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牛IRF3和IRF7启动子活性分析

摘要第9-10页
英文摘要第10页
1 前言第12-17页
    1.1 真核生物的转录调控第12页
    1.2 干扰素的研究第12-13页
    1.3 诱导干扰素表达的信号通路研究第13页
    1.4 干扰素调节因子的研究第13-14页
    1.5 IRF3和IRF7的研究进展第14-16页
    1.6 研究的目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-32页
    2.1 材料第17-18页
        2.1.1 宿主菌液、质粒、载体第17页
        2.1.2 细胞、病毒、培养基、血清第17页
        2.1.3 实验动物第17页
        2.1.4 主要试剂和仪器第17-18页
    2.2 方法第18-32页
        2.2.1 犊牛不同组织IRF3和IRF7的分布情况第18-20页
        2.2.2 IRF3和IRF7基因的原核表达及多克隆抗体的制备第20-22页
        2.2.3 IRF3启动子序列功能鉴定第22-24页
        2.2.4 IRF3基因启动子核心功能区域鉴定第24-25页
        2.2.5 IRF7启动子序列功能区域鉴定第25-27页
        2.2.6 IRF7基因启动子核心功能区域鉴定第27-29页
        2.2.7 转录正调控元件的确定第29-31页
        2.2.8 统计学方法第31-32页
3 结果与分析第32-50页
    3.1 犊牛不同组织IRF3和IRF7的分布情况第32页
    3.2 IRF3和IRF7原核的表达及多克隆抗体的制备第32-36页
        3.2.1 IRF3和IRF7基因序列的分析第32-33页
        3.2.2 IRF3和IRF7基因的克隆及鉴定第33-34页
        3.2.3 IRF3和IRF7蛋白的表达及纯化第34-35页
        3.2.4 重组蛋白pET30a-IRF3和pET32a-IRF7多抗的制备第35-36页
    3.3 IRF3启动子序列功能鉴定第36-37页
        3.3.1 IRF3启动子基因的扩增第36页
        3.3.2 IRF3启动子双荧光素酶载体的构建第36-37页
        3.3.3 IRF3启动子功能的鉴定第37页
    3.4 IRF3基因启动子核心功能区域鉴定第37-39页
        3.4.1 IRF3启动子截短片段双荧光素酶载体的构建第37-38页
        3.4.2 IRF3基因启动子核心功能区鉴定第38-39页
    3.5 IRF7启动子序列功能鉴定第39-41页
        3.5.1 IRF7启动子基因的扩增第39-40页
        3.5.2 IRF7启动子双荧光素酶载体的构建第40页
        3.5.3 IRF7启动子功能序列鉴定第40-41页
    3.6 IRF7基因启动子核心功能区域鉴定第41-44页
        3.6.1 IRF7启动子截短片段双荧光素酶载体的构建第41-42页
        3.6.2 IRF7启动子核心功能区域的鉴定第42-44页
    3.7 转录正调控元件的确定第44-50页
        3.7.1 转录因子SP1和STAT1基因的克隆第44-45页
        3.7.2 转录因子SP1和STAT1真核表达载体的构建第45-46页
        3.7.3 过表达STAT1和SP1对IRF7的影响第46-48页
        3.7.4 转录因子STAT1和SP1干扰载体的构建第48页
        3.7.5 STAT1和SP1干扰载体对IRF7的影响第48-50页
4 讨论第50-53页
    4.1 IRF3和IRF7的组织分布第50页
    4.2 IRF3和IRF7的抗原优势区第50页
    4.3 IRF7核心转录调控区域第50-51页
    4.4 IRF7核心转录调控区域第51页
    4.5 转录因子SP1和STAT1对IRF7转录调控的影响第51-52页
    4.6 SP1和STAT1干扰方式的选择第52-53页
5 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-61页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第61页

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