摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
1 前言 | 第12-17页 |
1.1 真核生物的转录调控 | 第12页 |
1.2 干扰素的研究 | 第12-13页 |
1.3 诱导干扰素表达的信号通路研究 | 第13页 |
1.4 干扰素调节因子的研究 | 第13-14页 |
1.5 IRF3和IRF7的研究进展 | 第14-16页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-32页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 宿主菌液、质粒、载体 | 第17页 |
2.1.2 细胞、病毒、培养基、血清 | 第17页 |
2.1.3 实验动物 | 第17页 |
2.1.4 主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-32页 |
2.2.1 犊牛不同组织IRF3和IRF7的分布情况 | 第18-20页 |
2.2.2 IRF3和IRF7基因的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第20-22页 |
2.2.3 IRF3启动子序列功能鉴定 | 第22-24页 |
2.2.4 IRF3基因启动子核心功能区域鉴定 | 第24-25页 |
2.2.5 IRF7启动子序列功能区域鉴定 | 第25-27页 |
2.2.6 IRF7基因启动子核心功能区域鉴定 | 第27-29页 |
2.2.7 转录正调控元件的确定 | 第29-31页 |
2.2.8 统计学方法 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-50页 |
3.1 犊牛不同组织IRF3和IRF7的分布情况 | 第32页 |
3.2 IRF3和IRF7原核的表达及多克隆抗体的制备 | 第32-36页 |
3.2.1 IRF3和IRF7基因序列的分析 | 第32-33页 |
3.2.2 IRF3和IRF7基因的克隆及鉴定 | 第33-34页 |
3.2.3 IRF3和IRF7蛋白的表达及纯化 | 第34-35页 |
3.2.4 重组蛋白pET30a-IRF3和pET32a-IRF7多抗的制备 | 第35-36页 |
3.3 IRF3启动子序列功能鉴定 | 第36-37页 |
3.3.1 IRF3启动子基因的扩增 | 第36页 |
3.3.2 IRF3启动子双荧光素酶载体的构建 | 第36-37页 |
3.3.3 IRF3启动子功能的鉴定 | 第37页 |
3.4 IRF3基因启动子核心功能区域鉴定 | 第37-39页 |
3.4.1 IRF3启动子截短片段双荧光素酶载体的构建 | 第37-38页 |
3.4.2 IRF3基因启动子核心功能区鉴定 | 第38-39页 |
3.5 IRF7启动子序列功能鉴定 | 第39-41页 |
3.5.1 IRF7启动子基因的扩增 | 第39-40页 |
3.5.2 IRF7启动子双荧光素酶载体的构建 | 第40页 |
3.5.3 IRF7启动子功能序列鉴定 | 第40-41页 |
3.6 IRF7基因启动子核心功能区域鉴定 | 第41-44页 |
3.6.1 IRF7启动子截短片段双荧光素酶载体的构建 | 第41-42页 |
3.6.2 IRF7启动子核心功能区域的鉴定 | 第42-44页 |
3.7 转录正调控元件的确定 | 第44-50页 |
3.7.1 转录因子SP1和STAT1基因的克隆 | 第44-45页 |
3.7.2 转录因子SP1和STAT1真核表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.7.3 过表达STAT1和SP1对IRF7的影响 | 第46-48页 |
3.7.4 转录因子STAT1和SP1干扰载体的构建 | 第48页 |
3.7.5 STAT1和SP1干扰载体对IRF7的影响 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 IRF3和IRF7的组织分布 | 第50页 |
4.2 IRF3和IRF7的抗原优势区 | 第50页 |
4.3 IRF7核心转录调控区域 | 第50-51页 |
4.4 IRF7核心转录调控区域 | 第51页 |
4.5 转录因子SP1和STAT1对IRF7转录调控的影响 | 第51-52页 |
4.6 SP1和STAT1干扰方式的选择 | 第52-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |