粗多糖的提取步骤第21页
        2.4.3 白籽仁复水条件的确定第21页
        2.4.5 单因素实验方法第21-22页
        2.4.6 响应面优化实验第22页
        2.4.7 醇沉条件的优化第22页
        2.4.8 白籽仁粗多糖成分的测定第22-23页
    2.5 白籽仁粗多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用第23-25页
        2.5.1 模型的建立及给药方式第23页
        2.5.2 小鼠免疫器官指数的测定第23页
        2.5.3 免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验第23-24页
        2.5.4 免疫低下小鼠脾脏中淋巴细胞转化实验第24页
        2.5.5 免疫低下小鼠NK细胞杀伤活性的测定第24-25页
        2.5.6 免疫低下小鼠肝脏及血清中酶活力的测定第25页
    2.6 免疫低下小鼠脾脏中细胞因子RNA表达量的测定第25-27页
        2.6.1 实验准备第25页
        2.6.2 引物设计第25-26页
        2.6.3 脾脏总RNA的提取第26页
        2.6.4 荧光定量PCR的反应体系及扩增程序第26-27页
    2.7 数据处理及统计学分析第27-28页
3 结果与讨论第28-48页
    3.1 苯酚-硫酸法甘露糖标准曲线的绘制第28页
    3.2 DNS法甘露糖标准曲线的绘制第28-29页
    3.3 白籽仁基本成分的测定第29页
    3.4 白籽仁复水条件的确定第29-30页
        3.4.1 温度对白籽仁复水的影响第29页
        3.4.2 时间对白籽仁复水的影响第29-30页
        3.4.3 液料比对白籽仁复水的影响第30页
    3.5 白籽仁粗多糖提取单因素水平实验第30-33页
        3.5.1 提取温度对多糖提取得率的影响第30-31页
        3.5.2 提取时间对多糖提取得率的影响第31-32页
        3.5.3 液料比对多糖提取得率的影响第32页
        3.5.4 提取次数对多糖提取得率的影响第32-33页
    3.6 白籽仁粗多糖提取响应面实验设计及结果第33-35页
        3.6.1 数学模型的建立和数据分析第33-34页
        3.6.2 响应面图与等高线图分析第34-35页
        3.6.3 最优工艺条件的预测及验证第35页
    3.7 醇沉条件的优化第35-36页
        3.7.1 浓缩比对多糖得率和含量的影响第35-36页
        3.7.2 醇沉浓度对多糖得率和含量的影响第36页
    3.8 白籽仁粗多糖成分测定第36-37页
    3.9 白籽仁粗多糖对免疫抑制小鼠免疫活性的研究第37-43页
        3.9.1 白籽仁粗多糖对免疫抑制小鼠体重及脏器指数的影响第37-38页
        3.9.2 白籽仁粗多糖对免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力的影响第38页
        3.9.3 白籽仁粗多糖对免疫抑制小鼠脾脏中NK细胞杀伤活性的影响第38-39页
        3.9.4 白籽仁粗多糖对免疫抑制小鼠脾脏中淋巴细胞增殖能力的影响第39-40页
        3.9.5 白籽仁粗多糖对免疫抑制小鼠肝脏及血清中酶活力的影响第40-43页
    3.10 实时荧光定量PCR法评价白籽仁粗多糖对免疫抑制小鼠脾脏中细胞因子RNA表达量的影响第43-48页
        3.10.1 脾脏中IL-2基因相对于β-actin的表达量第43-44页
        3.10.2 脾脏中IL-6基因相对于β-actin的表达量第44页
        3.10.3 脾脏中Bcl-xL基因相对于β-actin的表达量第44-45页
        3.10.4 脾脏中IFN-γ基因相对于β-actin的表达量第45-46页
        3.10.5 脾脏中Cox-2基因相对于β-actin的表达量第46页
        3.10.6 脾脏中Mcl-1基因相对于β-actin的表达量第46-48页
4 结论第48-49页
    4.1 全文总结第48页
    4.2 论文创新点第48页
    4.3 论文的不足之处第48-49页
5 展望第49-50页
6 参考文献第50-57页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第57-58页
8 致谢第58页

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