中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第8-11页 |
前言 | 第11-14页 |
研究现状、成果 | 第11-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
1 对象和方法 | 第14-30页 |
1.1 材料 | 第14-16页 |
1.1.1 材料来源 | 第14页 |
1.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
1.1.3 主要实验仪器 | 第15-16页 |
1.2 方法 | 第16-30页 |
1.2.1 pLenti-miR-29c质粒的构建 | 第16-19页 |
1.2.2 重组慢病毒Lv-miR-29c的包装和滴度测定 | 第19-22页 |
1.2.3 Real-time PCR检测Lv-miR-29c在MLE-12细胞表达情况 | 第22-24页 |
1.2.4 实验小鼠分组与处理 | 第24-25页 |
1.2.5 Real-time PCR检测小鼠肺组织中miR-29c、β-catenin、MMP2和MMP9的mRNA表达 | 第25-26页 |
1.2.6 Western blot检测小鼠肺组织中β-catenin、MMP2和MMP9的蛋白表达 | 第26-28页 |
1.2.7 ELISA检测小鼠肺泡灌洗液中TGF-β1和IL-6分泌水平 | 第28-29页 |
1.2.8 羟脯氨酸含量测定 | 第29-30页 |
1.3 统计学分析 | 第30页 |
2 结果 | 第30-51页 |
2.1 构建小鼠miR-29c过表达慢病毒载体 | 第30-33页 |
2.1.1 小鼠miR-29c的PCR扩增结果 | 第30-31页 |
2.1.2 pLent-miR-29c质粒阳性克隆的PCR鉴定及测序结果 | 第31-32页 |
2.1.3 Lv-miR-29c慢病毒滴度测定结果 | 第32页 |
2.1.4 重组慢病毒Lv-miR-29c在小鼠MLE-12细胞表达 | 第32-33页 |
2.2 Lv-miR-29c在小鼠矽肺模型中增加miR-29c的表达水平 | 第33-34页 |
2.2.1 染尘7天各组小鼠肺组织中miR-29c的表达水平 | 第33页 |
2.2.2 染尘14天各组小鼠肺组织中miR-29c的表达水平 | 第33-34页 |
2.2.3 染尘28天各组小鼠肺组织中miR-29c的表达水平 | 第34页 |
2.3 过表达miR-29c对小鼠矽肺模型中Wnt/β-catenin相关基因的影响 | 第34-44页 |
2.3.1 Lv-miR-29c抑制SiO2诱导的小鼠肺组织中β-catenin的表达水平 | 第34-38页 |
2.3.2 Lv-miR-29c抑制SiO2诱导的小鼠肺组织中MMP2的表达水平·· | 第38-41页 |
2.3.3 Lv-miR-29c抑制SiO2诱导的小鼠肺组织中MMP9的表达水平·· | 第41-44页 |
2.4 过表达miR-29c对小鼠矽肺模型早期细胞因子的影响 | 第44-45页 |
2.4.1 ELISA检测各组BLAF中TGF-β1分泌水平 | 第44-45页 |
2.4.2 ELISA检测各组BLAF中IL-6分泌水平 | 第45页 |
2.5 过表达miR-29c对小鼠矽肺纤维化的影响 | 第45-51页 |
2.5.1 各组小鼠不同时间点肺脏器系数值 | 第45-46页 |
2.5.2 各组小鼠肺组织羟脯胺酸含量的变化 | 第46-47页 |
2.5.3 各组小鼠肺组织病理形态学观察 | 第47-51页 |
3 讨论 | 第51-59页 |
3.1 miR-29对Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第51-55页 |
3.2 miR-29对促纤维化因子的影响 | 第55-56页 |
3.3 miR-29与Wnt/β-catenin信号通路及促细胞因子之间的关系 | 第56-57页 |
3.4 过表达miR-29对小鼠矽肺纤维化的影响 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第68-69页 |
综述 miR-29在肺纤维化中作用及机制 | 第69-81页 |
综述参考文献 | 第74-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82页 |