中文摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-12页 |
第1章 绪论 | 第20-40页 |
1.1 综述 | 第20-34页 |
1.1.1 骨肉瘤 | 第20页 |
1.1.2 肿瘤转移 | 第20-31页 |
1.1.3 趋化因子 | 第31-34页 |
1.2 立题背景和意义 | 第34-37页 |
1.3 论文的主要研究内容 | 第37-40页 |
第2章 趋化因子CXCL6及其受体CXCR2与骨肉瘤的关系研究 | 第40-72页 |
2.1 材料仪器 | 第40-43页 |
2.1.1 细胞系 | 第40-41页 |
2.1.2 实验试剂 | 第41-42页 |
2.1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
2.2 实验方法 | 第43-56页 |
2.2.1 利用TCGA数据库分析CXCL6、CXCR2的表达与骨肉瘤患者转移的相关性 | 第43页 |
2.2.2 细胞培养 | 第43-44页 |
2.2.3 RT-PCR检测骨肉瘤细胞株中CXCL6与CXCR2的表达 | 第44-47页 |
2.2.4 Western Blot法检测骨肉瘤细胞株中CXCL6与CXCR2蛋白的表达 | 第47-50页 |
2.2.5 Transwell法检测骨肉瘤细胞迁移和侵袭的差异 | 第50-51页 |
2.2.6 CCK-8法检测rhCXCL6对骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
2.2.7 Transwell法CXCL6中和抗体对骨肉瘤细胞迁移与侵袭的影响 | 第52-54页 |
2.2.8 Western Blot法CXCL6中和抗体对骨肉瘤细胞中EMT相关蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
2.2.9 免疫荧光法检测CXCL6中和抗体对骨肉瘤细胞中EMT相关蛋白表达的影响 | 第55-56页 |
2.3 结果 | 第56-68页 |
2.3.1 CXCL6、CXCR2的表达与骨肉瘤患者发生转移的相关性 | 第56-57页 |
2.3.2 骨肉瘤细胞株中CXCL6与CXCR2在mRNA水平的表达 | 第57-58页 |
2.3.3 骨肉瘤细胞株中CXCL6与CXCR2在蛋白水平的表达 | 第58-59页 |
2.3.4 骨肉瘤细胞迁移和侵袭的差异 | 第59-60页 |
2.3.5 rhCXCL6对骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
2.3.6 CXCL6中和抗体对骨肉瘤细胞迁移、侵袭的影响 | 第61-63页 |
2.3.7 CXCL6中和抗体对骨肉瘤细胞中EMT相关蛋白的影响 | 第63-66页 |
2.3.8 CXCL6中和抗体对骨肉瘤细胞中E-cadherin和N-cadherin表达的影响 | 第66-68页 |
2.4 讨论 | 第68-72页 |
第3章 趋化因子CXCL6与其受体CXCR2对骨肉瘤细胞转移的作用及机制研究 | 第72-102页 |
3.1 材料仪器 | 第72-73页 |
3.1.1 细胞系 | 第72页 |
3.1.2 实验试剂 | 第72-73页 |
3.1.3 实验仪器 | 第73页 |
3.2 实验方法 | 第73-80页 |
3.2.1 Transwell法检测rhCXCL6对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响 | 第73页 |
3.2.2 RNAi法构建骨肉瘤细胞中CXCR2的沉默 | 第73-76页 |
3.2.3 Transwell法检测沉默CXCR2对骨肉瘤细胞的迁移与侵袭的影响 | 第76-77页 |
3.2.4 Western Blot法检测沉默CXCR2对骨肉瘤细胞中EMT相关蛋白表达的影响 | 第77页 |
3.2.5 Western Blot法检测沉默CXCR2对骨肉瘤细胞中信号通路蛋白表达的影响 | 第77-78页 |
3.2.6 Transwell法检测信号通路阻滞剂对骨肉瘤细胞的迁移、侵袭的影响 | 第78-79页 |
3.2.7 Western Blot法检测信号通路阻滞剂对骨肉瘤细胞中EMT相关蛋白表达的影响 | 第79-80页 |
3.3 结果 | 第80-97页 |
3.3.1 rhCXCL6对骨肉瘤细胞迁移、侵袭的影响 | 第80-81页 |
3.3.2 骨肉瘤细胞中CXCR2沉默效率的检测 | 第81-83页 |
3.3.3 沉默CXCR2对骨肉瘤细胞的迁移、侵袭的影响 | 第83-85页 |
3.3.4 CXCR2沉默对骨肉瘤细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响 | 第85-88页 |
3.3.5 CXCR2沉默对骨肉瘤细胞中信号通路蛋白表达的影响 | 第88-91页 |
3.3.6 信号通路阻滞剂对骨肉瘤细胞的迁移、侵袭的影响 | 第91-93页 |
3.3.7 信号通路阻滞剂对骨肉瘤细胞中EMT相关蛋白及其上游蛋白表达的影响 | 第93-97页 |
3.4 讨论 | 第97-102页 |
第4章 趋化因子CXCL6与其受体CXCR2对骨肉瘤生长及肺转移的作用及机制研究 | 第102-118页 |
4.1 材料仪器 | 第102-103页 |
4.1.1 细胞系及动物 | 第102页 |
4.1.2 实验试剂 | 第102-103页 |
4.1.3 实验仪器 | 第103页 |
4.2 实验方法 | 第103-108页 |
4.2.1 慢病毒感染及稳转高表达CXCL6细胞的筛选 | 第103-104页 |
4.2.2 体内裸鼠皮下荷瘤实验 | 第104-107页 |
4.2.3 体内裸鼠肺转移实验 | 第107-108页 |
4.3 结果 | 第108-115页 |
4.3.1 慢病毒转染U2OS细胞CXCL6mRNA表达的鉴定 | 第108页 |
4.3.2 慢病毒转染U2OS细胞CXCL6蛋白表达的鉴定 | 第108-109页 |
4.3.3 皮下荷瘤裸鼠肿瘤生长情况 | 第109-110页 |
4.3.4 免疫组化法检测荷瘤鼠肿瘤组织中PCNA蛋白表达 | 第110-111页 |
4.3.5 荷瘤鼠肿瘤组织中CXCL6蛋白的表达 | 第111-112页 |
4.3.6 荷瘤裸鼠肿瘤组织中p-Akt、Akt及核β-catenin蛋白的表达 | 第112-114页 |
4.3.7 荷瘤裸鼠肺脏形态学观察 | 第114-115页 |
4.4 讨论 | 第115-118页 |
第5章 结论 | 第118-120页 |
参考文献 | 第120-134页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第134-136页 |
致谢 | 第136页 |