致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
主要试剂配制 | 第12-13页 |
第一章 综述 | 第13-20页 |
1.1 病原学 | 第13-14页 |
1.1.1 病毒形态 | 第13页 |
1.1.2 病毒的理化特性 | 第13页 |
1.1.3 培养特性 | 第13页 |
1.1.4 基因组结构与功能 | 第13-14页 |
1.2 流行病学 | 第14-15页 |
1.3 病毒的致病性 | 第15页 |
1.4 实验室诊断方法 | 第15-17页 |
1.4.1 病毒分离 | 第15页 |
1.4.2 核酸检测方法 | 第15-16页 |
1.4.3 血清学方法 | 第16-17页 |
1.5 疫苗研究进展 | 第17-18页 |
1.5.1 灭活疫苗 | 第17页 |
1.5.2 减毒活疫苗 | 第17-18页 |
1.5.3 亚单位疫苗 | 第18页 |
1.5.4 基因重组活载体疫苗 | 第18页 |
1.5.5 DNA疫苗 | 第18页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 鸭坦布苏病毒的分离与鉴定 | 第20-29页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 病料来源与细胞 | 第20页 |
2.1.2 SPF鸡胚和鸭胚 | 第20页 |
2.1.3 参考序列 | 第20页 |
2.1.4 主要试验试剂 | 第20页 |
2.1.5 主要试验仪器 | 第20-21页 |
2.2 方法 | 第21-24页 |
2.2.1 病料的采集与处理 | 第21页 |
2.2.2 病毒的分离 | 第21页 |
2.2.3 病毒的纯化 | 第21-22页 |
2.2.4 病毒的鉴定 | 第22-23页 |
2.2.5 分离株的培养特性 | 第23-24页 |
2.3 结果 | 第24-27页 |
2.3.1 病毒的分离 | 第24页 |
2.3.2 病毒的纯化 | 第24-25页 |
2.3.3 病毒的鉴定 | 第25-26页 |
2.3.4 分离株的培养特性 | 第26-27页 |
2.4 讨论 | 第27-29页 |
第三章 基于GX-15分离株的间接ELISA方法的建立 | 第29-35页 |
3.1 材料 | 第29页 |
3.1.1 试验试剂 | 第29页 |
3.1.2 阳性血清与阴性血清的制备 | 第29页 |
3.1.3 试验仪器 | 第29页 |
3.2 方法 | 第29-31页 |
3.2.1 间接ELISA操作步骤 | 第29-30页 |
3.2.2 抗原包被浓度及血清稀释度的确定 | 第30页 |
3.2.3 酶标抗体工作浓度的优化 | 第30页 |
3.2.4 酶标抗体作用时间的优化 | 第30页 |
3.2.5 显色时间的优化 | 第30页 |
3.2.6 间接ELISA临界值的确定 | 第30页 |
3.2.7 特异性试验 | 第30页 |
3.2.8 敏感性试验 | 第30页 |
3.2.9 重复性试验 | 第30-31页 |
3.3 结果 | 第31-34页 |
3.3.1 抗原包被浓度及血清稀释度的确定 | 第31页 |
3.3.2 酶标抗体工作浓度的优化 | 第31页 |
3.3.3 酶标抗体作用时间的优化 | 第31-32页 |
3.3.4 显色时间的优化 | 第32页 |
3.3.5 间接ELISA临界值的确定 | 第32页 |
3.3.6 间接ELISA步骤 | 第32-33页 |
3.3.7 特异性试验 | 第33页 |
3.3.8 敏感性试验 | 第33页 |
3.3.9 重复性试验 | 第33-34页 |
3.4 讨论 | 第34-35页 |
第四章 GX-15分离株樱桃谷鸭感染模型的建立 | 第35-39页 |
4.1 材料 | 第35页 |
4.1.1 SPF鸡胚和实验动物 | 第35页 |
4.1.2 试验试剂 | 第35页 |
4.1.3 试验仪器 | 第35页 |
4.1.4 试验场地 | 第35页 |
4.2 方法 | 第35-36页 |
4.2.1 DTMUV阴性鸭筛选 | 第35页 |
4.2.2 病毒感染与病毒血症检测 | 第35-36页 |
4.2.3 组织病理学观察 | 第36页 |
4.3 结果 | 第36-38页 |
4.3.1 DTMUV阴性鸭筛选 | 第36页 |
4.3.2 病毒血症检测 | 第36-37页 |
4.3.3 剖检病变观察 | 第37-38页 |
4.3.4 组织病理学观察 | 第38页 |
4.4 讨论 | 第38-39页 |
第五章 鸭坦布苏病毒GX-15分离株免疫原性评价 | 第39-44页 |
5.1 材料 | 第39页 |
5.1.1 SPF鸡胚和实验动物 | 第39页 |
5.1.2 试验场地 | 第39页 |
5.1.3 试验试剂 | 第39页 |
5.1.4 试验仪器 | 第39页 |
5.2 方法 | 第39-41页 |
5.2.1 抗原制备 | 第39页 |
5.2.2 灭活工艺研究 | 第39-40页 |
5.2.3 灭活疫苗的制备与检验 | 第40页 |
5.2.4 疫苗免疫与攻毒保护效果评价 | 第40-41页 |
5.3 结果 | 第41-42页 |
5.3.1 抗原制备 | 第41页 |
5.3.2 灭活工艺研究 | 第41页 |
5.3.3 灭活疫苗的制备与检验 | 第41页 |
5.3.4 疫苗免疫与攻毒保护效果评价 | 第41-42页 |
5.4 讨论 | 第42-44页 |
全文总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
ABSTRACRT | 第51-53页 |