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猪丁型冠状病毒检测方法的建立及JS-LYG-2014毒株的分离与鉴定

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
符号及缩略语第11-12页
绪论第12-14页
文献综述第14-26页
    1 猪丁型冠状病毒的发现与流行情况第14-16页
        1.1 发现过程第14-15页
        1.2 流行情况第15-16页
    2 猪丁型冠状病毒基因组特点及致病性第16-17页
        2.1 猪丁型冠状病毒基因组特点第16-17页
        2.2 临床症状及病理变化第17页
    3 猪丁型冠状病毒诊断方法的研究进展第17-22页
        3.1 病毒性方法第18-20页
        3.2 血清学方法第20-22页
    参考文献第22-26页
第一章 猪丁型冠状病毒RT-PCR检测方法的建立与应用第26-38页
    1 材料和方法第27-30页
        1.1 病料样品及主要实验材料第27页
        1.2 主要实验试剂及仪器设备第27页
        1.3 引物的设计与合成第27页
        1.4 病料样品的处理第27-28页
        1.5 病毒RNA提取及模板cDNA的制备第28页
        1.6 RT-PCR检测方法的优化第28页
        1.7 特异性试验第28页
        1.8 敏感性试验第28-29页
        1.9 PCR方法的可靠性检测第29页
        1.10 临床样品检测第29-30页
    2 结果第30-33页
        2.1 RT-PCR检测方法的建立及反应条件的优化第30页
        2.2 特异性试验第30-31页
        2.3 敏感性试验第31-32页
        2.4 可靠性检测第32页
        2.5 临床样品的检测第32-33页
    3 讨论第33-35页
    参考文献第35-38页
第二章 猪丁型冠状病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与应用第38-56页
    1 材料与方法第38-42页
        1.1 病料第39页
        1.2 主要试剂及仪器设备第39页
        1.3 PDCoV N基因的扩增第39页
        1.4 N基因的测序第39页
        1.5 pCold 1-N/BL21重组质粒的构建第39-40页
        1.6 重组N蛋白的表达第40页
        1.7 蛋白纯化第40页
        1.8 Western Blot第40页
        1.9 PDCoV重组N蛋白间接ELISA方法的建立第40-42页
    2 结果第42-51页
        2.1 PDCoV N基因RT-PCR扩增第42-43页
        2.2 PDCoV N基因原核表达体系的构建第43-44页
        2.3 重组N蛋白的原核表达第44页
        2.4 蛋白纯化第44-45页
        2.5 重组N蛋白的Western Blot验证第45-46页
        2.6 PDCoV重组N蛋白间接ELISA方法的建立第46-51页
    3 讨论第51-53页
    参考文献第53-56页
第三章 猪丁型冠状病毒JS-LYG-2014毒株的分离与鉴定第56-76页
    1 材料和方法第57-61页
        1.1 病料第57页
        1.2 仔猪及细胞第57页
        1.3 主要试剂及仪器设备第57页
        1.4 病毒分离及PCR鉴定第57-58页
        1.5 JS-LYG-2014分离株基因组特征第58-60页
        1.6 JS-LYG-2014分离株致病性实验第60-61页
    2 结果第61-71页
        2.1 病毒分离及PCR鉴定第61-62页
        2.2 JS-LYG-2014分离株基因组特征第62-68页
        2.3 JS-LYG-2014分离株致病性实验第68-71页
    3 讨论第71-73页
    参考文献第73-76页
结论与展望第76-78页
附录 常用试剂配方第78-82页
致谢第82-84页
个人简历、硕士期间论文发表第84页

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