| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| 英文摘要 | 第13-18页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 文献回顾 | 第21-30页 |
| 第一部分 上皮间质转化模型中线粒体与ROS的变化 | 第30-50页 |
| 1 材料 | 第30-32页 |
| 2 方法 | 第32-36页 |
| 2.1 细胞培养及传代 | 第32页 |
| 2.2 CCK8法测定细胞活力 | 第32-33页 |
| 2.3 细胞凋亡检测 | 第33页 |
| 2.4 蛋白提取 | 第33页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹法 | 第33-34页 |
| 2.6 活性氧及线粒体活性氧测定 | 第34页 |
| 2.7 线粒体膜电位测定 | 第34页 |
| 2.8 细胞内ATP含量测定 | 第34页 |
| 2.9 液相悬液芯片系统测定蛋白表达 | 第34-35页 |
| 2.10 透射电镜观察线粒体 | 第35页 |
| 2.11 细胞耗氧率检测 | 第35页 |
| 2.12 总RNA提取及反转录、PCR | 第35页 |
| 2.13 统计学处理 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-47页 |
| 3.1 细胞形态以及细胞活力变化 | 第36-37页 |
| 3.2 上皮细胞间质化的标志物测定 | 第37-39页 |
| 3.3 上皮间质转化过程中的活性氧及抗氧化酶的表达 | 第39-40页 |
| 3.4 上皮间质转化过程中线粒体的作用 | 第40-44页 |
| 3.5 上皮间质转化过程中线粒体数量及相关蛋白的变化 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 第二部分 线粒体功能与ROS对上皮间质转化的调控 | 第50-59页 |
| 1 材料 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-51页 |
| 2.1 细胞培养及传代 | 第50页 |
| 2.2 CCK8法测定细胞活力 | 第50页 |
| 2.3 细胞凋亡检测 | 第50页 |
| 2.4 蛋白提取 | 第50页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹法 | 第50-51页 |
| 2.6 活性氧及线粒体活性氧测定 | 第51页 |
| 2.7 线粒体膜电位测定 | 第51页 |
| 2.8 细胞内ATP含量测定 | 第51页 |
| 2.9 液相悬液芯片系统测定蛋白表达 | 第51页 |
| 2.10 总RNA提取及反转录、PCR | 第51页 |
| 2.11 SOD活性检测 | 第51页 |
| 2.12 线粒体形态检测 | 第51页 |
| 2.13 统计学方法 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-57页 |
| 3.1 鱼藤酮对细胞线粒体功能的损伤作用 | 第51-53页 |
| 3.2 鱼藤酮干预与上皮间质转化 | 第53-54页 |
| 3.3 MnSOD模拟物MnTmPyP干预活性氧水平 | 第54-55页 |
| 3.4 MnSOD模拟物MnTmPyP干预上皮间质转化过程 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 第三部分 线粒体功能保护对上皮间质转化的作用 | 第59-71页 |
| 1 材料 | 第59页 |
| 2 方法 | 第59-60页 |
| 2.1 细胞培养及传代 | 第59页 |
| 2.2 CCK8法测定细胞活力 | 第59页 |
| 2.3 细胞凋亡检测 | 第59页 |
| 2.4 蛋白提取 | 第59页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹法 | 第59页 |
| 2.6 活性氧及线粒体活性氧测定 | 第59-60页 |
| 2.7 线粒体膜电位测定 | 第60页 |
| 2.8 细胞内ATP含量测定 | 第60页 |
| 2.9 液相悬液芯片系统测定蛋白表达 | 第60页 |
| 2.10 总RNA提取及反转录、PCR | 第60页 |
| 2.11 透射电镜观察线粒体 | 第60页 |
| 2.12 细胞耗氧率检测 | 第60页 |
| 2.13 线粒体形态检测 | 第60页 |
| 2.14 统计学方法 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-68页 |
| 3.1 白藜芦醇抑制上皮间质转化 | 第60-62页 |
| 3.2 白藜芦醇干预活性氧水平 | 第62-63页 |
| 3.3 白藜芦醇对线粒体功能的保护作用 | 第63-66页 |
| 3.4 白藜芦醇对线粒体生成的保护作用 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 第四部分 线粒体功能障碍对上皮间质转化的作用 | 第71-78页 |
| 1 材料 | 第71页 |
| 1.1 试剂与耗材 | 第71页 |
| 1.2 主要仪器 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-72页 |
| 2.1 细胞培养及传代 | 第71页 |
| 2.2 CCK8法测定细胞活力 | 第71页 |
| 2.3 细胞凋亡检测 | 第71页 |
| 2.4 蛋白提取 | 第71-72页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹法 | 第72页 |
| 2.6 活性氧及线粒体活性氧测定 | 第72页 |
| 2.7 线粒体膜电位测定 | 第72页 |
| 2.8 细胞内ATP含量测定 | 第72页 |
| 2.9 总RNA提取及反转录、PCR | 第72页 |
| 2.10 统计学方法 | 第72页 |
| 3 结果 | 第72-77页 |
| 3.1 线粒体功能障碍模型建立 | 第72-73页 |
| 3.2 线粒体功能障碍与上皮间质转化的发生 | 第73-75页 |
| 3.3 白藜芦醇对线粒体功能保护作用的机制 | 第75页 |
| 3.4 白藜芦醇对线粒体生成保护作用失效 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-78页 |
| 第五部分 SIRT1/PGC-1α途径对上皮间质转化的作用 | 第78-83页 |
| 1 材料 | 第78页 |
| 2 方法 | 第78-79页 |
| 2.1 细胞培养及传代 | 第78页 |
| 2.2 病毒转染 | 第78页 |
| 2.3 蛋白提取 | 第78页 |
| 2.4 蛋白免疫印迹法 | 第78-79页 |
| 2.5 统计学方法 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-82页 |
| 3.1 转染SIRT1及PGC-1α慢病毒沉默SIRT1及PGC-1α引起蛋白表达改变 | 第79页 |
| 3.2 共沉默SIRT1/PGC-1α促进上皮间质转化 | 第79-82页 |
| 4 讨论 | 第82-83页 |
| 小结 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 个人简历和研究成果 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
